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ESPOROFORMADORES COMO
PROBIÓTICOS HUMANOS
Cristian Baquero Duarte
PROBIÓTICOS“A favor de la vida”
Los probióticos deben poder ejercer sus efectos beneficiosos en el huésped mediante su crecimiento
y/o actividad en el cuerpo humano
FAO, & OMS. (2006).
Lo que importa es la especificidad de la acción, y no la fuente del
microorganismo
La capacidad de seguir siendo viable en el lugar de destino y de ser eficaz debería verificarse para
cada cepa potencialmente probiótica
PROBIÓTICOS
• Prevención de la diarrea causada por ciertas bacterias patógenas y virus• Infección por Helicobacter pylori y complicaciones• Enfermedades inflamatorias y síndromes intestinales• Cáncer• Estreñimiento• Inmunidad mucosa• Alergia• Enfermedades cardiovasculares• Vaginosis bacteriana• Vaginitis por levaduras• Infecciones del aparato urinario
• Probióticos en personas sanas• Mantienen la salud y bienestar, ayudando a reducir el riesgo de
contraer enfermedades intestinales, renales, respiratorias y cardíacas
FAO, & OMS. (2006).
• Producción de sustancias antimicrobianas
• Exclusión competitiva de la fijación de patógenos• Competencia por los nutrientes
• Modulación del sistema inmunitario
PROBIÓTICOS
NORMATIVIDAD
(GRAS) Generally Recognized as Safe
INVIMA
Directrices para la Evaluación de los Probióticos para Uso
AlimentarioIdentificación de la cepa por métodos fenotípicos y
genotípicos •Género, especie, cepa•Depósito de la cepa en una colección de cultivos internacional
Evaluación de la inocuidad• In vitro y/o animal•Fase 1 estudio en seres humanos
Caracterización funcional• Estudios in vitro• Estudios en animales
Ensayos aleatorios de doble anonimato controlados con placebo• Fase 2 de ensayos en seres humanos u otro diseño pertinente
Determinar si la cepa/producto es eficaz
FAO, & OMS. (2006).
Fase 3, (aconsejable) un ensayo de eficacia
• Comparar los probióticos con el tratamiento estándar para una condición específica
Directrices para la Evaluación de los Probióticos para Uso
AlimentarioDe preferencia un segundoestudio DBPC independientepara confirmar los resultados
ALIMENTO PROBIÓTICO
Etiquetado•Contenido – denominación de género, especie, cepa•Numero mínimo de bacterias viables al final de su período de conservación•Condiciones adecuadas de almacenamiento•Datos de contacto con la empresa para información al consumidor.
FAO, & OMS. (2006).
Lactobacillus sp.
Lactobacillus sp.
FDA
Bifidobacterium sp.
FDA
ESPOROFORMADORES
Bacillus Clostridiu
m
Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.
doi:10.1016/j.fm.2010.03.007
• Sobre todo en suelo (anaerobiosis).• Incluso especies patógenas pueden aislarse de suelo.
• Aislados fácilmente de agua o aire y son de los contaminantes más frecuentes.• Encuentran en intestino de mamíferos
• Muchos Bacillus producen antimicrobianos como la bacitracina, polimixina, glamicidina y circulina.
• Producción de antibióticos relacionada con esporulación
• Especies son agentes causales de enfermedad
Bacillus sp.
Lorenz, M. G., & Wackernagel, W. (1994). Bacterial gene transfer by natural genetic transformation in the environment. Microbiological reviews, 58(3), 563–
602.
Bacillus sp.
Lorenz, M. G., & Wackernagel, W. (1994). Bacterial gene transfer by natural genetic transformation in the environment. Microbiological reviews, 58(3), 563–
602.
FDA
Bacillus sp.
Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.
doi:10.1016/j.fm.2010.03.007
Bacillus clausii
Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.
doi:10.1016/j.fm.2010.03.007
• Suspensión de 2x109 esporas en 5mL de agua
• Prevenir la diarrea• Alergias en niños • Cuatro cepas resistentes a
antibióticos• Novobiocina + Rifampicina• Cloranfenicol• Estreptomicina + Neomicina• Tetraciclina• Resistencias estables e incapaces
de transferir??
Bacillus coagulans
Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.
doi:10.1016/j.fm.2010.03.007
• Coagülina (Bacteriocina)• Amplio espectro contra bacterias
entéricas.• Único incluido en el listado GRAS de
la FDA• Alimentos tratados con temperatura.• Terapia complementaria para la AR.• Recientemente cuestionado
• Estudios que comprueben su eficacia son necesarios
Bacillus cereus
Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.
doi:10.1016/j.fm.2010.03.007
• Patógeno humano• Intoxicación alimentaria• Enterotoxinas
• No todas las cepas tiene los genes• Paciflor, uso animal
• Se retiro del mercado• Bactisubtil, misma cepa de Paciflor
Protection activity of a novel probiotic strain of Bacillus subtilis againstSalmonella Enteritidis infection
Investigar la actividad de las cepas de Bacillus spp. para su posible uso como potenciales probióticos, y su actividad de
inhibición protectora contra la infección por Salmonella Enteritidis.
Sallmonella
METODOLOGÍA
24033
117BG+ | E+ | C+
S. Enteritidis S. Typhimurium E. coli Bacillus cereus Staphylococcus aureus L. monocytogenes Vibrio cholerae
ANTAGONISMO
15
TOLERANCIA A ACIDO Y SALES BILIARES
Ligada a una mayor capacidad de adherencia y activar una respuesta inmune benéfica
HIDROFOBICIDAD CELULAR
ADHESIÓN A CÉLULAS EPITELIALES
16s → NC11 → BS
RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS
CITOTOXICIDAD
MEB Control
Salmonella Enteritidis
B. subtilis NC11
B. subtilis NC11 vs. S. Enteritidis sobre celulas
intestinales
• B. subtilis, B. licheniformis, B. pumilus, B. megaterium, B. firmus, B. clausii, y B. cereus
• 117 Aislamientos y solo 15 presentaron actividad antimicrobiana contra bacterias patógenas• S. Enteritidis
• Sobreviven a el ambiente gastrointestinal
• Mayor habilidad de adherencia → Bacillus NC11
• Necesario confirmar si es seguro para uso en humanos
• La inhibición de S. Enteritidis por parte de B. subtilis NC11 es debida a exclusión competitiva por el sitio de adhesión y la producción de sustancias antimicrobianas
• La cepa de B. subtilis NC11 tiene una actividad protectora contra S. Enteritidis
CONCLUSIONES
¿Recomiendan el uso de cepas de Bacillus sp. como probióticos?