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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE
MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA
BIOLOGÍA CELULAR Y BIOQUÍMICA
ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 1
“Estructura celular.”
GRUPO – 1351
PROFESORES
GAVIRIA GONZÁLEZ LLARAÍ CAROLINA
ORTÍZ MELO MARÍA TERESA
INTEGRANTES
CASASOLA SILVA ALEXIS GIOVANNI
HUERTA LÓPEZ MARCELA BONITZÚ
OLMOS GARCÍA RICARDO ERNESTO
PÉREZ HERNÁNDEZ HÉCTOR ANTONIO
RAMÍREZ DOMÍNGUEZ LILIANA BERENICE
VILLARREAL HERNÁNDEZ VIRIDIANA
FECHA DE ENTREGA
2/SEPTIEMBRE/2015
INTRODUCCIÓN.
La invención del microscopio óptico condujo al descubrimiento de las células,
pues en 1665 Robert Hooke empleó este instrumento para examinar un
corcho; se dió cuenta que el corcho estaba constituído por un conjunto de
cámaras diminutas y las denominó “células”, (Alberts et al., 2006).
Con las observaciones continuas de diversos científicos e investigadores a lo
largo del tiempo, en 1839 el botánico Matthias Schleiden y el zoólogo
Theodor Schwann enunciaron la teoría celular, la cual tiene como principio la
idea de que todas las células vivas se forman por la división de células
preexistentes, (Jiménez, 2006).
Existen dos tipos de células en la naturaleza: las procariontes, que están
conformadas de una membrana celular, citoplasma, material genético y
ribosomas; y las eucariontes, son aquellas que tienen, además de las
estructuras anteriores, organelos membranosos y su material genético está
encapsulado en un núcleo. La identificación de las diversos estructuras
celulares ha sido gracias al avance de la microscopía y el desarrollo de la
microscopía electrónica, (Ramírez y Reyes, 2007).
El núcleo generalmente es el orgánulo más destacado de la célula
eucarionte, está rodeado por dos membranas concéntricas que forman la
envoltura nuclear y contiene moléculas de DNA. Al igual que el núcleo, las
mitocondrias tienen una doble membrana que los rodea y contienen DNA,
además éstas se reproducen por división. Por otro lado se encuentran los
cloroplastos, presentes sólo en células vegetales que, además de las dos
membranas que los rodean, presentan membranas internas apiladas que
contienen clorofila, la cual le dará pigmento a la célula.
Además del núcleo, las mitocondrias y los cloroplastos, el citoplasma
contiene muchos otros orgánulos como: el retículo endoplásmico, es un
laberinto irregular de espacios interconectados rodeados por una membrana
plegada, y encargado de la mayoría de los componentes de la membrana
celular; el aparato o complejo de Golgi, constituido por pilas de sacos
aplanados envueltos por membranas, recibe y a menudo modifica
químicamente las moléculas producidas en el retículo endoplásmico para,
posteriormente expulsarlas de la célula o hacia otras localizaciones dentro de
la misma; los lisosomas, que son orgánulos pequeños de forma irregular en
lo que ocurre la digestión celular; y los peroxisomas que son vesículas
pequeñas cubiertas de membrana que proporcionan el ambiente adecuado
para las reacciones que generan y degradan peróxido de hidrógeno, (Alberts
et al., 2006).
Las células vegetales también disponen de una vacuola, la cual realiza
hidrólisis y a medida que absorbe agua aumenta el tamaño de la célula,
permitiendo que ésta se haga más grande con una inversión mínima en
citoplasma nuevo, (Campbell y Reece, 2007).
OBJETIVOS.
● Observar, distinguir y describir diferentes tipos celulares.
● Observar algunas diferencias importantes entre las células vegetales y
animales.
● Observar y distinguir algunos organelos celulares visibles al
microscopio óptico.
● Observar los fenómenos osmóticos de plasmólisis y turgencia en
eritrocitos y en células de espinaca.
MATERIALES.
● 12 portaobjetos y 12 cubreobjetos.
● 2 agujas de disección.
● 2 pipetas Pasteur con bulbo.
● 2 microscopios ópticos.
● 3 cajas de Petri.
● 6 triángulos de vidrio.
● 8 tubos de microcentrífuga.
● Gradilla para tubos de microcentrífuga.
● 1 pinza de disección.
● 1 vaso de precipitados de 50 mL.
● 1 paño para limpiar cristales.
● 1 gotero con aceite de inmersión.
● Tubos capilares.
● Alcohol al 70%
● Hojas frescas de una planta suculenta.
● Algodón.
● Espinaca.
● Piezas frescas de cebolla blanca, morada y cambray
REACTIVOS.
● Medio líquido Sabouraud.
● Azul de tripano al 0.5%
● Rojo neutro al 0.1%
● Cultivo de levadura en medio líquido.
● Colorante Wright al 0.2% en metanol.
● Cloruro de sodio al 3%
● Rojo neutro al 1%
● Azul de metileno
● NaCl al 0.6%, 0.9% y 1.2%
METODOLOGÍA.
RESULTADOS.
Las siguientes imágenes muestran algunos de los organelos ubicados a partir
de tinciones y empleando el microscopio óptico , observando células
vegetales, animales y procariotas.
Figura 1. Levadura de pan (Saccharomyces cerevisiae) teñida
con rojo neutro al 1% (100X).
c) b)
Figura 2. Células epidérmicas de cebolla teñidas con azul de tripano 0.5%. a) 10X, b) 40X.
a) b) c)
Figura 3. Muestra de raspado bucal (cara interna de la mejilla) fijada con colorante de
Wright. a) 10X, b) 40X, c) 100X.
a) b)
Fig 4. Estomas de hojas de planta suculenta. a) 40X, b) 10X.
a) b b)
Figura 5. tejido de jitomate. a) 10X, b) 40X.
a) b)
Figura 6. Células epidérmicas de cebolla morada. a) 10X, b) 40X.
a) b)
Figura 7. Células epidérmicas de la zona verde de cebolla cambray. a) 10X, b) 40X.
Figura 8. Eritrocitos en solución de NaCl al 0.6% (100X).
a) b) c)
Figura 9. Hojas de espinaca en soluciones de NaCl. a) 0.6%, 10X, b) 0.9%, 40X, c) 1.2%,
10X.
a) b)
Figura 10. Muestra de yogurt fijada teñida con tinta china. a) 40X, b) 100X.
DISCUSIÓN.
En el núcleo están contenidos la mayoría de los genes de la célula eucariota, posee un diámetro aproximado de 5 microm. Este organelo está limitado por una doble membrana que forma la envoltura nuclear, la parte externa continúa con el retículo endoplásmico rugoso y la interna está formada por una red de filamentos, (Campbell, et. al., 2007). Al ser observado en microscopio, se presenta como un sitio circular oscuro, debido a que es un área más densa por su alto contenido en proteínas y el súper empaquetamiento del DNA; conforme a esto, en las figura 2 se aprecia una región en el interior de la célula que concuerda con la descripción antes planteada por lo que se infiere que se trata del núcleo. Además el azul tripano (azul diamina, azul niágara, azul vital) es un colorante derivado de la toluidina que posee la capacidad de teñir a tejidos y células muertas (Ehrlich, 1904), al aplicarlo en la epidermis de la cebolla las células se tornan azules, como se puede ver en la Fig 2 a) (10x) y b) (40x, donde también se puede
observar ligeramente el núcleo, por lo que inferimos que estas células se encontraban muertas.
Durante la tinción de células de la mucosa bucal, se pudo constatar que, a diferencia de las células vegetales, las células animales no tienen pared celular; si bien se pueden distinguir los límites de las células, no hay una línea de separación como en el caso de tejidos vegetales, tal como se ilustra en la figura 3 donde claramente se observa el citoplasma, más teñido que su alrededor lo que nos indica una limitación y el núcleo también claramente visible de un color más pronunciado.El colorante Wright, usado durante la muestra en la figura 3 está compuesto por colorantes ácidos (eosina) y colorantes básicos (azul y violeta de metileno) (Dox et. al. 1983) por lo que el núcleo de la célula que posee un carácter ácido, es teñido de un color violeta debido a la interacción de los colorantes básicos, en especial el violeta de metilo, que posee la capacidad de unirse directamente con el ADN.
Como se puede observar en la figura 4 a) y b) las células estomáticas tienen forma arriñonada, un núcleo grande bien definido y cloroplastos pequeños, estas células tienen paredes ventrales gruesas adyacentes al poro y paredes dorsales delgadas lo cual favorece la apertura del estoma durante intercambio gaseoso (IICA, 1998).
La imagen 5 que hace referencia a la muestra de jitomate, la cual no se pudo observar detalladamente debido a que la muestra era de un grosor no idóneo por lo que sólo se puede observar algunos puntos rojos fluctuando sobre el medio acuoso, estos, se infiere son los cromóforos. Los cromóforos son los responsables de la coloración de gran número de alimentos vegetales, la principal función de estos es captar la energía que luego es transferida a las clorofilas para ser utilizada en la fotosíntesis (Meléndez-Martínez et. al., 2004)
Con respecto a la figura 6 a) y b) sólo se pueden discernir las paredes celulares debido a que es lo único que no está teñido por las antocianinas (pigmentos hidrosolubles que se hallan en las vacuolas de las células vegetales y que otorgan el color rojo, púrpura o azul a las hojas, flores y frutos) (Taiz y Zeiger,2006).
La pared celular en los tejidos de células vegetales que se analizaron durante la práctica son fácilmente visibles en todos los casos, debido a que su ancho es mayor que el de la membrana plasmática (va de 0.1 micrómetros hasta varios micrómetros). Esto nos permite determinar y diferenciar los límites de las células así como observar su acomodo (Campbell, et. al., 2007).Los cloroplastos son organelos membranosos encargados de la fotosíntesis, dicho proceso se lleva a cabo debido a la intervención de diversos pigmentos como la clorofila presentes en este organelo, por lo que se puede apreciar diversas coloraciones en estos pigmentos sin que se requiera una tinción, tal
como se muestra en las Figuras 7 a) en el segmento de células verdes de rabo de cebolla cambray (De Erice, et. al., 2012).Durante las pruebas osmóticas realizadas tanto en eritrocitos como en células de espinaca, figuras 8 y 9. Se pudo distinguir ligeros cambios morfológicos en ambos tipos de células al alterar la cantidad de soluto (NaCl) esto se debe a la permeabilidad selectiva de la membrana desde una zona de alta concentración de solvente hacia una zona de baja concentración (Tortora, et. al., 2007). De esta forma las células al estar expuestas a la solución de NaCl al .06% es decir una solución hipotónica; el agua se desplazó hacia el interior de la célula provocando ligero aumento en el volumen de la célula, sin embargo ya que la pared celular es una estructura relativamente rígida en las células vegetales estas no sufrieron lisis (figura 8), no obstante, la entrada de agua está limitada por la presión ejercida por la pared celular (Campbell,2008). De manera opuesta, las células al ser expuestas a la solución hipotónica de NaCl 1.2% el agua se desplazó del citoplasma hacia el exterior resultando en un proceso denominado plasmólisis., finalmente en la solución isotónica de NaCl al 9% la proporción de soluto tanto en el interior como en el exterior se encontraban en equilibrio por lo que las células no presentaron cambios morfológicos (Tortora, et. al., 2007).
En la muestra de la figura 10 se utilizó tinción negativa, en la cual la célula se deja sin teñir pero se colorea el medio que las rodea, por lo que se ve es el perfil de las células. La sustancia que se usa para la tinción negativa es un material opaco que no tiene afinidad por los constituyentes celulares y que simplemente rodea a la célula, como es el caso de la tinta china que permite ver células levaduriformes capsuladas debido a que los polisacáridos capsulares rechazan la tinta china y la cápsula aparece como un halo claro alrededor de los microorganismos; aunque no es precisamente el caso debido a que lo que observamos es la célula totalmente coloreada y el medio sin ninguna tinción( Valdéz, 2012).
CONCLUSIONES.
Se distinguió, observó y describió a los diferentes tipos celulares.
Se identificaron algunas diferencias importantes entre la célula vegetal
y animal.
Se ubicaron algunos organelos celulares visibles al microscopio.
Se observaron los fenómenos osmóticos de plasmólisis y turgencia en
eritrocitos y en células de espinaca.
REFERENCIAS.
● Alberts, B., Dennis, B., Hopkin, K., Jonhson, A., Lewis, J., Raff, M.,
Roberts, K. y Walter, P. 2006. Introducción a la Biología Celular. 2° ed.
Editorial Medica Panamericana. México. 6-24 pp.
● Campbell, N. A. y Reece, B. J. 2007. Biología. 7° ed. Editorial Medica
Panamericana. España. 107-108 pp.
● Campbell, N. A. y Reece, B. J.2008.Biology, 8th Edition. California, The
Benjamin / Cummings Publishing Company, Inc.
● De Erice, E. y González, A. 2012. Biología: La ciencia de la vida.
McGrawHill. México. 98-107 pp.
● IICA. 1998.Curso regional sobre nutrición mineral del café. San José,
Costa Rica.
● Jiménez, L. F. 2006. Conocimientos fundamentales de Biología.
Universidad Nacional Autónoma de México. México. 32-37 pp.
● Meléndez-Martínez A., Vicario I. y Heredia F., 2004. Importancia
nutricional de los pigmentos caroteniodes. Archivos latinoamericanos
de nutrición. Vol. 54 (2). 149-154 pp
● Melloni, B., Dox, Eisner,. 1983. Diccionario Medico Ilustrado de
Melloni. Editorial REVERTE. España. 116-117 pp.
● Ramírez, L. J. E. y Reyes L. A. 2007.Manual de prácticas de biología.
Editorial Pretice Hall. Chile. 23 pp.
● Taiz, L.y Zeinger, E. 2006. Fisiología vegetal. Universidad de Jasume.
Pp. 501-505.
● Tortora, G., Funke, B., Case, C., 2007. Introducción a la microbiología,
9na. Médica panamericana. Buenos Aires Argentina. 94-95p.p.
● Valdéz, Daniel. 2012 recuperado de
www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm el 1
septiembre de 2015,