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50278434 Metodos Oficiales de an Lisis Leche

Date post: 09-Jul-2015
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A N A L I T I C O SM E T O D O S

E N

A L I M E N T A R I AD E A N A L I S I S

O F I C I A L E S

Leche y productos lcteos

PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nueva edicin de sus folletos de Mtodos Analticos en Alimentaria, en la que podrn apreciar a simple vista un cambio de formato respecto a las anteriores.M E T O D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A

Esta nueva imagen, pretende ser una expresin de los cambios que con el tiempo hemos experimentado en nuestros campos de actividad, puesto que si continuamos manteniendo una importante implantacin en el sector alimentario como fabricantes de reactivos para anlisis PANREAC y de los aditivos alimentarios ADITIO, actualmente hemos aumentado nuestra aportacin de productos para el anlisis alimentario con nuestras lneas de Cromatografa en Capa Fina PANREAC-TLC y Medios de Cultivo Deshidratados para Microbiologa CULTIMED. La coleccin Mtodos Analticos en Alimentaria se compone de 6 folletos monogrficos, por campos de alimentos, que recogen una transcripcin ntegra de los mtodos oficiales de anlisis en Espaa, que a su vez son publicados en los correspondientes B.O.E. mencionados en el ndice de cada monografa incorporando los reactivos y productos auxiliares PANREAC en la calidad considerada ms idnea, as como los medios de cultivo CULTIMED.

MLos ttulos de las 6 monografas son:

Aceites y grasas Aguas potables de consumo pblico y aguas de bebida envasadas Carne y productos crnicos Cereales, derivados de cereales y cerveza Leche y productos lcteos Productos derivados de la uva, aguardientes y sidrasObviamente esta edicin ha sido actualizada con las disposiciones publicadas hasta el momento, que establecen nuevos procedimientos o que modifican notablemente caractersticas anteriormente establecidas. Por ltimo, comentarles que estn a su disposicin adems de esta coleccin, nuestros: Catlogo General de Reactivos PANREAC Catlogo ADITIO de Aditivos Alimentarios Catlogo CULTIMED de Medios de Cultivo Deshidratados Catlogo PANREAC-TLC de Placas, Folios y Accesorios para Cromatografa en Capa Fina.

I N D I C E

Leche: I. Leches natural, certificada, higienizada, esterilizada, desnatada, concentrada, evaporada, condensada y en polvoMETODOS DE ANALISIS (B.O.E. 20-7-1977, 21-7-1977, 31-5-1990 Y 3-1-1994) Mtodos oficiales de toma de muestras de leches parcialmente deshidratadas y en polvo ..................... 1a- Grasa (Leches natural, certificada, higienizada y esterilizada) ..................... 1b- Grasa (Leche desnatada) ..................... 1c- Grasa (Leche concentrada, evaporada y condensada) .................... 1d- Grasa (Leche en polvo) ........................ 1e- Grasa (Leche natural) (Mtodo Gerber) . 2Protenas ............................................. 3Casena ............................................... 4Lactosa ............................................... 5a- Extracto seco (Leches natural, certificada, higienizada y esterilizada) ... 5b- Extracto seco (Leches concentrada, evaporada y condensada) .................... 6Cenizas ............................................... 7Potasio Dicromato ............................... 8a- Acidez (Leches natural, certificada, higienizada y esterilizada) ..................... 8b- Acidez (Leche en polvo) ....................... 9Sacarosa (Determinacin polarimtrica en la leche condensada) ...................... 10- Humedad (Leche en polvo) .................. 11- Indice de solubilidad (Leche en polvo) .. 12- Calcio .................................................. 13- Fsforo ................................................ 14a- Harina de alfalfa (Mtodo comparativo) (B.O.E. 30-8-1979).......... 14b- Harina de alfalfa (Mtodo gravimtrico). 15- Fenolftalena en leche desnaturalizada (Mtodo cualitativo) ..... 16- Fcula (Mtodo comparativo) ............... 17- Salvado ............................................... 18- Fcula + Salvado ................................. 19- Sustancias proteicas reductoras (B.O.E. 14-10-81) ................................ 20- Residuo insoluble de sangre (B.O.E. 20-1-1982) .............................. 21- Deteccin de leche de vaca en mezclas con leche de oveja y cabra ..... 22- Sangre soluble ..................................... 0-

8 14 16 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 27 28 28 31 31 32 34 35 36 37 37 37 38 38 40 40 42

M23a- Determinacin de leche de vaca en leche de oveja o de cabra (por electroforesis) ...................................... 23b- Determinacin de leche de vaca en leche de oveja o de cabra (mtodo inmunolgico) ...................................... 24a- Determinacin de leche de cabra en leche de oveja (por electroforesis).... 24b- Determinacin de leche de cabra en leche de oveja (mtodo inmunolgico) ...................................... 25- Determinacin de suero de quesera en leche mediante anlisis de los glicomacropptidos por cromatografa lquida de alta eficacia.......................... 543 6745 47 8910Deteccin de grasa vegetal en grasa de leche por cromatografa de gases de esteroles.............................................. Fosfatasa residual en mantequilla ......... Indices de cidos grasos voltiles solubles e insolubles .................................. Indice de Kirschner .............................. Acidos grasos de cadena corta............ Extraccin de la grasa en mantequilla .. 74 76 78 80 80 84

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QuesoI. ORDEN DE 29 DE NOVIEMBRE DE 1985 POR LA QUE SE APRUEBAN LAS NORMAS DE CALIDAD PARA QUESOS Y QUESOS FUNDIDOS DESTINADOS AL MERCADO INTERIOR. (B.O.E. 6-12-1985)................ 86 II. METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 30-8-1979 Y 30-10-1991) 012345678Tcnica de toma de muestra (B.O.E. 5-8-1970) ............................................ Extraccin de la grasa del queso ......... Determinacin del contenido en materia grasa....................................... Determinacin del contenido de extracto seco....................................... Determinacin del contenido en fsforo Determinacin del contenido en cido ctrico .................................................. Determinacin del contenido en lactosa . Nitratos y nitritos.................................... Determinacin de leche de vaca en queso de oveja o de cabra (por electroforesis) ................................................... Determinacin de leche de cabra en queso de oveja (por electroforesis).........

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Leche: II. Leches evaporada rica en grasa, entera condensada, en polvo rica en grasa o extragrasa, concentrada.METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 4-2-1989) 0Preparacin de la muestra para el anlisis qumico y consideraciones generales............................................. Extracto seco (Estufa) .......................... Humedad (Estufa) ................................ Materia grasa (Mtodo Rose-Gottlieb) .. Materia grasa (Mtodo Rose-Gottlieb) .. Sacarosa (Mtodo polarimtrico) .......... Acido lctico y lactatos ........................ Actividad de la fosfatasa (Mtodo de Sanders y Sager modificado) .......... Actividad de la fosfatasa (Mtodo de Aschaffenburg y Mullen) ..................

91 92 93 95

12345678-

53 54 55 56 58 61 63 64 66

97 98 105

108 109

9-

YogurI. ORDEN DE 1 DE JULIO DE 1987 POR LA QUE SE APRUEBA LA NORMA DE CALIDAD PARA EL YOGUR O YOGHOURT DESTINADO AL MERCADO INTERIOR. (B.O.E. 3-7-1987)....................................... 111 II. METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 3-7-1987). 1Preparacin de la muestra. Norma Chimie Ministerio de Agricultura francs XIV-1 ................................................... 113 Determinacin del contenido en materia grasa (Mtodo Acido Butiromtrico). Norma Chimie Ministerio de Agricultura francs XIV-3 ....................................... 113

MantequillaMETODOS DE ANALISIS (B.O.E. 21-71977, 22-7-1977, 30-8-1979, 30-10-91) 01234Toma de muestra (B.O.E. 5-1-1975, Anejo nico apartado 1.)......................... Indice de acidez de la grasa ................... Indice de refraccin de la grasa .............. Sodio Cloruro ......................................... Agua, extracto seco magro y grasa en una sola muestra .................................

70 71 71 72 72

2-

3-

4-

5-

6-

Determinacin de la materia seca (Mtodo por secado). Norma Chimie Ministerio de Agricultura francs XIV-2 ............ 115 Identificacin de colorantes, edulcorantes,espesantes y conservadores .......... 116 Mtodos seleccionados y recomendados por el Centro Nacional de Alimentacin y Nutricin. Analisis microbiolgico. Mtodos seleccionados y recomendados por el Centro Nacional de Alimentacin y Nutricin .............................................. 116 Fenolftalena (Mtodo cualitativo) (B.O.E. 30-8-1979 apartado 15(b)) ....... 116

CuajadaORDEN DE 14 DE JUNIO DE 1983 POR LA QUE SE APRUEBA LA NORMA DE CALIDAD PARA LA CUAJADA EN EL MERCADO INTERIOR. ............................... 118

NataORDEN DE 12 DE JULIO DE 1983 POR LA QUE SE APRUEBAN LAS NORMAS DE CALIDAD PARA LA NATA Y NATA EN POLVO CON DESTINO AL MERCADO INTERIOR. ..................................................... 121

Relacin de reactivos y productos auxiliares que se utilizan en los mtodos analticos, Leche y Productos Lcteos ........................................... 127 Aditivos y coadyuvantes tecnolgicos para uso alimentario industrial .................................... 131

M

Leche: I. Leches natural, certificada, higienizada, esterilizada, desnatada, concentrada, evaporada, condensada y en polvo.

METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 20-7-1977, 21-7-1977, 31-5-1990 Y 3-1-1994) 0. METODOS OFICIALES DE TOMA DE MUESTRAS DE LECHES PARCIALMENTE DESHIDRATADAS Y EN POLVO 0(a). TOMA DE MUESTRAS DE LECHES PARCIALMENTE DESHIDRATADAS 0(a).1. Objeto. Obtener de una partida determinada una muestra representativa, con carcter oficial, para poder comprobar a partir de ellas sus caractersticas fsico-qumicas. 0(a).2. Ambito de aplicacin. Este mtodo de toma de muestras se aplicar a: Leche concentrada. Leche evaporada. Leche condensada. Bien sean desnatadas, semidesnatadas, enteras y/o ricas en grasa. 0(a).3. Definiciones. Partida: La cantidad de producto que constituye una unidad de caractersticas presuntamente uniformes. Cuando la cantidad de producto a muestrear sea superior a 100 Tm, se fraccionar, tericamente y a efectos de muestreo, en tantas partidas de hasta 100 Tm como sea necesario. Toma elemental: Cantidad tomada en un punto de la partida. Muestra global: Conjunto constituido por las tomas elementales efectuadas de la misma partida, homogeneizada o no segn se indica ms adelante. Muestra reducida: Parte representativa de la muestra global obtenida por reduccin de sta. Muestra final: Parte de la muestra reducida o de la muestra global, previamente homogeneizada. 0(a).4. Material y aparatos. 0(a).4.1. Condiciones generales.- Los aparatos y utensilios destinados a la toma de muestras de leches parcialmente deshidratadas debern ser de acero inoxidable u otro material idneo, no absorbente, de resistencia adecuada, que no provoque alteracin alguna que pudiera afectar a los resultados de los anlisis. El equipo ser de construccin lo suficientemente fuerte para evitar que se deforme durante su utilizacin. Todas las superficies debern estar pulidas y exentas de grietas, y todos los ngulos debern ser redondeados. 0(a).4.2. Agitadores para lquidos.- Los agitadores para mezclar lquidos a granel tendrn una superificie suficiente para remover el producto de

manera adecuada sin que se produzcan malos olores. Considerando los diferentes tamaos y formas de los recipientes, no puede recomendarse ningn diseo especfico de agitador para todos los fines, pero se disearn de forma que se evite araar la superficie interna de los recipientes durante la agitacin. Una forma recomendada de agitador para homogeneizar lquidos en cubos o bidones tiene las siguientes dimensiones (figura 1):DIMENSIONES EN MILIMETROS

Figura 1 Agitador de lquidos para bidones y cubos

Disco de 150 mm de dimetro, perforado con seis agujeros de 12,5 mm de dimetro cada uno, siguiendo una circunferencia de 100 mm de dimetro: el centro del disco se fija a una barra metlica, cuyo otro extremo es un mango en forma de asa. La longitud de la barra, incluyendo el mango, ser de un metro aproximadamente. Un agitador adecuado para las cisternas de camiones, granjas y trenes deber tener las siguientes dimensiones aproximadas (figura 2):DIMENSIONES EN MILIMETROS

Figura 2 Agitador de lquidos adecuado para cisternas de camiones, granjas y trenes

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Una barra de no menos de dos metros de longitud, con un disco de 300 mm de dimetro, perforado con doce agujeros de 30 mm de dimetro cada uno siguiendo una circunferencia de 230 mm de dimetro. Para homogeneizar el contenido de recipientes grandes, es recomendable la agitacin elctrica o mecnica o mediante aire comprimido limpio. Se utilizar un mnimo de presin y de volumen de aire para evitar la formacin de malos olores. Siempre que en este mtodo se requiera "aire comprimido limpio", es necesario utilizar aire comprimido exento de contaminantes (incluyendo aceite, agua y polvo).

M0(a).4.3. Agitador.- De hoja ancha, de suficiente profundidad para alcanzar el fondo del recipiente del producto y que tenga preferentemente un borde adaptado al contorno del recipiente (ver figura 3). de la muestra y en un informe se anotar esta circunstancia. 0(a).5.1.1. Toma de muestras de productos envasados en recipientes pequeos para la venta al por menor.- La muestra ser constituida por el recipiente intacto y sin abrir. Se tomar uno o ms recipientes del mismo lote o nmero de cdigo para formar una muestra de no menos de 200 g. 0(a).5.2. Toma de muestras de leche condensada. 0(a).5.2.1. Generalidades.- La toma de muestras de recipientes a granel de leche condensada puede ser de gran dificultad, especialmente cuando el producto es muy viscoso y no est homogeneizado. Pueden surgir problemas por la presencia de grandes cristales de sacarosa o de lactosa, o por la precipitacin de algunas sales que pueden aparecer en toda la masa del producto o adherirse a las paredes, o por la presencia de grumos. Estas condiciones pueden apreciarse si se introduce una varilla de muestreo en el recipiente del producto y se retira despus de explorar una superficie del recipiente tan amplia como sea posible. Si el tamao de los cristales de azcar no es mayor de 6 mm, no debern encontrarse dificultades en la toma de muestras por esta causa. Si el producto no es homogneo, hay que anotarlo en la etiqueta de la muestra y en el informe. Como la leche condensada se almacena con frecuencia a temperatura ambiente, se recomienda que para obtener una muestra representativa se mantenga el contenido a una temperatura no inferior a 20C. 0(a).5.2.2. Recipientes abiertos (barriles).- Se separar la tapa del recipiente previamente limpia y seca para evitar que caiga materia extraa durante el proceso de apertura. El contenido se homogeneizar utilizando un agitador (ver figura 3). Se pasar la hoja por los lados y el fondo del recipiente para eliminar cualquier producto que estuviera adherido. Se homogeneizar totalmente el contenido mediante una combinacin de movimientos de rotacin y verticales, con el agitador inclinado en diagonal, teniendo cuidado para evitar la incorporacin de aire a la muestra. Se extraer el agitador y la leche condensada adherida a l pasar a un recipiente de cinco litros (0(a).4.6.) utilizando una esptula o una cuchara. Se repetir el proceso de homogeneizacin y extraccin hasta que renan dos-tres litros. Estos se agitarn hasta homogeneidad y se tomar una muestra de no menos de 200 gramos. 0(a).5.2.3. Bidones cerrados con tapones en el extremo o en el lado.- Por las razones descritas en 0(a).5.2.1. la toma de muestras a travs del agujero del tapn slo es adecuada con leche condensada que fluye fcilmente y que sea de consistencia uniforme. El contenido se mezclar

Figura 3 Agitador adecuado para homogeneizar leche condensada en barriles.

Figura 4 Cazo adecuado para lquidos

0(a).4.4. En la figura 4 se muestra un cazo de forma y tamao adecuado para la toma de muestras. El cazo deber estar dotado de un mango slido de al menos 150 mm de longitud. La capacidad del cazo ser de al menos 50 ml. Es preferible que el mango sea curvado. Tambin puede utilizarse un cazo de capacidad semejante pero que tenga lados paralelos graduados en cinco secciones iguales para facilitar la toma de muestras, proporcionalmente, de ms de un recipiente. 0(a).4.5. Varilla.- Redonda, de un metro de longitud y 35 mm de dimetro aproximadamente. 0(a).4.6. Recipiente.- Para el submuestreo, con cinco litros de capacidad y boca ancha. 0(a).4.7. Cuchara o esptula de rama larga.- De hoja ancha. 0(a).4.8. Recipientes para muestra.- Sern preferentemente opacos. En caso de que fueran transparentes, el recipiente con su contenido deber colocarse en lugar oscuro. Ver 0(a).4.1, 0(a).7.1, 0(a).7.3 y 0(a).7.4. 0(a).5. Procedimiento. 0(a).5.1. Toma de muestras de leche concentrada y evaporada.- La muestra se homogeneizar convenientemente utilizando los procedimientos manuales o mecnicos adecuados. Tomar la muestra inmediatamente despus de la homogeneizacin utilizando un cazo, siendo su peso de no menos de 200 g. En este caso, en la etiqueta

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introduciendo una varilla a travs del agujero y, despus de moverlo y agitarlo en la medida de lo posible en todas las direcciones, se extraer la varilla y se preparar una muestra segn se describe en 0(a).5.2.2. Tambin puede efectuarse dejando que el contenido pase a un recipiente adecuado, teniendo cuidado de que pase la mayor cantidad posible del bidn. Despus de agitar con un agitador se formar la muestra segn se describe en 0(a).5.2.2. 0(a).5.2.4. Toma de muestras de productos envasados en recipientes pequeos para la venta al por menor.- La muestra estar constituida por el recipiente intacto y sin abrir. Tomar uno o ms recipientes del mismo lote o nmero de cdigo para formar una muestra de no menos de 200 gramos. 0(a).6. Exigencias cuantitativas. El acceso a la partida debe ser tal que permita tomar muestras de todas las partes que la componen. Todos los envases debern ser de la misma partida y tomados en distintos puntos de ella. 0(a).6.1. Tomas elementales.- El muestreo debe ser representativo de la partida examinada, por lo

que el nmero mnimo de tomas elementales sern las indicadas en el cuadro. 0(a).6.2. Muestra global.- La totalidad de la masa o volumen de las tomas elementales destinadas a construir la muestra global no puede ser inferior a: Cuatro kilos en los graneles y productos envasados en envases con un contenido superior a 1 kilo. Seiscientos gramos en productos envasados con un contenido inferior a 1 kilo. 0(a).7. Instrucciones referentes a las tomas, preparacin y el acondicionamiento de las muestras. 0(a).7.1. Generalidades.- Tomar y preparar las muestras lo ms rpidamente posible, teniendo en cuenta las precauciones necesarias para evitar que el producto se altere o contamine. Los aparatos y utensilios, as como las superficies y recipientes destinados a recibir las muestras deben estar limpios y secos. 0(a).7.2. Preparacin de las muestras globales.- Reunir las tomas elementales para constituir una sola muestra global. 0(a).7.3. Preparacin de las muestras para su anlisis.- Tomar las precauciones necesarias para

Nmero de tomas elementales 0(a).6.1.1 Graneles: Partidas que no excedan de 2,5 toneladas Partidas de ms de 2,5 toneladas..................

0(a).6.1.2 Productos envasados: 0(a).6.1.2.1 Envases con un contenido superior a 1 kilogramo. Partidas compuestas de 1 a 4 envases.......... Partidas compuestas de 5 a 16 envases........ Partidas compuestas de ms de 16 envases..

7 20 veces el nmero de toneladas de que conste la partida, limitado a un mximo de 40 tomas elementales.

Todos los envases 4 Del nmero de envases que compongan la partida, limitado a un mximo de 20 envases.

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0(a).6.1.2.2 Envases con un contenido igual o inferior a 1 kilogramo: Partidas hasta 100 envases........................... Partidas de 101 a 1.000 envases................... Partidas de 1.001 a 10.000 envases.............. Partidas de ms de 10.000 envases..............

3 6 12 12+3 ms por cada fraccin de 2.500 envases (que exceda de 10.000).

Cuando la cifra obtenida sea un nmero fraccionario, se redondear ste hasta el nmero entero inmediatamente superior.

Mevitar cualquier modificacin de la composicin de los ejemplares de la muestra, contaminacin o alteracin que pueda sobrevenir en el transcurso de la toma, del transporte o del almacenamiento. 0(a).7.3.1. Productos a granel o envasados para venta al por mayor superiores a 1 kilogramo.Mezclar con cuidado cada muestra global para obtener una muestra homognea. Si es necesario, reducir la muestra global hasta dos kilos (muestra reducida). Preparar a continuacin tres ejemplares de la muestra final que tengan la misma masa o el mismo volumen, aproximadamente. Introducir cada ejemplar en un recipiente apropiado. 0(a).7.3.2. Productos envasados para la venta al detalle: La muestra final estar formada por la totalidad de las tomas elementales, las cuales se repartirn en tres bloques iguales, cada uno de los cuales constituir un ejemplar de la muestra final. 0(a).7.4. Acondicionamiento de las muestras para anlisis.- Etiquetar y precintar o sellar los recipientes o los envases que las contenga (la etiqueta debe estar incorporada en el sello o precinto) de manera que le sea imposible abrirlos sin deteriorar el precinto o sello, manteniendo la temperatura adecuada en cada caso. 0(a).8. Personal autorizado. Las tomas de muestras destinadas a controles oficiales se llevarn a cabo por personal autorizado y acreditado por los Organismos competentes. 0(a).9. Acta de la toma de muestra. Cada muestra deber estar identificada por un acta que permita determinar sin ambigedad la partida controlada. 0(b). METODO DE TOMA DE MUESTRAS DE LECHES EN POLVO 0(b).1. Objeto. Obtener de una partida determinada una muestra representativa, con carcter oficial, para poder comprobar a partir de ella sus caractersticas fsico-qumicas. 0(b).2. Ambito de aplicacin. Este mtodo de toma de muestras se aplicar a: Leche entera en polvo. Leche descremada en polvo. Leche en polvo parcialmente descremada. Leche en polvo con alto contenido en grasa. 0(b).3. Definiciones Partida: La cantidad de producto que constituye una unidad de caractersticas presuntamente uniformes. Cuando la cantidad de producto a muestrear sea superior a 100 toneladas, se fraccionar, tericamente y a efectos de muestreo, en tantas partidas de hasta 100 toneladas como sea necesario. Toma elemental: Cantidad tomada en un punto de la partida. Muestra global: Conjunto constituido por las tomas elementales efectuadas en la misma partida, homogeneizada o no segn se indica ms adelante. Muestra reducida: Parte representativa de la muestra global obtenida por reduccin de sta. Muestra final: Parte de la muestra reducida o de la muestra global, previamente homogeneizada. 0(b).4. Material y aparatos. 0(b).4.1. Condiciones generales.- Los aparatos y utensilios destinados a la toma de muestras de leche en polvo debern ser de acero inoxidable u otro material idneo, no absorbente, de resistencia adecuada, que no provoque alteracin alguna que pudiera afectar a los resultados de los anlisis. El equipo ser de construccin lo suficientemente fuerte para evitar que se deforme durante su utilizacin. Todas las superficies debern estar pulidas y exentas de grietas y todos los ngulos debern ser redondeados. 0(b).4.2. Sondas: Larga (tipo A) y corta (tipo B) (ver figura 1).- Las dimensiones de las sondas, ya sean de hendidura larga o dividida en compartimentos, corta o de cualquier otro tipo, debern adaptarse a las caractersticas de la partida (profundidad del recipiente, dimensiones del saco, etc.) y al tamao de las partculas que componga la leche en polvo.

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Figura 1. Sondas para leche en polvo (todas las dimensiones se expresan en mm)

La hoja y el cierre debern ser de metal pulido, preferentemente de acero inoxidable. El mango de tipo largo tambin deber ser preferentemente de acero inoxidable. La sonda de tipo corto tendr un mango desmontable de madera o plstico, fijado a la hoja por una unin o bayoneta. La forma, el material y el acabado debern ser tales que la sonda pueda limpiarse fcilmente. El borde sobresaliente de la hoja del tipo A deber ser lo bastante agudo como para que pueda servir de raspador. La punta de la hoja deber ser bastante aguda para facilitar la toma de muestras. Las sondas debern presentar las dimensiones que se indican (con una tolerancia del 10 por 100) (dimensiones en milmetros): Tipo A larga 800 1a2 Tipo B corta 400 1a2

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Longitud de la hoja ................. Espesor del metal de la hoja ... Dimetro interno de la hoja en la punta ............................. 18 32 Dimetro interno de la hoja en el mango o en el eje................ 22 28 Anchura de la ranura en la punta 4 20 Anchura de la ranura en el mango o en el eje ................... 14 14 Advertencias sobre el uso de las sondas: En el caso de la leche en polvo, ms o menos adherentes, las sondas pueden introducirse verticalmente. Las sondas del tipo A se llenan completamente girando y se extraen verticalmente. Las sondas del tipo B se llenan completamente durante la introduccin pero deben extraerse en posicin oblicua para evitar prdidas en el extremo inferior. En el caso de leche en polvo, ms o menos fluida, se inclinarn los recipientes, se introducirn las sondas casi horizontalmente con la ranura hacia abajo y se extraern con la ranura hacia arriba. 0(b).4.3. Cuchara o esptula de mango largo. 0(b).4.4. Recipiente de muestreo en cintas transportadoras.- Su forma y dimensiones se ajustarn aproximadamente a las que se indican en la figura n 2. En su defecto se utilizar cualquier otro recipiente que, alcanzando la misma finalidad, cumpla las condiciones generales sealadas en 4.1. 0(b).4.5. Bolsa portaporciones.- Ha de ser de utilizacin nica, preferentemente de material plstico flexible y de dimensin aproximada de 30 por 40 centmetros. Se utilizar acoplada a la boca posterior de las sondas o para almacenamiento de cualquier otra toma elemental de alimentos no lquidos (figura 3). 0(b).4.6. Fraccionador.- Para las tomas elementales, as como para la preparacin de las mues-

Figura 2 Dimensiones aproximadas en mm

Figura 3 Dimensiones aproximadas en cm

tras reducidas y de las muestras finales, se podrn utilizar aparatos o utensilios destinados a dividir las muestras en partes aproximadamente iguales. 0(b).5. Procedimiento. 0(b).5.1. Generalidades.- Se pondr cuidado en evitar la absorcin de humedad atmosfrica por el producto contenido en el recipiente duran-

Mte la toma de muestras para el anlisis. El recipiente se volver a cerrar perfectamente despus de realizar la toma de muestras. 0(b).5.2. Toma de muestras.- Se tomar una muestra no inferior a 200 gramos. Se pasar la sonda limpia y seca a travs del producto; en caso necesario inclinado o poniendo de lado el recipiente. Se orientar la ranura hacia abajo y se adoptar un ritmo uniforme de penetracin. Cuando la sonda alcance el fondo del recipiente se har girar 180 grados, se extraer y se descargar el contenido en el recipiente de la muestra. Se efectuar una o varias tomas para obtener una muestra no inferior a 200 gramos. El recipiente de la muestra se cerrar inmediatamente despus de tomar la misma. En caso de productos envasados en recipientes pequeos para la venta al por menor, la muestra estar constituida por el recipiente intacto y sin abrir. Se tomar uno o ms recipientes del mismo lote o con el mismo nmero de cdigo para obtener una muestra de no menos de 200 gramos. Las muestras debern tomarse siempre de esta forma cuando se necesite determinar propiedades que puedan alterarse fcilmente. 0(b).6. Exigencias cuantitativas. El acceso a la partida debe ser tal que permita tomar muestras de todas las partes que la componen. Todos los envases debern ser de la misma partida y tomados en distintos puntos de ella. 0(b).6.1. Tomas elementales.- El muestreo debe ser representativo de la partida examinada, por lo que el nmero mnimo de tomas elementales ser: 0(b).6.2. Muestra global.- La totalidad de la masa o volumen de las tomas elementales desti-

Nmero de tomas elementales 0.6.1.1 Graneles: Partidas que no excedan de 2,5 toneladas Partidas de ms de 2,5 toneladas 0.6.1.2 Productos envasados: 0.6.1.2.1 Envases con un contenido superior a 1 kilogramo: Partidas compuestas de 1 a 4 envases ....... Partidas compuestas de 5 a 16 envases ..... Partidas compuestas de ms de 16 envases 0(b).6.1.2.2 Envases con un contenido igual o inferior a 1 kilogramo: Partidas hasta 100 envases ........................ Partidas de 101 a 1.000 envases ................ Partidas de 1.001 a 10.000 envases ........... Partidas de ms de 10.000 envases............ 7

20 veces el nmero de toneladas de que conste la partida, limitado a un mximo de 40 tomas elementales.

Todos los envases 4 Del nmero de envases que compongan la partida, limitado a un mximo de 20 envases. 3 6 12 12+3 ms por cada fraccin de 2.500 envases (que exceda de 10.000).

Cuando la cifra obtenida sea un nmero fraccionario, se redondear ste hasta el nmero entero inmediatamente superior.

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nadas a construir la muestra global no puede ser inferior a: - Cuatro kilos en los graneles y productos envasados en envases con un contenido superior a un kilo. - Seiscientos gramos en productos envasados con un contenido inferior a un kilo. 0(b).7. Instrucciones referentes a las tomas, preparacin y el acondicionamiento de las muestras. 0(b).7.1. Generalidades.- Tomar y preparar las muestras lo ms rpidamente posible, teniendo en cuenta las precauciones necesarias para evitar que el producto se altere o contamine. Los aparatos y utensilios, as como las superficies y recipientes destinados a recibir las muestras deben estar limpios y secos. 0(b).7.2. Preparacin de las muestras globales.- Reunir las tomas elementales para constituir una sola muestra global. 0(b).7.3. Preparacin de las muestras para su anlisis.- Tomar las precauciones necesarias para evitar cualquier modificacin de la composicin de los ejemplares de la muestra, contaminacin o alteracin que pueda sobrevenir en el transcurso de la toma, del transporte o del almacenamiento. 0(b).7.3.1. Productos a granel o envasados para venta al por mayor superiores a un kilogramo.- Mezclar con cuidado cada muestra global para obtener una muestra homognea. Si es necesario, reducir la muestra global hasta dos kilos (muestra reducida). Preparar a continuacin tres ejemplares de la muestra final que tengan la misma masa o el mismo volumen, aproximadamente. Introducir cada ejemplar en un recipiente apropiado. 0(b).7.3.2. Productos envasados para la venta al detalle.- La muestra final estar formada por la totalidad de las tomas elementales, las cuales se repartirn en tres bloques iguales, cada uno de los cuales constituir un ejemplar de la muestra final. 0(b).7.4. Acondicionamiento de las muestras para anlisis.- Etiquetar y precintar o sellar los recipientes o los envases que las contengan (la etiqueta debe estar incorporada en el sello o precinto) de manera que le sea imposible abrirlos sin deteriorar el precinto o sello, manteniendo la temperatura adecuada en cada caso. 0(b).8. Personal autorizado. Las tomas de muestras destinadas a controles oficiales se llevarn a cabo por personal autorizado y acreditado por los Organismos competentes. 0(b).9. Acta de la toma de muestras.

Cada muestra deber estar identificada por un acta que permita determinar sin ambigedad la partida controlada. 1(a). GRASA (Leches natural, certificada, higienizada y esterilizada) 1(a).1. Principio. Este mtodo es aplicable a las leches naturales, certificada, higienizada y esterilizada, enteras o parcialmente desnatadas, definidas en el Reglamento de Centrales Lecheras y otras Industrias Lcteas. Se entiende por contenido en materia grasa de las leches natural, certificada, higienizada y esterilizada, el porcentaje en masa de las sustancias determinadas por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma FIL-1A: 1969 de la Federacin Internacional de Lechera. El contenido en materia grasa se determina gravimtricamente, por extraccin de la citada materia grasa de una solucin alcohlico-amoniacal del tipo de leche de que se trate, mediante ter tilico y ter de petrleo, evaporacin de los disolventes y pesado del residuo, segn el principio del mtodo de Rse-Gottlieb. 1(a).2. Material y aparatos. 1(a).2.1. Balanza analtica. 1(a).2.2. Probetas o matraces de extraccin adecuados, provistos de tapones de vidrio esmerilado, de tapones de corcho y otros dispositivos de cierre inatacables por los disolventes utilizados. Los tapones de corcho sern de buena calidad y se tratarn sometindolos sucesivamente a extracciones con ter etlico y con ter de petrleo. Despus se introducirn durante 20 minutos, por lo menos, en agua a una temperatura de 60 C o superior, y se dejarn enfriar tambin en agua, con objeto de que estn saturados cuando se utilicen. 1(a).2.3. Matraces de paredes delgadas y bases planas, de una capacidad de 150 a 250 ml. 1(a).2.4. Estufa de desecacin, bien ventilada y controlada termostticamente (ajustada para que funcione a una temperatura de 102 2 C), o una estufa de desecacin por vaco (temperatura 70-75 C, presin menor de 50 mm de Hg). 1(a).2.5. Materiales para facilitar la ebullicin, exentos de materia grasa, no porosos ni deleznables al ser utilizados, como, por ejemplo, perlas de vidrio o trozos de carburo de silicio (el empleo de estos materiales es facultativo, vase el apartado 1(a).4.3. 1(a).3. Reactivos Todos los reactivos debern ser de calidad

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Mpura para anlisis y no dejar en la evaporacin mayor cantidad de residuos que la autorizada para el ensayo en blanco (1(a).4.2.). En caso necesario, los reactivos podrn destilarse de nuevo en presencia de 1 g aproximadamente de mantequilla deshidratada por 100 ml de disolvente. El agua que se utilice deber ser destilada o, por lo menos, de igual pureza que el agua destilada. 131074 131129 131270 131085 132770 Agua PA-ACS Amonaco 25% (en NH3) PA Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO Etanol 96% v/v PA Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS 131315 Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 1(a).4. Procedimiento. 1(a).4.1. Preparacin de la muestra.- Poner la muestra a una temperatura de 20C. Mezclarla cuidadosamente hasta obtener una distribucin homognea de la materia grasa. No agitar muy enrgicamente para evitar la formacin de espuma en la leche o el batido de la materia grasa. Si resulta dificultoso dispersar la capa de nata, calentar lentamente hasta 35-40C, mezclando cuidadosamente y teniendo la precaucin de reincorporar a la muestra la nata que pudiera haberse adherido a las paredes del recipiente. Enfriar rpidamente la muestra hasta la temperatura ambiente. Si se desea se puede utilizar un homogeneizador apropiado para facilitar la dispersin de la grasa. Si se separa la materia grasa lquida o se observa la presencia de partculas blancas de forma irregular adheridas a las paredes del recipiente que contiene la muestra, el anlisis no dar los resultados correctos. 1(a).4.2. Ensayo en blanco.- Al mismo tiempo que se determina el contenido en materia grasa de la muestra, efectuar un ensayo en blanco con 10 ml de Agua PA-ACS en lugar de la muestra, empleando el mismo tipo de aparato de extraccin, los mismos reactivos en las mismas cantidades y siguiendo el mismo procedimiento que se describe a continuacin. Si el resultado del ensayo en blanco excede de 0,5 mg, habr que comprobar los reactivos, y aqul o aqullos que resulten impuros debern sustituirse o purificarse. 1(a).4.3. Determinacin.- Secar el matraz (si se desea con algn material 1(a).2.5., que facilite una ebullicin moderada durante la subsiguiente eliminacin de los disolventes) en la estufa durante un intervalo de media a una hora. Dejar que se enfre el matraz hasta la temperatura ambiente de la balanza y, una vez enfriado, pesarlo con una aproximacin de 0,1 mg. Invertir tres o cuatro veces el recipiente que contiene la muestra preparada y pesar inmediatamente en el aparato de extraccin, directamente o por diferencia de 10 a 11 g de la muestra bien mezclada, con una aproximacin de 1 mg. Aadir 1,5 ml de la solucin de Amonaco 25% (en NH 3) PA, o un volumen equivalente de una solucin ms concentrada, y mezclar convenientemente. Aadir 10 ml de Etanol 96% v/v PA y mezclar suavemente, pero de modo homogneo, manteniendo abierto el aparato de extraccin. Aadir 25 ml de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS, cerrar el aparato y agitarlo vigorosamente, invirtindolo varias veces, durante 1 minuto. Si es necesario, enfriar el aparato con agua corriente. Quitar el tapn cuidadosamente y aadir 25 ml de Eter de Petrleo, utilizando los primeros ml para enjuagar el tapn y el interior del cuello del aparato, dejando que los lquidos de los enjuagues penetren en el ltimo. Cerrarlo, volviendo a

1(a).3.1. Amonaco 25% (en NH 3) PA (densidad aproximada a 20/4 0,910) o una solucin ms concentrada conocindose dicha concentracin. 1(a).3.2. Etanol 96% v/v PA o, en su defecto, 153973 Etanol 96 totalmente desnaturalizado PR. 1(a).3.3. Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS, exento de Perxidos. Para el ensayo de los perxidos, aadir a 10 ml de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS contenidos en una pequea probeta con tapn de vidrio, previamente enjuagada con un poco de ter, 1 ml de solucin al 10% de Potasio Yoduro PA-ISO, recien preparada. Agitar y dejar reposar durante 1 minuto. No debe aparecer coloracin amarilla en ninguna de las dos capas. El Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS puede mantenerse exento de perxidos, aadiendo una lmina de Zinc hmeda, que deber sumergirse completamente en una solucin cida diluida de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO durante 1 minuto y despus lavarse con Agua PA-ACS. Por litro de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS, utilizar una superficie de 80 cm2 aproximadamente de lmina de Zinc cortada en bandas lo suficientemente largas para que lleguen por lo menos hasta el centro del recipiente. 1(a).3.4. Eter de Petrleo de puntos de ebullicin entre 30 C y 60 C. En su defecto usar Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO. 1(a).3.5. Disolvente mixto, preparado poco tiempo antes de su utilizacin, mezclando volmenes iguales de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS y Eter de Petrleo 4060C PA-ISO (se podr sustituir la mezcla de disolventes en aquellos casos en que su utilizacin est prevista por Eter Dietlico o por Eter de Petrleo.

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colocar el tapn, y agitarlo e invertirlo repetidamente durante 30 segundos. Si no est previsto centrifugar, en la operacin descrita, no agitar muy enrgicamente. Dejar el aparato en reposo hasta que la capa lquida superior est completamente lmpida y claramente separada de la fase acuosa. Podr efectuarse igualmente la separacin mediante el uso de una centrfuga adecuada. Si se utiliza una centrfuga cuyo motor no sea trifsico, puede producirse chispas y ser preciso tomar las debidas precauciones para evitar una explosin o un incendio debido a la presencia de vapores de ter (por ejemplo, en caso de rotura de un tubo). Quitar el tapn y enjuagarlo, as como tambin el interior del cuello del aparato, con algunos ml de la mezcla de disolventes, y dejar que los lquidos de los enjuagues penetren en el aparato. Transvasar con cuidado el matraz, lo ms completamente posible, la capa superior de decantacin o con la ayuda de un sifn. Si el transvase no se efecta mediante sifn, tal vez sea necesario aadir un poco de Agua PA-ACS para elevar la separacin entre las dos capas, con objeto de facilitar la decantacin. Enjuagar el exterior e interior del cuello del aparato, o el extremo y la parte inferior del sifn, con algunos ml de la mezcla de disolventes. Dejar deslizar los lquidos del enjuague del exterior del aparato dentro del matraz y los del interior del cuello y del sifn, dentro del aparato de extraccin. Proceder a una segunda extraccin repitiendo las operaciones descritas, desde la adicin de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS y 15 ml de Eter de Petrleo. Efectuar una tercera extraccin procediendo como se indica anteriormente, pero omitiendo el enjuague final. Eliminar con cuidado por evaporacin o destilacin la mayor cantidad posible de disolvente (incluido el etanol). Si el matraz es de pequea capacidad, ser necesario eliminar un poco de disolvente despus de cada extraccin de la manera antes indicada. Cuando ya no subsiste el olor a disolvente, calentar el matraz, tumbado durante 1 hora en la estufa. Dejar que el matraz se enfre hasta la temperatura ambiente de la balanza como se indic y pesar con una aproximacin de 0,1 mg. Repetir la operacin calentando a intervalos de 30 a 60 minutos hasta obtener una masa constante. Aadir de 15 a 25 ml de Eter de Petrleo para comprobar si la materia extrada es totalmente soluble. Calentar ligeramente y agitar el disolvente mediante un movimiento rotatorio hasta que toda la materia grasa se disuelva. Si la materia extrada es totalmente soluble en el Eter de Petrleo, la masa de materia grasa ser la diferencia entre las pesadas efectuadas. En caso contrario o de duda, extraer completamente

la materia grasa contenida en el matraz, mediante lavados repetidos con Eter de Petrleo caliente, dejando que se deposite la materia no disuelta antes de cada decantacin. Enjuagar tres veces el exterior del cuello del matraz. Calentar el matraz tumbado durante 1 hora en la estufa y dejar que se enfre hasta la temperatura ambiente de la balanza, como lo indicado anteriormente, y pesar con una aproximacin de 0,1 mg. La masa de la materia grasa ser la diferencia entre la masa obtenida y la obtenida en esta pesada final. 1(a).5. Clculo. La masa, expresada en gramos, de la materia grasa extrada es: (M1 M2) (B1 B2) y el contenido en materia grasa de la muestra, expresado en porcentaje de la masa, es: (M1 M2) (B1 B2) x 100 S en donde M1 = masa, en gramos, del matraz M, que contiene la materia grasa despus de desecar hasta masa constante. M2 = masa, en gramos, del matraz M, sin materia grasa, o en el caso de presencia de materias insolubles, despus de extraer completamente la materia grasa. B1 = masa, en gramos, del matraz B, del ensayo en blanco, despus de desecar hasta masa constante. B2 = masa, en gramos, del matraz B, o en el caso de presencia de materias insolubles, despus de extraer completamente la materia grasa. S = masa, en gramos, de la cantidad de muestra utilizada en la determinacin. La diferencia entre los resultados en dos determinaciones repetidas (resultados obtenidos simultneamente o uno inmediatamente despus de otro, por el mismo analista) no debe ser mayor de 0,03 g de materia grasa de 100 g de producto. 1(a).6. Referencias. 1(a).6.1. Norma Internacional FIL-IDF 1A: 1969. 1(b). GRASA (Leche desnatada) 1(b).1. Principio. Este mtodo es aplicable a las leches lquidas, no concentradas, y concretamente a la leche esterilizada desnatada, definida en el Reglamento de Centrales Lecheras y otras Industrias Lcteas. Se entiende por contenido en materia grasa de la leche desnatada el porcentaje en masa de la cantidad total de lpidos y sustancias lipoides,

Mdeterminada por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma FIL-22: 1968 de la Federacin Internacional de Lechera. El contenido en materia grasa se determina gravimtricamente por adicin de amonaco y alcohol a una cantidad conocida de leche desnatada, extraccin por un disolvente de los lpidos y de las sustancias lipoides, evaporacin del disolvente y pesado del residuo, obtenido por aplicacin del mtodo Rse-Gottlieb. 1(b).2. Material y aparatos. 1(b).2.1. Balanza analtica, de sensibilidad mnima 0,1 miligramos. 1(b).2.2. Probetas o matraces de extraccin apropiados provistos de tapones para cierre hermtico (corcho o vidrio esmerilado). 1(b).2.3. Erlenmeyer o matraces de fondo plano, de 150 a 250 ml de capacidad, con zona esmerilada para identificacin. 1(b).2.4. Materiales que faciliten la ebullicin, exentos de materia grasa; por ejemplo, perlas de vidrio. 1(b).2.5. Dispositivos apropiados para la evaporacin de los disolventes. 1(b).2.6. Estufa que permita obtener una temperatura constante de 102-104C o estufa de desecacin por vaco. 1(b).2.7. Pipetas graduadas de 10 ml. 1(b).3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 131085 Etanol 96% v/v PA 131129 Amonaco 25% (en NH3) PA 132770 Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS 131315 Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO 1(b).3.1. Etanol 96% v/v PA o Etanol desnaturalizado con metanol o con ter de petrleo. 1(b).3.2. Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS, exento de perxidos. 1(b).3.3. Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO. 1(b).3.4. Amonaco 25% (en NH3) PA (densidad 0,91 a 20C) lmpida e incolora. Los reactivos no deben dejar residuos despus de la evaporacin. 1(b).4. Procedimiento. 1(b).4.1. Preparacin de la muestra.- Mezclar la muestra cuidadosamente. En caso necesario, calentar la muestra a 35-40C y mezclar. Enfriar a 20C antes del anlisis. 1(b).4.2. Determinacin.- Con una aproximacin de 10 miligramos, pesar alrededor de 10 g, o introducir exactamente 10 mililitros (a 20 2C) de leche desnatada en el aparato de extraccin. Aadir 1 ml de la solucin Amonaco 25% (en NH3) PA y mezclar cuidadosamente. Aadir 10 ml de Etanol 96% v/v PA y mezclar el contenido. Aadir 25 ml de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS y, despus de cerrar el aparato de extraccin, mezclar el contenido agitando e invirtiendo varias veces durante 1 minuto. Aadir 25 ml de Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO, cerrar el aparato de extraccin y mezclar el contenido agitando e invirtiendo repetidas veces. Dejar reposar el aparato de extraccin por lo menos 2 horas o centrifugar (por lo menos 5 minutos a 500-600 revoluciones por minuto) hasta que la capa Eter Dietlico-Eter de Petrleo est totalmente lmpida y completamente separada de la fase acuosa. Transvasar lo ms completamente posible, la capa Eter Dietlico-Eter de Petrleo por decantacin o, con ayuda de un dispositivo de sifn (teniendo cuidado de no traspasar la fase acuosa), a un erlenmeyer o matraz de fondo plano, que contenga un material destinado a facilitar la ebullicin, previamente desecado y pesado. Realizar una segunda extraccin utilizando 15 ml de Eter Dietlico PA y 15 ml de Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO, siguiendo el procedimiento indicado. Transvasar al mismo matraz la capa de Eter Dietlico-Eter de Petrleo como se indica anteriormente. Destilar con cuidado los disolventes contenidos en el matraz. Despus de la evaporacin de los disolventes, secar la materia grasa durante 1 hora en estufa de vaco a 70-75C (presin inferior a 50 mm de mercurio), o en una estufa de presin normal a 102-104C, colocando al matraz en posicin horizontal. Dejar enfriar el matraz y pesar cuando haya alcanzado la temperatura ambiente. Continuar el proceso de desecacin hasta peso constante (desecacin en vaco) o hasta un ligero aumento del peso (desecacin a presin normal). En el ltimo caso, tomar para el clculo el ltimo valor encontrado antes del aumento del peso. Si se considera necesario, la materia grasa puede volver a disolverse en Eter de Petrleo 40-60C PAISO para comprobar el resultado del anlisis. 1(b).4.3. Ensayo en blanco.- Para el control de los reactivos es necesario efectuar un anlisis en blanco siguiendo exactamente la forma de operar indicada y utilizando 10 ml de Agua PA-ACS en lugar de leche desnatada. El ensayo en blanco no deber indicar ms que una cantidad inapreciable. Para determinar la influencia de las variaciones de temperatura y humedad del aire, pesar un matraz y tratarlo como el utilizado para el anlisis, pero sin llenarlo con los disolventes. 1(b).5. Clculo. En el clculo de porcentaje de materia grasa se tendrn en cuenta, si es necesario, los valores encontrados en los ensayos en blanco. Si la cantidad de leche tomada para el anlisis se ha toma-

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do con ayuda de una pipeta, es necesario tener en cuenta la densidad de la leche. La diferencia entre los resultados en dos determinaciones repetidas no debe ser mayor de 0,005 g de materia grasa por 100 g de producto. 1(b).6. Referencia. 1(b).6.1. Norma Internacional FIL-IDF 22: 1963. 1(c). GRASA. (Leches concentrada, evaporada y condensada) 1(c).1. Principio. Este mtodo es aplicable a las leches concentrada, evaporada y condensada, enteras o desnatadas, definidas en el Reglamento de Centrales Lecheras y otras Industrias Lcteas. Se entiende por contenido en materia grasa de las leches concentrada, evaporada y condensada el porcentaje en masa de las sustancias determinadas por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma FIL-13A: 1969 de la Federacin Internacional de Lechera. El contenido en materia grasa se determina gravimtricamente por extraccin de la citada materia grasa en una solucin alcohlico-amoniacal del tipo de leche de que se trate, mediante ter dietlico y ter de petrleo, evaporacin de los disolventes y pesado del residuo, segn el principio del mtodo de Rse-Gottlieb. 1(c).2. Material y aparatos. 1(c).2.1. Balanza analtica. 1(c).2.2. Probetas o matraces de extraccin adecuados provistos de tapones de vidrio esmerilado, de tapones de corcho u otros dispositivos de cierre inatacables por los disolventes utilizados. Los tapones de corcho sern de buena calidad y se tratarn sometindolos sucesivamente a extracciones con ter dietlico y con ter de petrleo. Despus se introducirn, durante 20 minutos por lo menos, en agua a una temperatura de 60C o superior y se dejarn enfriar tambin en agua con objeto de que estn saturados cuando se utilicen. 1(c).2.3. Matraces de paredes delgadas y bases planas de una capacidad de 150 a 250 ml. 1(c).2.4. Estufa de desecacin bien ventilada y controlada termostticamente (ajustada para que funcione a una temperatura de 102 2C) o una estufa de desecacin por vaco (temperatura 70-75C, presin menor de 50 mm de Hg). 1(c).2.5. Materiales para facilitar la ebullicin, exentos de materia grasa, no porosos ni deleznables al ser utilizados, como, por ejemplo, perlas de vidrio o trozos de carburo de silicio (el empleo de estos materiales es facultativo).

1(c).3. Reactivos. Todos los reactivos deben de ser de calidad pura para anlisis y no dejar en la evaporacin mayor cantidad de residuos que la autorizada para el ensayo en blanco. En caso necesario, los reactivos podrn destilarse de nuevo en presencia de 1 g, aproximadamente, de mantequilla deshidratada por 100 ml de disolvente. El agua que se utilice deber ser destilada o por lo menos de igual pureza que el agua destilada. 131074 131129 131270 131085 132770 Agua PA-ACS Amonaco 25% (en NH 3) PA Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO Etanol 96% v/v PA Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS 131315 Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO 131542 Potasio Yoduro PA-ISO

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1(c).3.1. Amonaco 25% (en NH 3) PA (densidad aproximada a 20/4 0,910) o una solucin ms concentrada, conocindose dicha concentracin. 1(c).3.2. Etanol 96% v/v PA o, en su defecto, 153973 Etanol 96 totalmente desnaturalizado PR. 1(c).3.3. Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS, exento de Perxidos. Para el ensayo de los perxidos, aadir a 10 ml de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS contenidos en una pequea probeta con tapn de vidrio, previamente enjuagada con un poco de ter, 1 ml de solucin al 10% de Potasio Yoduro PA-ISO, recin preparada. Agitar y dejar reposar durante 1 minuto. No debe aparecer coloracin amarilla en ninguna de las dos capas. El Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS puede mantenerse exento de perxidos, aadiendo una lmina de Zinc hmeda, que deber sumergirse completamente en una solucin cida diluida de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO durante 1 minuto y despus lavarse con Agua PA-ACS. Por litro de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS, utilizar una superficie de 80 cm2 aproximadamente de lmina de Zinc cortada en bandas lo suficientemente largas para que lleguen por lo menos hasta el centro del recipiente. 1(c).3.4. Eter de Petrleo de puntos de ebullicin entre 30C y 60C. En su defecto usar Eter de Petrleo 40-60C PA-ISO. 1(c).3.5. Disolvente mixto, preparado poco tiempo antes de su utilizacin, mezclando volmenes iguales de Eter Dietlico estabilizado con ~ 6 ppm de BHT PA-ACS y Eter de Petrleo 4060C PA-ISO (se podr sustituir la mezcla de disolventes en aquellos casos en que su utilizacin est prevista por Eter Dietlico estabilizado

Mcon ~ 6 ppm de BHT PA-ACS o por Eter de Petrleo). 1(c).4. Procedimiento. 1(c).4.1. Preparacin de la muestra. 1(c).4.1.1. Leche concentrada y leche evaporada.- Agitar e invertir el recipiente que contiene la muestra. Abrir y transvasar lentamente la leche a un segundo recipiente (provisto de cierre hermtico). Mezclar mediante transvases sucesivos, teniendo cuidado de incorporar a la muestra toda la materia grasa u otro constituyente adheridos a las paredes o al fondo del primer recipiente. Finalmente, transvasar la leche lo ms completamente posible al segundo recipiente y cerrar ste ltimo. En caso necesario, templar el envase original, cerrado, en bao de Mara a 40-60C. Sacarlo y agitar vigorosamente cada 15 minutos. Al cabo de 2 horas, retirar el envase y dejarlo enfriar hasta temperatura ambiente. Quitar totalmente la tapadera y mezclar cuidadosamente removiendo el contenido con una cuchara o esptula (si se separa la materia grasa no se debe efectuar el anlisis de la muestra). En el caso de envases flexibles, abrirlos y transvasar el contenido a un vaso. Rasgar los envases, despegar todas las materias adheridas a las paredes e introducirlas en el vaso. 1(c).4.1.2. Leche condensada.- Abrir el recipiente que contiene la muestra y mezclar cuidadosamente la leche con una cuchara o una esptula. Imprimir a este instrumento un movimiento rotativo ascendente y descendente de manera que las capas superiores e inferiores se mezclen bien con el resto del contenido. Tener cuidado de reincorporar a la muestra toda la masa de leche que pudiera haberse adherido a las paredes y a los fondos del recipiente. Transvasar la leche lo ms completamente posible a un segundo recipiente (provisto de cierre hermtico) y cerrar ste ltimo. En caso necesario, templar el bote original, cerrado, en bao de Mara a 30-40C. Abrir el bote, desprender toda la leche adherida a las paredes del mismo, transvasar a una cpsula lo suficientemente grande para permitir un manejo cuidadoso y mezclar hasta que toda la masa sea homognea. En el caso de tubos flexibles abrirlos y transvasar el contenido a un vaso. Rasgar los tubos, despegar todas las materias adheridas a las paredes e introducirlas en el vaso. 1(c).4.2. Ensayo en blanco.- Al mismo tiempo que se determina el contenido en materia grasa de la muestra, efectuar un ensayo en blanco con 10 ml de Agua PA-ACS en lugar de la muestra, empleando el mismo tipo de aparato de extraccin, los mismos reactivos en las mismas cantidades y siguiendo el mismo procedimiento que se describe a continuacin. Si el resultado del ensayo en blanco excede de 0,5 mg, habr que comprobar los reactivos y aqul o aqullos que resulten impuros debern sustituirse o purificarse. 1(c).4.3. Determinacin.- Proceder como en 1(a).4.3., excepto que se pesa de 4 a 5 g de la muestra, aadiendo a continuacin 7 ml de Agua PA-ACS, agitando suavemente y calentando ligeramente (40-50C) hasta la dispersin total del producto. 1(c).5. Clculo. Como en 1(a).5. 1(c).6. Referencia. 1(c).6.1. Norma Internacional FIL-IDF 13A: 1969. 1(d). GRASA (Leche en polvo) 1(d).1. Principio. Este mtodo es aplicable a las leches en polvo, entera, parcialmente desnatada y desnatada, definidas en el Reglamento de Centrales Lecheras y otras Industrias Lcteas. Se entiende por contenido en materia grasa de la leche en polvo el porcentaje en masa de las sustancias determinadas por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma FIL-9A: 1969 de la Federacin Internacional de Lechera. El contenido en materia grasa se determina gravimtricamente por extraccin de la citada materia grasa de una solucin alcohlico-amoniacal de leche en polvo mediante ter etlico y ter de petrleo, evaporacin de los disolventes y pesado del residuo, segn el principio del mtodo Rse-Gottlieb. 1(d).2. Material y aparatos. 1(d).2.1., 2, 3, 4, 5 y 6, como 1(a).2.1., 2, 3, 4, 5 y 6. 1(d).3. Reactivos. 1(d).3.1., 2, 3, 4 y 5, como 1(a).3.1., 2, 3, 4 y 5. 1(d).4. Procedimiento. 1(d).4.1. Preparacin de la muestra.- Transvasar la leche en polvo a un recipiente limpio y seco (provisto de cierre hermtico) de una capacidad que corresponda, aproximadamente, a dos veces el volumen del polvo. Cerrar en seguida el recipiente y mezclar cuidadosamente la leche en polvo agitndolo e invirtindolo repetidamente. Durante la preparacin de la muestra deber evitarse, en la medida de lo posible, la exposicin de la leche en polvo al aire atmosfrico con objeto de reducir al mnimo la absorcin de humedad.

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1(d).4.2. Ensayo en blanco.- Como en 1(a).4.2. 1(d).4.3. Determinacin.- Como en 1(a).4.3., excepto que se pesa, aproximadamente, 1 g de leche entera en polvo o 1,5 g de leche parcialmente desnatada en polvo o de leche desnatada en polvo aadiendo 10 ml Agua PA-ACS y agitando hasta la dispersin total del polvo de leche. Despus de aadir la solucin de Amonaco 25% (en NH3) PA, calentar en bao Mara a una temperatura de 60-70C durante 15 minutos, agitando de cuando en cuando, y enfriar a continuacin con agua corriente, si se desea. 1(d).5. Clculo. Como en 1(a).5. Referencia. 1(d).6.1. Norma Internacional FIL-IDF 9A: 1969. 1(e). GRASA (Leche natural) (Mtodo Gerber) En el caso de leche natural se puede emplear, como alternativo, el mtodo Gerber. 1(e).1. Principio. Liberacin total de la grasa por disolucin de las sustancias proteicas, separacin de la grasa por centrifugacin y posterior medida volumtrica de sta. Aplicable a leche natural, pasterizada y esterilizada. 1(e).2. Material y aparatos. 1(e).2.1. Pipetas aforadas de 11 ml. 1(e).2.2. Dosificador de mbolo de 10 ml para el cido sulfrico. 1(e).2.3. Bao de agua regulable a 65C. 1(e).2.4. Centrfuga Gerber. 1(e).2.5. Butirmetros original Gerber. Se pueden utilizar de varios tipos. 1(e).2.5.1. Graduacin de 0-5 por 100 divisiones en 0,1. Cuello ranurado. 1(e).2.5.2. Graduacin de 0-5 por 100 divisiones en 0,1. Cuello liso. 1(e).2.5.3. Graduacin de 0-7 por 100 divisiones en 0,1. Cuello ranurado. 1(e).2.5.4. Graduacin de 0-9 por 100 divisiones en 0,1. Cuello ranurado. 1(e).2.6. Tapones de caucho. 1(e).2.7. Empujador metlico.

1(e).3.2. Alcohol iso-Amlico segn Gerber mezcla de ismeros RE 1(e).4. Procedimiento. Colocar en el butirmetro 10 ml de Acido Sulfrico 90-91% segn Gerber RE y agregar 11 ml de leche con cuidado y lentamente para que no se mezclen, observndose claramente la separacin de ambas capas, cida y de leche. Agregar a continuacin 1 ml de Alcohol isoAmlico segn Gerber mezcla de ismeros RE (con dosificador) y cerrar el butirmetro. Agitar enrgicamente, envuelto en un pao para evitar posibles proyecciones hasta la total disolucin de la fase proteica de la leche. Verter y dejar en reposo algn tiempo para observar mejor si la disolucin ha sido completa. Llevar a la centrfuga durante 5 minutos. Sacar de la centrfuga con cuidado para no mover la capa superior de grasa ya separada. Colocar en el bao (65C) durante 5 minutos. Sacar y leer rpidamente. 1(e).5. Clculo. Se lee directamente en la escala del butirmetro. 1(e).6. Observaciones. 1(e).6.1. A veces el volumen de lquidos en el butirmetro no es suficiente para que la columna de grasa quede en la escala graduada; en este caso, antes de centrifugar, aadir unas gotas de cido sulfrico o simplemente agua si es despus de la centrifugacin, para conseguir que dicha columna pueda ser leda. 1(e).6.2. Puede ser conveniente despus de la agitacin del butirmetro y antes de centrifugar, colocarlo en el bao a 65C de 5 a 15 minutos para que el ataque sea lo ms completo posible, aunque presenta el inconveniente de hacer el glbulo graso ms pequeo, producindose un ligero aumento de volumen de grasa, obtenindose un valor ligeramente por exceso. A pesar de todo, si dicho tiempo de resistencia en el bao no se prolonga ms all de esos 15 minutos, la variacin apenas es apreciable, quedndose dentro del error experimental 0,05% en MG propio del mtodo. Sin embargo, presenta la ventaja de apreciar claramente antes de la centrifugacin si la disolucin ha sido total, factor fundamental en la determinacin. 1(e).6.3. En leches conservadas mediante formol, la disolucin de la protena es imposible o incompleta, por lo que la separacin de la capa grasa en la centrifugacin no es completa ni ntida. No es aconsejable en dicho caso el empleo de este mtodo.

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1(e).3. Reactivos. 171010 Acido Sulfrico 90-91% segn Gerber RE 171865 Alcohol iso-Amlico segn Gerber mezcla de ismeros RE 1(e).3.1. Acido Sulfrico 90-91% segn Gerber RE.

M2. PROTEINAS (*) 2.1. Principio. Se entiende por contenido en protenas de la leche el contenido en nitrgeno expresado en porcentaje en peso y multiplicado por el factor de conversin, que se determina por el mtodo expuesto a continuacin, el cual corresponde al descrito en la norma FIL-20: 1962 de la Federacin Internacional de Lechera. Este mtodo es aplicable a las leches no alteradas, natural, certificada, higienizada, esterilizada y a las reconstituidas asimismo no alteradas, posteriormente de las leches concentrada, evaporada, condensada y en polvo. La determinacin del nitrgeno total se realiza por aplicacin del mtodo Kjeldahl: una determinada cantidad pesada de leche se trata con cido sulfrico en presencia de mercurio II xido como catalizador con objeto de transformar el nitrgeno de los compuestos orgnicos en nitrgeno amoniacal. El amonaco se libera por adicin de sodio hidrxido, se destila y se recoge a una solucin de cido brico. A continuacin se valora el amonaco. 2.2. Material y aparatos. 2.2.1. Balanza analtica de 1 mg de sensibilidad mnima. 2.2.2. Aparato de digestin que permita mantener el matraz Kjeldahl en una posicin inclinada y provisto de un sistema de calentamiento que no afecte ms que a la parte del matraz ocupada por el lquido. 2.2.3. Matraz Kjeldahl de 500 ml de capacidad. 2.2.4. Refrigerante Liebig de tubo interior rectilneo. 2.2.5. Un tubo de salida con bulbo de seguridad esfrico, conectado a la parte inferior del refrigerante por unin esmerilada. 2.2.6. Una alargadera conectada al matraz Kjeldahl y al refrigerante Liebig por medio de goma. Uniones esmeriladas. 2.2.7. Un matraz erlenmeyer de 500 ml de capacidad. 2.2.8. Probetas graduadas de 25, 50, 100 y 150 ml. 2.2.9. Bureta de 50 ml graduados a 0,1 ml. 2.2.10. Materiales para facilitar la ebullicin. En la digestin, pequeos trozos de porcelana dura o perlas de vidrio, y en la destilacin, pequeos trozos de piedra pmez recin calcinados. 2.3. Reactivos. 172222 Acido Brico solucin 4% RE 181023 Acido Clorhdrico 0,1 mol/1 (0,1N) SV 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC 172430 Indicador Mixto (Rojo de Metilo-Azul de Metileno) RE 141427 Mercurio II Oxido rojo PRS 211835 Piedra Pmez grnulos QP 131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO 171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 131644 di-Sodio tetra -Borato 10-hidrato PAACS-ISO 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 211682 Sodio Sulfuro 9-hidrato QP 2.3.1. Potasio Sulfato PA-ACS-ISO 2.3.2. Mercurio II Oxido rojo PRS 2.3.3. Acido Sulfrico 96% PA-ISO 2.3.4. Solucin de Sodio Hidrxido: 500 g de Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO y 12 g de Sodio Sulfuro 9-hidrato QP disueltos en 1.000 ml de Agua PA-ACS. 2.3.5. Acido Brico solucin 4% RE. 2.3.6. Acido Clorhdrico 0,1 mol/l (0,1N) SV 2.3.7. Indicador Mixto (Rojo de Metilo-Azul de Metileno) RE. En su defecto puede prepararse disolviendo 2 g de Rojo de Metilo (C.I. 13020) REACS y 1 g de Azul de Metileno DC en 1.000 ml de Etanol 96% v/v PA. 2.3.8. Solucin de di-Sodio tetra -Borato 10hidrato PA-ACS-ISO para la valoracin del Acido Clorhdrico. Los reactivos y las soluciones utilizadas no deben contener sustancias nitrogenadas. 2.4. Procedimiento. 2.4.1. Preparacin de la muestra.- Antes del anlisis poner la muestra a 20 2C y mezclarla cuidadosamente. Si no se obtiene una dispersin homognea de la materia grasa, calentarla lentamente a 40C, mezclar suavemente y enfriarla de nuevo a 20 2C. 2.4.2. Determinacin.- Introducir sucesivamente en el matraz Kjeldahl algunas perlas de vidrio o pequeos trozos de porcelana, alrededor de 10 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 0,5 g de Mercurio II Oxido rojo PRS y alrededor de 5 g de leche exactamente pesados, con aproximacin de 1 mg. Aadir 20 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y mezclar el contenido del matraz. Calentar cuidadosamente el matraz Kjeldhal sobre el dispositivo para la reaccin hasta que no se forme espuma y el contenido se vuelva lquido. Continuar la reaccin por calentamiento ms intenso, hasta que el contenido se vuelva lquido. Continuar la reaccin por calentamiento ms intenso, hasta que el contenido del matraz est perfectamente lmpido e incoloro. Durante el calentamiento, agitar de cuando en cuando el contenido del matraz. Cuando el lquido est perfectamente lmpido, proseguir la ebullicin durante una hora y media, evitando todo sobrecalentamiento local.

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Dejar enfriar el contenido del matraz a la temperatura ambiente, aadir alrededor de 150 ml de Agua PA-ACS y algunos fragmentos de Piedra Pmez grnulos QP, mezclar cuidadosamente y dejarlo todava enfriar algo ms. Con la ayuda de una probeta graduada, verter 50 ml de Acido Brico solucin 4% RE en el matraz erlenmeyer, aadir cuatro gotas de indicador y mezclar. Situar el matraz erlenmeyer bajo el refrigerante, de manera que el extremo del tubo de salida se introduzca en la solucin de Acido Brico. Con la ayuda de una probeta graduada aadir al contenido del matraz Kjeldahl 80 ml de la solucin de Sodio Hidrxido que contiene sulfuro. Durante esta operacin, mantener el matraz inclinado, de tal manera que el Sodio Hidrxido se deslice a lo largo de la pared del recipiente y que los lquidos no se mezclen. Conectar inmediatamente el matraz Kjeldahl al refrigerante por medio de la alargadera. Mezclar el contenido del matraz por agitacin. Calentar a ebullicin evitando la espuma. Proseguir la destilacin hasta el momento en que el contenido del matraz presente ebullicin a saltos. Regular el calentamiento de manera que la destilacin dure por lo menos 20 minutos. Enfriar bien el destilado para evitar que se caliente la solucin de Acido Brico. Poco tiempo antes de terminar la destilacin, bajar el matraz erlenmeyer para que el tubo de salida no est introducido en la solucin de Acido Brico. Detener el calentamiento, elevar el tubo de salida y enjuagar sus paredes exteriores e interiores con un poco de Agua PA-ACS. Valorar el destilado con Acido Clorhdrico 0,1 mol/l (0,1N) SV. 2.4.3. Ensayo en blanco.- Efectuar un ensayo en blanco, aplicando el mtodo operatorio descrito, pero utilizando cinco mililitros de Agua PA-ACS en lugar de leche. 2.5. Clculo. 2.5.1. Nitrgeno total.- Se calcula el contenido en nitrgeno total mediante la frmula. 1,40N (V1 - V0) Nitrgeno total % = P N = normalidad del cido clorhdrico. V1 = volumen en mililitros de cido clorhdrico utilizado en la determinacin. V0 = volumen en mililitros de cido clorhdrico utilizado en el ensayo en blanco. P = peso en gramos de la leche empleada en el anlisis. La diferencia mxima entre dos determinaciones repetidas no debe sobrepasar el 0,005% de nitrgeno. 2.5.2. Protenas.- Para expresar el contenido en protenas de la leche analizada es preciso multiplicar la cantidad de nitrgeno total, obtenida

segn el mtodo descrito, por un factor de conversin que se fija en 6,38. En consecuencia, el contenido en protenas viene dado por la frmula 1,40N (V1 - V0) Protenas % = x 6,38 P 2.6. Referencia. 2.6.1. Norma Internacional FIL-IDF 20: 1962. (*) En el Real Decreto 1679/1994, captulo I, artculo 5, apartado 9, publicado en BOE, n 229, de fecha 24/9/94, se indica que la leche de vaca contiene un mnimo de 28 gramos de materia proteica por litro, obtenida al multiplicar el contenido en nitrgeno total de la leche expresado porcentualmente por 6,38. 3. CASEINA 3.1. Principio. Se entiende por contenido en casena de la leche el contenido en protenas, expresado en porcentaje en peso, obtenidas despus de una precipitacin a pH 4,6, siguiendo el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde a la norma FIL-20: 1964 de la Federacin Internacional de Lechera. Este mtodo es aplicable a las leches no alteradas, natural, certificada, higienizada, esterilizada y a las reconstituidas tambin, no alteradas posteriormente, de las leches concentrada, evaporada, condensada y en polvo. Asimismo puede aplicarse a las muestras de leche conservadas por adicin de formaldehdo (1:2.500). Se determina la cantidad total de nitrgeno de la leche. A continuacin la casena se precipita con un tampn actico-acetato y se filtra. Se determina luego la cantidad de nitrgeno del filtrado. La cantidad de casena se calcula con estas dos determinaciones de nitrgeno, que se realizan por el mtodo Kjeldahl, segn el mtodo 2. 3.2. Material y aparatos. 3.2.1. Pipetas de 0,5, 1 y 10 ml. 3.2.2. Probeta graduada de 100 ml. 3.2.3. Matraz graduado de 100 ml. 3.2.4. Papel filtro, lavado en cido, velocidad media: de 11 a 12,5 cm. 3.2.5. Embudos. 3.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS 131074 Agua PA-ACS 171634 Sodio Acetato 1 mol/1 (1M) RE 3.3.1. Solucin de Acido Actico al 10% p/v. 3.3.2. 171634 Sodio Acetato 1 mol/I (1M) RE.

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M3.4. Procedimiento. 3.4.1. Preparacin de la muestra.- Antes del anlisis poner la muestra a 20 2C y mezclar cuidadosamente. Si no se obtiene una dispersin homognea de la materia grasa, calentar la muestra lentamente a 40C; mezclar suavemente y enfriar a 20 2C. 3.4.2. Determinacin.- Determinar el contenido total en nitrgeno (NT) de la leche utilizando el mtodo Kjeldahl, segn el mtodo 2. Precipitar la casena de la siguiente manera: Llevar con pipeta 10 ml de leche a un matraz aforado de 100 ml. Aadir 75 ml de Agua PA-ACS a 40C; despus un ml de la solucin de Acido Actico. Mezclar suavemente el contenido del matraz y esperar 10 minutos. Aadir con pipeta un ml de la solucin de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE. Mezclar de nuevo. Dejar enfriar el contenido del matraz a unos 20C, completar hasta 10 ml con Agua PA-ACS y mezclar invirtiendo lentamente el matraz. Cuando el precipitado de casena y materia grasa se haya depositado, filtrar con filtro seco y recoger el filtrado en un recipiente seco. Determinar el contenido en nitrgeno de 50 ml del filtrado lmpido (nitrgeno no casenico: NNC), utilizando el mtodo Kjeldahl segn el mtodo 2. 3.4.3. Ensayo en blanco.- Adems del ensayo en blanco previsto en el mtodo 2, relativo a la determinacin del contenido en nitrgeno total de la leche, conviene hacer un ensayo en blanco para comprobar los reactivos que precipitan la casena, utilizando 50 ml de Agua PA-ACS, 0,5 ml de la solucin de Acido Actico y 0,5 ml de la solucin de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE. 3.5. Clculo. Calcular el porcentaje en peso de NT en la leche y del NNC en el suero lmpido con tres cifras significativas. Corregir la cifra obtenida para NNC por el volumen del precipitado, multiplicando el valor obtenido por 0,994. Calcular la cantidad de casena mediante la frmula. Cantidad de casena % = 6,38 (NT - NNC) La aplicacin de este factor a todas las leches enteras no entraa error sensible; sin embargo, si se aplica el mtodo a leche desnatada, el factor de correccin utilizado deber ser 0,998. La diferencia entre dos determinaciones repetidas no debe sobrepasar el 0,04% de casena. 3.6. Referencia. 3.6.1. Norma Internacional FIL-IDF 29: 1964. 4. LACTOSA 4.1. Principio. Se entiende por contenido en lactosa de la leche el contenido en lactosa monohidratada expresado en porcentaje en peso, determinado por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma FIL-28: 1964 de la Federacin Internacional de Lechera. Este mtodo es aplicable a las leches no alteradas natural, certificada, higienizada, esterilizada y a las reconstituidas, asimismo no alteradas y posteriormente; de las leches concentrada, evaporada, condensada y en polvo. Tambin puede aplicarse a las muestras de leche conservadas por adicin de formaldehdo (1:2.500). El contenido en lactosa se determina indirectamente, una vez desproteinizada la leche, por valoracin de la cantidad de halgeno reducido al final de la reduccin entre lactosa y yoduro potsicocloramina T. 4.2. Material y aparatos. 4.2.1. Balanza analtica. 4.2.2. Matraces aforados de 100 ml. 4.2.3. Pipetas de 5, 10, 20, 25 y 40 ml. 4.2.4. Papel filtro (lavado en cido, velocidad media: 11 a 12,5 cm). 4.2.5. Embudos filtrantes. 4.2.6. Matraces erlenmeyer, de una capacidad de 150 a 200 ml. 4.2.7. Matraces erlenmeyer, de 150 ml con cierre esmerilado. 4.2.8. Bureta de 10 ml graduada a 0,02 ml. 4.3. Reactivos. 182108 Acido clorhdrico 2 mol/l (2N) SV 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 180159 Acido Sulfrico 0,5 mol/l (1N) SV 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 142323 Cloramina T 3-hidrato PRS 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV 131724 Sodio Tungstato 2-hidrato PA 4.3.1. Reactivo del Acido Tungstnico: Disolver 7 g de Sodio Tungstato 2-hidrato PA en 870 ml de Agua PA-ACS; aadir 0,1 ml de una solucin de Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO y 70 ml de Acido Sulfrico 0,5 mol/l (1N) SV. 4.3.2. Solucin de Cloramina T, 0,040 N(5,70 g por litro). 4.3.3. Solucin Tiosulfato solucin normalizada a un poco ms de 0,040N. Usese Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV. 4.3.4. Solucin de Potasio Yoduro PA-ISO del 10%, recientemente preparada (incolora). 4.3.5. Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV. 4.3.6. Solucin de Almidn soluble RE al 1%. 4.4. Procedimiento. 4.4.1. Preparacin de la muestra.- Antes del anlisis poner la muestra a 20 2C y mezclarla

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con cuidado. Si no se obtiene una dispersin homognea de la materia grasa, calentar la muestra lentamente a 40C, mezclar suavemente y enfriar a 20 2C. 4.4.2. Determinacin.- Llevar con pipeta 10 ml de leche a matraz aforado de 100 ml. Aadir 25 ml de Agua PA-ACS, 40 ml del reactivo de Acido Tungstnico y mezclar suavemente. Completar hasta 100 ml con Agua PA-ACS, mezclar y dejar que se deposite el precipitado. Filtrar con un filtro seco y recoger en un matraz seco. Con una pipeta tomar 10 ml de filtrado y ponerlo en un matraz erlenmeyer de 150 ml provisto de tapn esmerilado. Aadir 5 ml de la solucin de Potasio Yoduro PA-ISO y exactamente 20 ml de la solucin de Cloramina T 3-hidrato PRS. Mezclar. Tapar el matraz con su tapn, previamente humedecido con un poco de solucin de Potasio Yoduro PAISO y mantenerlo en la oscuridad durante una hora y media a 18-20C. Quitar el tapn, enjuagarlo en el matraz con un poco de Agua PA-ACS y aadir 5 ml de la solucin de Acido clorhdrico 2 mol/l (2N) SV. Aadir exactamente 10 ml de la solucin de Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV. Valorar con una aproximacin de 0,02 ml con la solucin de Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV. Hacia el final de la valoracin, aadir dos o tres gotas de la solucin de Almidn soluble RE. 4.4.3. Ensayo en blanco.- Efectuar un ensayo en blanco siguiendo exactamente el mtodo operatorio descrito, pero empleando 10 ml de Agua PA-ACS en lugar del filtrado. 4.5. Clculo. Calcular la diferencia entre los valores de tiosulfato obtenidos para el ensayo en blanco y para el de la leche. Corregir el valor en funcin del volumen del precipitado, multiplicando por 0,992. Convertir la cifra obtenida en lactosa monohidratada, teniendo en cuenta que 1 ml de solucin de tiosulfato 0,040N corresponde a 0,00720 g de lactosa monohidratada. Expresar los resultados en porcentajes de lactosa monohidratada. La aplicacin de este factor 0,992 a todas las leches enteras no ocasiona ningn error sensible; sin embargo, si el mtodo se aplica a la leche desnatada, debe utilizarse 0,996 como factor de correccin. La diferencia mxima entre dos determinaciones repetidas no debe sobrepasar de 0,05% de lactosa.

La concentracin de la solucin de tiosulfato ha sido elegida de tal forma que la lectura en bureta sea de 2 a 3,5 ml para la mayor parte de las muestras de leche y de 9,5 a 9,7 ml para los ensayos en blanco. NOTA: Para esta normalizacin peridica del Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV puede emplearse: 182150 Potasio Yodato 0,025M SV. Cuando se proceda a una serie de anlisis se deben preparar los filtrados y los ensayos en blanco hasta la adicin de potasio yoduro inclusive. Finalmente se aade rpidamente la solucin de cloramina T a cada matraz y se anota la hora. Despus de una hora y media (se admite una tolerancia de una hora veinte minutos a una hora cuarenta minutos) se aade el cido clorhdrico en todos los matraces y siguiendo el mismo orden. As se paraliza la reaccin y los matraces se pueden valorar por turno. 4.7. Referencia. 4.7.1. Norma Internacional FIL-IDF 28: 1967. 5(a). EXTRACTO SECO (*) (Leches natural, certificada, higienizada y esterilizada) 5(a).1. Principio. Se entiende por contenido en extracto seco de las leches natural, certificada, higienizada y esterilizada, el residuo, expresado en porcentaje en peso, obtenido despus de efectuada la desecacin de la leche de que se trate por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma FIL-21: 1962 de la Federacin Internacional de Lechera. Una cantidad conocida de leche se deseca a temperatura constante hasta peso constante. El peso obtenido despus de desecar representa el de la materia seca. 5(a).2. Material y aparatos. 5(a).2.1. Balanza analtica, de sensibilidad 0,1 mg como mnimo. 5(a).2.2. Desecador provisto de un buen deshidratante (211335 Gel de Slice 3-6 mm con indicador QP). 5(a).2.3. Estufa de desecacin que permita conseguir una temperatura constante de 102 2C. 5(a).2.4. Cpsulas metlicas planas, en metal inoxidable o de vidrio de 2 cm de altura aproximadamente y de 6 a 8 cm de dimetro, aproximadamente, con tapas adecuadas. 5(a).2.5. Bao de agua. 5(a).3. Procedimiento. 5(a).3.1. Preparacin de la muestra.- Antes del

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4.6. Observaciones. La solucin de tiosulfato se debe normalizar peridicamente, por ejemplo, por valoracin de 10 ml de Potasio Yodato 0,04N, a los que se habr aadido 5 ml de solucin de Potasio Yoduro PA-ISO y 5 ml de la solucin de Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV.

Manlisis, poner la muestra a 20 2C y mezclarla cuidadosamente. Si no se obtiene una buena reparticin de la materia grasa, calentar lentamente a 40C, mezclarla suavemente y enfriarla, a 20 2C. 5(a).3.2. Determinacin.- Secar la cpsula y la tapa a 102 2C durante 30 minutos. Colocar la cpsula tapada en un desecador, dejarla enfriar a la temperatura ambiente y pesarla. Poner aproximadamente 3 ml de la muestra en la cpsula, tapar la cpsula con la tapa y pesarla. Poner la cpsula destapada en bao de agua durante 30 minutos. Poner la cpsula y la tapa en una estufa de desecacin a 102 2C durante 2 horas. La tapa se debe poner a un lado de la cpsula. Cubrir la cpsula con la tapa y ponerla en el desecador; dejarla enfriar y pesarla. Ponerla 1 hora ms en la estufa de desecacin; dejarla enfriar y pesarla. Repetir la desecacin hasta que la diferencia entre dos pesadas consecutivas no sea mayor de 0,5 mg. 5(a).4. Clculo. P' Contenido en extracto seco % = x 100 P P' = peso en gramos de la muestra despus de la desecacin. P = peso en gramos de la muestra antes de la desecacin. Si a la muestra de la leche se le han adicionado como conservadores sustancias no voltiles, como, por ejemplo, potasio dicromato, se debe corregir la expresin del extracto seco como sigue: P' C' Contenido en extracto seco % = x 100 PC C' = cantidad de conservante no voltil en la muestra analizada. P C = porcentaje de conservante x 100 En caso de ser potasio dicromato, el contenido porcentual de conservante se determina segn el mtodo 7. La diferencia entre dos determinaciones repetidas no debe ser mayor de 0,05% del extracto seco. 5(a).5. Referencia. 5(a).5.1. Norma Internacional FIL-IDF 21: 1962. (*) En el Real Decreto 1679/1994, captulo I, artculo 5, apartado 9, publicado en BOE n 229, de fecha 24/9/1994, se indica que la leche de vaca contiene un extracto seco magro igual o superior a 85 gramos por litro. 5(b). EXTRACTO SECO (Leches concentrada, evaporada y condensada) 5(b).1. Principio. Se entiende por contenido en extracto seco de las leches concentrada, evaporada y condensada, el residuo, expresado en porcentaje en peso obtenido despus de efectuada la desecacin de la leche de que se trate, por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma FIL-15: 1961 de la Federacin Internacional de Lechera. El mtodo consiste en la dilucin con agua de una cantidad conocida de muestra y la desecacin con arena a temperatura constante. El peso obtenido despus de desecar representa el de la materia seca. 5(b).2. Material y aparatos. 5(b).2.1. Balanza analtica de sensibilidad: 0,1 mg como mnimo. 5(b).2.2. Desecador provisto de un buen deshidratante 211335 Gel de Slice 3-6 mm con indicador QP. 5(b).2.3. Estufa de desecacin que permita obtener una temperatura constante de 98100C. 5(b).2.4. Cpsulas metlicas, planas, en metal inoxidable o de vidrio de 2,5 cm de altura aproximadamente, y de 7,5 cm de dimetro aproximado, con tapas adecuadas. 5(b).2.5. Arena de cuarzo o 211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP que pase a travs de un tamiz de diez aberturas por cm, pero que no pase a travs de un tamiz de 40 aberturas por cm y, si es necesario, lavada con 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO, despus con 131074 Agua PA-ACS y finalmente secada y calcinada. Para comprobar si la arena es adecuada, desecar una pequea cantidad a 98-100C hasta peso constante, aadir Agua PA-ACS, desecar de nuevo y pesar. No debe haber diferencia entre las dos pesadas. 5(b).2.6. Varillas cortas de vidrio. 5(b).2.7. Bao de agua. 5(b).3. Procedimiento. 5(b).3.1. Preparacin de la muestra.- Si se observa una separacin parcial ms o menos importante de algunos componentes, por ejemplo, materias proteicas, materia grasa, sales de calcio o lactosa, es necesario mezclar la muestra. 5(b).3.1.1. Leche concentrada o evaporada.Abrir el envase al borde de la tapa, verter la leche despacio en otro recipiente y mezclar bien por sucesivos transvases. La leche o la grasa que se adhiere a la tapa debe reincorporarse a la muestra. Calentar entonces la muestra tapada a una

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temperatura de 40C y mezclar ntimamente removiendo. Dejar enfriar. 5(b).3.1.2. Leche condensada.- Abrir el bote al borde de la tapa. La leche o grasa adherida a la tapa deber incorporarse a la muestra. Calentar a 40C y mezclar ntimamente removiendo de arriba abajo con una cuchara. Dejar enfriar. 5(b).3.2. Determinacin.- Colocar en la cpsula, aproximadamente, 25 g de arena y una pequea varilla de vidrio. Secar la cpsula y su contenido, con la tapa abierta, a 98-100C durante 2 horas. Colocar la cpsula tapada en un desecador, dejarla enfriar a la temperatura ambiente y pesar. Arrastrar la arena hacia un borde de la cpsula, pesar exactamente y poner en el espacio libre, aproximadamente 1,5 g de la muestra. Aadir cinco ml de Agua PA-ACS, mezclar los lquidos y la arena mediante una varilla de vidrio. Dejar la varilla en la mezcla. Colocar la cpsula en bao de agua hirviendo durante 20 minutos y remover con cuidado la mezcla de cuando en cuando. Colocar la cpsula con la varilla y la tapa en una estufa de desecacin a 98-100C durante 1 hora 30 minutos. La tapa se debe colocar al lado de la cpsula. Cubrir la cpsula con la tapa y ponerla en el desecador; dejarla enfriar y pesar. Colocar 1 hora ms en la estufa de desecacin; dejarla enfriar y pesar como antes. Repetir la desecacin hasta que la diferencia en peso entre dos pesadas sucesivas no exceda de 0,5 mg. 5(b).4. Clculo. P' Contenido en extracto seco % = x 100 P P' = peso en gramos de la muestra despus de desecar. P = peso en gramos de la muestra antes de desecar. La diferencia entre dos determinaciones repetidas no debe ser mayor de 0,1% del extracto seco. 5(b).5. Referencia. 5(b).5.1. Norma Internacional FIL-IDF 15: 1961. 6. CENIZAS

6.2. Material y aparatos. 6.2.1. Balanza de sensibilidad: 0,1 mg como mnimo. 6.2.2. Desecador provisto de un buen deshidratante (211335 Gel de Slice 3-6 mm con indicador QP). 6.2.3. Estufa de desecacin, regulada a 120C. 6.2.4. Horno elctrico con circulacin de aire, provisto de un regulador de temperatura. 6.2.5. Cpsula de platino o de un material inalterable en las condiciones del ensayo de aproximadamente 55 ml de dimetro y 25 de altura. 6.2.6. Bao de agua a temperatura de ebullicin. 6.3. Procedimiento. Colocar la cpsula en la estufa de desecacin a 102 2C durante 30 minutos. Pasarla luego al desecador, dejarla enfriar a la temperatura ambiente y pesar. Pesar exactamente alrededor de 10 g de leche en la cpsula. Poner la cpsula en bao de agua hirviendo hasta secado por evaporacin (aproximadamente siete horas). Incinerar el extracto seco, procedente de la desecacin anterior, por calentamiento durante 2 o 3 horas en un horno regulado entre 520 y 550C (no deben existir en ste ltimo partculas carbonosas). Poner a enfriar la cpsula en un desecador. Pesar con una aproximacin de 0,5 mg. 6.4. Clculo. El contenido en cenizas de la leche, expresado en porcentaje en peso, es igual a: M-m Cenizas % = 100 P M = peso de la cpsula y de las cenizas despus de la incineracin y enfriamiento posterior. m = peso de la cpsula vaca. P = peso en gramos de la leche empleada en la determinacin de las cenizas. 6.5. Observaciones. El peso de las cenizas es variable segn las condiciones de incineracin. La tcnica descrita anteriormente proporciona los resultados ms constantes; las diferencias no pasan generalmente de un 2% por trmino medio, y el 95% por lo menos de los cloruros se encuentran en las cenizas. Cuando la temperatura del horno se haya elevado ligeramente por encima de 550C, determinar los cloruros y corregir en consecuencia el peso de las cenizas. Si a la muestra se le ha aadido potasio dicromato, es necesario efectuar dos correcciones para obtener un valor aproximado de las cenizas de la leche inicial, operando como sigue:

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6.1. Principio. Se entiende por contenido en cenizas de la leche el producto resultante de la incineracin del extracto seco, expresado en porcentaje en peso, obtenido segn el procedimiento descrito a continuacin. El extracto seco se incinera a una temperatura determinada y en una lenta corriente de aire.

M1 Determinar el potasio dicromato y restar su peso del de las cenizas. 2 Determinar los cloruros en las cenizas, expresarlos en NaCl y aadir al peso de las cenizas la diferencia entre los cloruros totales de la leche y los cloruros resultantes. 7. POTASIO DICROMATO 7.1. Principio. La determinacin se realiza sobre las cenizas de la leche, por reduccin de los cromatos mediante una solucin de sulfato ferroamnico (sal de Mohr) Fe(NH4)2 (SO4)2. 6H2O cuyo exceso se valora con potasio permanganato. 7.2. Reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 131368 Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato PAISO 182114 Potasio Permanganato 0,01 mol/l (0,05N) SV 7.2.1. Solucin acuosa de Sal de Mohr de 8 g por l, (Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato PA-ISO), para valorar en el momento de su empleo (esta solucin se estabiliza por adicin de 12 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO por litro). 7.2.2. Solucin valorada de Potasio Permanganato 0,02N en la cual 1 ml corresponda a 0,00098 g de Cr2O7K2. NOTA: En un matraz aforado de 250 ml introducir 100 ml de Potasio Permanganato 0,01 mol/l (0,05N) SV, diluir y enrasar con Agua PA-ACS. Determinar el factor de la solucin 0,02N resultante. 7.2.3. Acido Sulfrico 96% PA-ISO (d = 1,84). 7.3. Procedimiento. Agotar las cenizas por lavados sucesivos con Agua PA-ACS; despus, con una solucin acuosa de Acido Sulfrico al 5% en volumen, obtener un total de 25 a 30 ml de lquido. Recogerlo en un vaso para valorar. Aadir alrededor de 5 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y 20 ml exactamente medidos de la solucin sulfrica de Sal de Mohr con la solucin valorada de Potasio Permanganato 0,02N hasta coloracin rosa permanente. Por otra parte, valorar en las mismas condiciones 20 ml de la misma solucin sulfrica de Sal de Mohr mediante la solucin valorada de Potasio Permanganato 0,02N. 7.4. Clculo. El contenido de la leche en potasio dicromato, expresado en porcentaje en peso, es igual a: (V' - V) 0,098 Potasio Dicromato % = P V = volumen en ml de potasio permanganato empleados en la valoracin del exceso de sal de Mohr. V' = volumen en ml de potasio permanganato empleados en la prueba en blanco. P = peso en gramos de la leche empleada en la determinacin de las cenizas. 8(a). ACIDEZ (Leches natural, certificada, higienizada y esterilizada) 8(a).1. Principio. Se entiende por acidez en las leches natural, certificada, higienizada y esterilizada el contenido aparente en cidos, expresado en g de cido lctico por 100 ml de leche, determinado por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde al descrito en la norma UNE 34.100 del Instituto de Racionalizacin del Trabajo. Un determinado volumen de leche se valora en solucin d


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