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A Anti

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Discrepancias ABO ABO Discrepancias ABO ABO Tec Tec. Graciela . Graciela Deutsch Deutsch - Noviembre 2015 Noviembre 2015 Tec Tec. Graciela . Graciela Deutsch Deutsch - Noviembre 2015 Noviembre 2015 1 Fuente: Manual Téfnico de la AABB (17º edición)
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Page 1: A Anti

DiscrepanciasABOABO

DiscrepanciasABOABO

TecTec. Graciela . Graciela DeutschDeutsch -- Noviembre 2015Noviembre 2015TecTec. Graciela . Graciela DeutschDeutsch -- Noviembre 2015Noviembre 2015

1

Fuente: Manual Téfnico de la AABB (17º edición)

Page 2: A Anti

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Page 3: A Anti

Antisueros Antisueros conocidosconocidosAntisueros Antisueros conocidosconocidos

AntiAnti--A AntiA Anti--B AntiB Anti--ABAB

GRs. de fenotipo GRs. de fenotipo ABO conocidosABO conocidos

““AA”” ““BB”” ““OO””

AntiAnti--A AntiA Anti--B AntiB Anti--ABAB

GRs. de fenotipo GRs. de fenotipo ABO conocidosABO conocidos

““AA”” ““BB”” ““OO””

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Page 4: A Anti

DETERMINACIÓN DEL DETERMINACIÓN DEL GRUPO SANGUÍNEO ABOGRUPO SANGUÍNEO ABO

�Directo ………. (Celular)�Directo ………. (Celular)

�Inverso ………. (Sérico)(Reverso)

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Page 5: A Anti

Discrepancias ABODiscrepancias ABO� La amplia mayoría de los grupos sanguíneos ABO tratados en el banco de sangre cumplen con las leyes establecidas de antígenos y anticuerpos establecidas de antígenos y anticuerpos recíprocos para ese sistema.

�Pero hay una población que muestra algunos resultados discrepantes que deben resolverse a fin de definir cuál es el grupo ABO exacto.

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Page 6: A Anti

�Definimos las discrepancias como cualquier desviación de los patrones ABO esperadostanto en los antígenos celulares como en los

Discrepancias ABODiscrepancias ABODefinición

tanto en los antígenos celulares como en los anticuerpos séricos.

�Una discrepancia ABO se genera cuando la interpretación de la prueba de tipificación de los Glóbulos Rojos está en contradicción con la de la Prueba Sérica.

�Estos resultados deberán documentarse. La interpretación ABO debe retrasarse hasta que se resuelva la discrepancia.

6

Page 7: A Anti

AntiAnti--AA AntiAnti--BB Células ACélulas A11 Células BCélulas B

4+ 0 2+ 4+

¿Cuáles son sus tipos ABO? ? ? ? ? ? ? ¿Cuáles son sus tipos ABO? ? ? ? ? ? ?

4+ 0 2+ 4+

4+ 0 0 0

4+ 4+ 4+ 4+

7

Page 8: A Anti

Las Discrepancias ABO deben resolverse Las Discrepancias ABO deben resolverse

�En los Receptores:Las discrepancias ABO deben dilucidarse antes de transfundir cualquier antes de transfundir cualquier componente de la sangre. Si no se resuelve antes del momento de la transfusión de glóbulos rojos, estos deberán ser de grupo O (O Rh negativo si también hubiera una discrepancia en el tipo Rh). 8

Page 9: A Anti

Las Discrepancias ABO deben resolverse Las Discrepancias ABO deben resolverse

�En los Donantes:Las discrepancias ABO deben ser resueltas antes de etiquetar la unidad resueltas antes de etiquetar la unidad con un tipo de sangre.

9

Page 10: A Anti

La incidencia de las reacciones transfusionales agudas varía según el origen de la información.No se conoce con exactitud el número anual de casos debido al subrregistro, pero se ha estimado que la transfusión incompatible ABO puede ocurrir en 1 de 38.000 transfusiones de concentrado

eritrocitario, que la muerte por incompatibilidad es

10

eritrocitario, que la muerte por incompatibilidad es de 1:1.800.000 transfusiones y que la aparición de una reacción hemolítica aguda es de 1:12.000

transfusiones.(Bravo-Lindoro A. Reacción Hemolítica Aguda. Rev Mex Tran 2010;31:18-21. y http://www.transfusionmedicine.ca/resources/books/vein-vein/complications-bloodtransfusion/types-transfusion-complications/acute-immu. Fecha de consulta

16/01/2013)

Page 11: A Anti

REGLAS GENERALES PARA RESOLVER

1. Primero, siempre repetir la prueba.2. Chequear errores administrativos /

técnicos.3. Las reacciones más débiles suelen ser 3. Las reacciones más débiles suelen ser

dudosas.4. Consultar los resultados de las células

de detección (screening).5. Comprobar la edad del paciente.6. Comprobar el diagnóstico.7. Revisar el historial de transfusión.

11

Page 12: A Anti

Errores Administrativos

Errores Administrativos Administrativos

y TécnicosAdministrativos

y Técnicos

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Page 13: A Anti

Errores AdministrativosErrores Administrativos(Transcripción de datos)(Transcripción de datos)

Los errores administrativos son los más comunes.

�Si no se registran los resultados a �Si no se registran los resultados a medida que se lee cada prueba, se corre el riesgo de volcar datos incorrectos. Debe comprobarse cuál es la prueba que se está leyendo y registrar los resultados de inmediato. 13

Page 14: A Anti

�Asegúrese que está registrando los resultados en la hoja correcta. Una

Errores AdministrativosErrores Administrativos(Transcripción de datos)(Transcripción de datos)

resultados en la hoja correcta. Una forma de evitar este error es reducir al mínimo los tiempos que está trabajando con más de un paciente o de un donante a la vez.

14

Page 15: A Anti

�Registrar los resultados en un lugar equivocado de la hoja. Por ejemplo, colocar alguno de los

Errores AdministrativosErrores Administrativos(Transcripción de datos)(Transcripción de datos)

lugar equivocado de la hoja. Por ejemplo, colocar alguno de los resultados del suero en el lugar de la tipificación celular, o viceversa.

Es importante ejecutar metódicamente procedimientos que impidan llegar a este tipo de

errores. 15

Page 16: A Anti

�Confusión de muestras, tales como utilización del suero incorrecto, o de la suspensión globular equivocada.

Errores TécnicosErrores TécnicosHay una serie de errores técnicos que también pueden producirse:

globular equivocada.� La omisión del agregado de suero o reactivo puede conducir a errores técnicos en los que no se está produciendo una reacción donde se espera una. Tanto para ABO como para Rh se recomienda añadir los reactivos antes que los glóbulos rojos a tipificar.

16

Page 17: A Anti

� La adición de reactivos equivocados, como las células de screening, que son O, en lugar de las células A y B puede conducir a

Errores TécnicosErrores TécnicosHay una serie de errores técnicos que también pueden producirse:

lugar de las células A1 y B puede conducir a importantes errores técnicos.

� Los reactivos contaminados podrían dar lugar a falsos resultados tanto positivos como negativos, dependiendo de si ese reactivo tiene neutralizada la reactividad o añadida otra con respecto a los reactivos originales.

17

Page 18: A Anti

� La centrifugación insuficiente puede conducir a una reacción negativa ya que las células no se acercan de manera adecuada para enlazar

Errores TécnicosErrores TécnicosHay una serie de errores técnicos que también pueden producirse:

se acercan de manera adecuada para enlazar con el anticuerpo.

� La sobre-centrifugación puede ocasionar que la prueba se lea como una falsa reacción positiva al mantener un botón en la parte inferior del tubo, o que sea necesario agitar tánto el tubo para desalojar el botón que se desarme la aglutinación.

18

Page 19: A Anti

�El calentamiento de la prueba podría resultar en una falsa reacción negativa, ya que los anticuerpos ABO son IgM que reaccionan

Errores TécnicosErrores TécnicosHay una serie de errores técnicos que también pueden producirse:

anticuerpos ABO son IgM que reaccionan mejor en el frío.

�El exceso de células en la suspensión puede provocar reacciones debilitadas o negativas, dado el aumento de la oferta antigénica para el número de anticuerpos presentes en los reactivos. Recuerde que queremos estar en la zona de equivalencia de nuestras reacciones.

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Page 20: A Anti

�Pueden ocurrir fallas en la detección de resultados débiles si no se están observando las reacciones mientras se están moviendo

Errores TécnicosErrores TécnicosHay una serie de errores técnicos que también pueden producirse:

las reacciones mientras se están moviendo los tubos, o si se agitan demasiado los mismos.

�El material de vidrio sucio puede causar que las células se agrupen o aglomeren artificialmente.

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Page 21: A Anti

�No detectar la Hemólisis puede ser un problema. Recordar que una reacción positiva puede producir tanto hemólisis como

Errores TécnicosErrores TécnicosHay una serie de errores técnicos que también pueden producirse:

positiva puede producir tanto hemólisis como aglutinación, dado que la reacción antígeno-anticuerpo puede activar el complemento. Cuando el Complemento interviene puede conducir a la hemólisis que es también un indicio de una reacción positiva.

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Page 22: A Anti

Resultados DiscrepantesResultados Discrepantes

Si en efecto estamos ante una discrepancia real entre los resultados de la prueba Celular y la prueba Sérica para ABO, ¿Dónde está el problema? Es más ABO, ¿Dónde está el problema? Es más

común que los problemas sean ocasionados por la Prueba Inversa (Sérica) que por la Prueba Directa

(Celular). Esto suele manifestarse como la presencia de un anticuerpo extra o como la ausencia de un anticuerpo

esperado.22

Page 23: A Anti

Problemas vinculados a la Problemas vinculados a la Prueba InversaPrueba Inversa

23

Page 24: A Anti

Resultados DiscrepantesResultados Discrepantes

Anticuerpo ExtraAnticuerpo Extra

ANTI-A ANTI-B Células A1 Células B

4+ 0 2+ 4+4+ 0 2+ 4+

Anticuerpo Anticuerpo Esperado AusenteEsperado Ausente

ANTI-A ANTI-B Células A1 Células B

4+ 0 0 024

Page 25: A Anti

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

• Un ejemplo extremo sería la ausencia de reacción de las tipificaciones Directa

Anticuerpo/s Débil/es o Ausente/s

de reacción de las tipificaciones Directa e Inversa.

ANTIANTI--AA ANTIANTI--BB Células A1Células A1 Células BCélulas B

00 00 00 00

25

Page 26: A Anti

• 1. Compruebe la fecha de nacimiento, ya que los recién nacidos y los ancianos son más propensos a demostrar esta discrepancia. Es habitual que los

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Anticuerpo/s Débil/es o Ausente/s

demostrar esta discrepancia. Es habitual que los anticuerpos ABO del recién nacido no estén regularmente presentes, por lo menos hasta los 6 meses. NO TRATE DE CONFIRMAR EL SUERO DE LOS RECIÉN NACIDOS. Los individuos muy ancianos o añosos también pueden perder su capacidad de mantener niveles comunes de anticuerpos ABO, reduciéndolos.

26

Page 27: A Anti

2. Tenga en cuenta el diagnóstico dado que la condición del paciente, como por ej.:

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Anticuerpo/s Débil/es o Ausente/s

condición del paciente, como por ej.:� deficiencias inmunes� quimioterapia� radioterapia� trasplante de médula óseapuede explicar la falta de anticuerpos.

27

Page 28: A Anti

1. Añadir 2 gotas más del suero, por si fuera el caso que se omitió de añadir la

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Resolución de anticuerpos ausentes

fuera el caso que se omitió de añadir la primera vez y centrifugar. Si es negativo, entonces incubar en frío (4ºC–18ºC) 15-30 minutos.

2. Incluir Auto-Control para descartar interferencias de Anti-I natural durante la incubación a 4ºC–18ºC.

28

Page 29: A Anti

3. Los Anti-A y Anti-B se potencian a 4ºC, ya que son anticuerpos salinos y fríos que

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Resolución de anticuerpos ausentes

que son anticuerpos salinos y fríos que actuarían de la forma en que se ve en este ejemplo de un individuo “O”.

ANTI-A ANTI-B Células A1

Células B

AutoControl

0 0 2+ 2+ 029

Page 30: A Anti

4. Compare esto con un AutoAnti-I potenciado a 4ºC que podría dar un Auto-

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Resolución de anticuerpos ausentes

potenciado a 4ºC que podría dar un Auto-Control positivo, como se ve en el ejemplo siguiente

ANTI-A ANTI-B Células A1

Células B

AutoControl

0 0 2+ 2+ 2+30

Page 31: A Anti

5. En los Grupos A ó B los resultados pueden servir como su propio control negativo

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Resolución de anticuerpos ausentes

servir como su propio control negativoUn Anti-B, por ejemplo, a 4ºC se potenciaría como se ve a continuación:

ANTI-A ANTI-B Células A1

Células B

AutoControl

4+ 0 0 2+ 031

Page 32: A Anti

6. El Auto-Anti-I reforzado a 4ºC, por otra parte, podría tener un autocontrol positivo.

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Resolución de anticuerpos ausentes

parte, podría tener un autocontrol positivo.

ANTI-A ANTI-B Células A1

Células B

AutoControl

4+ 0 2+ 2+ 2+32

Page 33: A Anti

7. Si el Auto-Anti-I se potencia junto con losAnti-A y Anti-B, volver a incubar pero a

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA) Resolución de anticuerpos ausentes

Anti-A y Anti-B, volver a incubar pero a 18ºC. Como se ve en este ejemplo a 18ºC: el Anti-B mejora pero el Anti-I no es reactivo a esa temperatura.

ANTI-A ANTI-B Células A1

Células B

AutoControl

4+ 0 0 2+ 033

Page 34: A Anti

Presencia de anticuerpos Anti-A InesperadosLa presencia de AntiLa presencia de Anti--A1 debe sospecharse cuando el A1 debe sospecharse cuando el anticuerpo es reactivo en una centrifugación inmediata anticuerpo es reactivo en una centrifugación inmediata contra los glóbulos rojos “A” pero no contra las células contra los glóbulos rojos “A” pero no contra las células

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

contra los glóbulos rojos “A” pero no contra las células contra los glóbulos rojos “A” pero no contra las células de de screeningscreening, como se ve en el siguiente ejemplo: , como se ve en el siguiente ejemplo:

ANTI-A ANTI-B Células A1 Células B4+ 0 2+ 4+

Centrifugac.Inmediata 37ºC Coombs CCC

Panel IPanel I 0

Panel IIPanel II 0AutocontrolAutocontrol 0

34

Page 35: A Anti

Cómo resolver Anti-A Inesperados

1.1. Revise la historia de transfusiones Revise la historia de transfusiones recientes de productos del grupo O, recientes de productos del grupo O,

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

recientes de productos del grupo O, recientes de productos del grupo O, (especialmente concentrados (especialmente concentrados plaquetariosplaquetarios) que podría explicar la ) que podría explicar la presencia de este anticuerpo.presencia de este anticuerpo.

35

Page 36: A Anti

Densidad Antigénica en Subgrupos A

Eritrocito A1

800.000 - 900.000 Ags

Eritrocito A2

160.000 - 440.000 Ags

Eritrocito A3

35.000 - 100.000 Ags800.000 - 900.000 Ags 160.000 - 440.000 Ags 35.000 - 100.000 Ags

Eritrocito AX

1.400 - 10.300 Ags

Eritrocito Am

200 - 1.090 Ags 36

Page 37: A Anti

Densidad Antigénica en Subgrupos A

Eritrocito A1

800.000 - 900.000 Ags

Eritrocito A2

160.000 - 440.000 Ags

Eritrocito A3

35.000 - 100.000 Ags800.000 - 900.000 Ags 160.000 - 440.000 Ags 35.000 - 100.000 Ags

Eritrocito AX

1.400 - 10.300 Ags

Eritrocito Am

200 - 1.090 Ags 37

Page 38: A Anti

Cómo resolver Anti-A Inesperados

2.2. Probar los hematíes del paciente con Probar los hematíes del paciente con Lectina AntiLectina Anti--A1 (A1 (Dolichos biflorusDolichos biflorus). Los ). Los

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

Lectina AntiLectina Anti--A1 (A1 (Dolichos biflorusDolichos biflorus). Los ). Los subgrupos darán Negativo (subgrupos darán Negativo (––) con este ) con este reactivo, pero los hematíes Areactivo, pero los hematíes A11 darán darán Positivo (+).Positivo (+).Lectina + Células ALectina + Células A11 = ++++= ++++Lectina + Células de subgrupo ALectina + Células de subgrupo A = 0= 0

38

Page 39: A Anti

Cómo resolver Anti-A Inesperados

3.3. Probar el suero del paciente con 3 células Probar el suero del paciente con 3 células AA y 3 células Ay 3 células A . Si contiene un Anti. Si contiene un Anti--AA

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

AA11 y 3 células Ay 3 células A22. Si contiene un Anti. Si contiene un Anti--AA11ocurrirán las siguientes reacciones: ocurrirán las siguientes reacciones:

AntiAnti--AA11:: Suero + Células ASuero + Células A11 = + = + Suero + Células ASuero + Células A22 = 0 = 0

AntiAnti--AA11 reacciona sólo con las células Areacciona sólo con las células A11, , pero no con las células Apero no con las células A22..

39

Page 40: A Anti

Cómo resolver Anti-A Inesperados

4.4. En el caso de AntiEn el caso de Anti--A pasivo proveniente de A pasivo proveniente de plasma de concentrados plasma de concentrados plaquetariosplaquetarios de de

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

plasma de concentrados plasma de concentrados plaquetariosplaquetarios de de grupo “O” las reacciones serían las grupo “O” las reacciones serían las siguientes: siguientes:

Suero + Células A1Suero + Células A1 = + = + Suero + Células A2Suero + Células A2 = + = +

En este caso, si el anticuerpo es potente puede ser necesario transfundir glóbulos rojos del grupo “O”. 40

Page 41: A Anti

Anticuerpo Inesperado A ó B cuando la D.A.I. en una LI es +

Puede haber una reacción positiva con las Puede haber una reacción positiva con las

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

Puede haber una reacción positiva con las Puede haber una reacción positiva con las células reactivas Acélulas reactivas A11 ó B que se deba a un ó B que se deba a un anticuerpo que reacciona a temperatura anticuerpo que reacciona a temperatura ambiente contra otro antígeno distinto de A ambiente contra otro antígeno distinto de A óó B B presente presente en dichas célulasen dichas células(como los (como los HH, , MM, , NN, , SS, , PP11, , LeLeaa, , LeLebb, etc.)., etc.).

41

Page 42: A Anti

Anticuerpo Inesperado A ó B cuando la D.A.I. en una LI es +

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

ANTI-A ANTI-B Células A1 Células B4+ 0 2+ 4+

Centrifugac.Inmediata 37ºC Coombs CCC

Panel Det IPanel Det I 2+

Panel Det IIPanel Det II 0AutocontrolAutocontrol 0

42

Page 43: A Anti

Anticuerpo Inesperado A ó B cuando la D.A.I. en una LI es +

¿Cómo resolver la cuestión del “Anti-A” inesperado

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

¿Cómo resolver la cuestión del “Anti-A” inesperado que es, probablemente, otro anticuerpo; según los resultados de la detección de anticuerpos?

1.1. Identificar el anticuerpo mediante la realización de Identificar el anticuerpo mediante la realización de un panel identificador a temperatura ambiente.un panel identificador a temperatura ambiente.

2.2. Observar el efecto del preObservar el efecto del pre--calentamiento sobre este calentamiento sobre este anticuerpo, haciendo la tipificación Inversa con anticuerpo, haciendo la tipificación Inversa con suero y glóbulos precalentados.suero y glóbulos precalentados.

43

Page 44: A Anti

Anticuerpo Inesperado A ó B cuando la D.A.I. en una LI es +

3.3. Tipificar los glóbulos rojos ATipificar los glóbulos rojos A ó B para el antígeno ó B para el antígeno

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

3.3. Tipificar los glóbulos rojos ATipificar los glóbulos rojos A11 ó B para el antígeno ó B para el antígeno correspondiente una vez identificado el anticuerpo.correspondiente una vez identificado el anticuerpo.

Por ej.: si el paciente tiene un Por ej.: si el paciente tiene un AntiAnti--NN que fue que fue demostrado a temperatura ambiente de acuerdo con demostrado a temperatura ambiente de acuerdo con el proceso de identificación de anticuerpos, entonces el proceso de identificación de anticuerpos, entonces tendrían que tipificarse para tendrían que tipificarse para NN los glóbulos rojos los glóbulos rojos utilizados para la prueba Inversa. Si el utilizados para la prueba Inversa. Si el antianti--NN fue la fue la causa del problema, entonces las células que han sido causa del problema, entonces las células que han sido útilizadasútilizadas deberían mostrarse N+ deberían mostrarse N+ 44

Page 45: A Anti

Rouleaux genera una “aglutinación” Inesperada en

todas las pruebas séricas

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

ANTI-A ANTI-B Células A1 Células B4+ 0 2+ 4+

Centrifugac.Inmediata 37ºC Coombs CCC

Panel Det IPanel Det I 2+

Panel Det IIPanel Det II 2+AutocontrolAutocontrol 2+

45

Page 46: A Anti

Rouleaux genera una “aglutinación” Inesperada en

todas las pruebas séricas

El Rouleaux también puede dar falsos positivos

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

El Rouleaux también puede dar falsos positivos en la Prueba Directa, tanto si es lo suficientemente fuerte como si las células no están lo suficientemente lavadas. Este fenómeno se debe a una alteración en la concentración proteica del suero.

46

Page 47: A Anti

Rouleaux genera una “aglutinación” Inesperada en

todas las pruebas séricas

PPuede tener lugar en circunstancias tales como:uede tener lugar en circunstancias tales como:

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

PPuede tener lugar en circunstancias tales como:uede tener lugar en circunstancias tales como:

••MacroglobulinemiaMacroglobulinemia

••Mieloma múltipleMieloma múltiple

••Enfermedad hepáticaEnfermedad hepática

También se observa tras la infusión de expansoresTambién se observa tras la infusión de expansores

47

Page 48: A Anti

Rouleaux genera una “aglutinación” Inesperada en

todas las pruebas séricas

Características del Rouleaux: Características del Rouleaux:

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

Características del Rouleaux: Características del Rouleaux:

•• MMacroscópicamenteacroscópicamente parece una aglutinaciónparece una aglutinación..

•• Microscópicamente, aparece como "pilas de Microscópicamente, aparece como "pilas de monedas"monedas"

48

Page 49: A Anti

49

Page 50: A Anti

50

Page 51: A Anti

51

Page 52: A Anti

52

Page 53: A Anti

¿¿Cómo resolver los problemas de PseudoaglutinaciónCómo resolver los problemas de Pseudoaglutinación??

Hacer la Técnica de Reemplazo o Sustitución con solución salina:

Resolución de Problemas Resolución de Problemas PRUEBA SÉRICA (INVERSA) PRUEBA SÉRICA (INVERSA)

1. Re-Centrifugar el tubo de la prueba.

2. Extraer el suero sin romper el botón celular.

3. Añadir 2 gotas de solución salina.

4. Efectuar una lectura en busca de aglutinación.

5. El Rouleax (pseudoaglutinación) se dispersa en solución salina; la verdadera aglutinación persiste. 53

Page 54: A Anti

Problemas vinculados a la Problemas vinculados a la Prueba DirectaPrueba Directa 54

Page 55: A Anti

Hay una serie de problemas que pueden originarse en los Glóbulos Rojos estudiados:

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

estudiados:• Aglutinación en campo mixto.• Antígeno débil o ausente.• Antígeno inesperado.• Células Poliaglutinables.

55

Page 56: A Anti

• La aglutinación en campo mixto se

Aglutinación en Campo Mixto Aglutinación en Campo Mixto

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

• La aglutinación en campo mixto se observa como la presencia de aglutinatos, grandes o pequeños, en un fondo de hematíes No aglutinados. Normalmente la aglutinación en campo mixto es indicativa de una mezcla de poblaciones celulares.

56

Page 57: A Anti

• Mezcla de poblaciones celulares

Aglutinación en Campo Mixto Aglutinación en Campo Mixto

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

Causas:Causas:Causas:Causas:• Mezcla de poblaciones celulares

resultantes de la transfusión masiva de sangre de otro grupo sanguíneo; como un individuo “B” que recibe unidades de glóbulos rojos de donante "O" por carencia de unidades de donantes “B”.

57

Page 58: A Anti

· Los pacientes sometidos a un trasplante de

Aglutinación en Campo Mixto Aglutinación en Campo Mixto

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

Causas:Causas:Causas:Causas:· Los pacientes sometidos a un trasplante de

MO pueden tener tanto hematíes de su grupo sanguíneo original como del grupo de la MO transplantada.

· Subgrupos débiles de A3, tradicionalmente generan una reacción de campo mixto.

58

Page 59: A Anti

o Intentar encontrar la causa de la aglutinación en campo mixto antes de

Aglutinación en Campo Mixto Aglutinación en Campo Mixto

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

aglutinación en campo mixto antes de efectuar una transfusión de sangre.

o Asegurarse de verificar los registros de transfusión del paciente y la historia clínica. Si aparenta ser un subgrupo débil, por ej., habrá que efectuar los ensayos mencionados en Anti-A Inesperados.

59

Page 60: A Anti

AntAntíígeno dgeno déébil o ausentebil o ausente

ANTI-A ANTI-B CélulasA1 Células B

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

La debilidad o la ausencia de un antígeno puede ser ocasionada por:

1. la existencia de subgrupos muy débiles de A o B,2. la pérdida de transferasas en la leucemia aguda,3. la transfusión masiva del grupo “O”, o4. el trasplante de médula ósea

0 0 0 4+

60

Page 61: A Anti

¿Cómo resolver un caso de antígeno débil o inexistente?

AntAntíígeno dgeno déébil o ausentebil o ausente

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

1. Obtener la historia transfusional reciente y cualquier historial clínico de trasplante de médula ósea.

2. Leer la Prueba Directa microscópicamente.3. Utilizar reactivo Anti-A,B e incubar a 4ºC–22ºC, al

menos 15 minutos.4. Utilizar antisueros monoclonales reconocidos como

capaces de reaccionar con antígenos como AX y BX.61

Page 62: A Anti

¿Cómo resolver un caso de antígeno débil o inexistente?

AntAntíígeno dgeno déébil o ausentebil o ausente

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

· Si los pasos anteriores no resuelven el problema, realizar exámenes especializados, los que podrían incluir Pruebas de Absorción / Eluciónde anticuerpos y Estudios de la Saliva.

62

Page 63: A Anti

Los Antígenos B Adquiridos generalmente se han visto asociados con patologías del colon o en

AntAntíígeno inesperado: Antgeno inesperado: Antíígeno B Adquiridogeno B Adquirido

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

visto asociados con patologías del colon o en infecciones por bacilos Gram-negativos.

Las enzimas bacterianas modifican el antígeno "A" y lo convierten en un "antígeno B". En consecuencia, la tipificación celular del paciente se presenta como un AB, pero mantiene prueba inversa como un A.

63

Page 64: A Anti

L-Fucosa

D-Galactosa

N-Acetilglucosamina

N-Acetilgalactosamina

64

Page 65: A Anti

AntAntíígeno inesperado: Antgeno inesperado: Antíígeno B Adquiridogeno B Adquirido

ANTI-A ANTI-B CélulasA1 Células B

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

ANTI-A ANTI-B CélulasA1 Células B

4+ 2+ 0 4+

65

Page 66: A Anti

AntAntíígeno inesperado: Antgeno inesperado: Antíígeno B Adquiridogeno B Adquirido

¿Cómo resolver?

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

••Configurar un autocontrol. El propio AntiConfigurar un autocontrol. El propio Anti--B del B del paciente no aglutina sus propias células AB.paciente no aglutina sus propias células AB.

••Revisar la historia clínica en búsqueda de Revisar la historia clínica en búsqueda de evidencia de patología de colon o bacilos evidencia de patología de colon o bacilos GramGram--negativos.negativos.

66

Page 67: A Anti

CCéélulas Poliaglutinables lulas Poliaglutinables

Por ej.: Activación T, como resultado de alteraciones heredadas o adquiridas de la membrana eritrocitaria, con

Resolución de ProblemasResolución de ProblemasPRUEBA PRUEBA CELULARCELULAR ((DIRECTADIRECTA) )

heredadas o adquiridas de la membrana eritrocitaria, con exposición de “autoantígenos crípticos”.El suero humano naturalmente tiene anticuerpos contra estos antígenos crípticos, aquellos glóbulos rojos anormales se aglutinan inesperadamente en presencia de reactivos anti-A y anti-B humanos. En general, los anticuerpos monoclonales anti-A y anti-B no detectan la poliaglutinación. 67

Page 68: A Anti

Problemas vinculados a ambas Problemas vinculados a ambas pruebaspruebas

68

Page 69: A Anti

Crio AutoCrio Auto--aglutininas Fuertesaglutininas Fuertes

ANTI-A ANTI-B Células A1 Células B

PROBLEMAS TANTO CON LAS PROBLEMAS TANTO CON LAS CÉLULAS COMO CON EL SUEROCÉLULAS COMO CON EL SUERO

4+ 4+ 4+ 4+CentrifInmed 37ºC Coombs CCC

Panel I 4+ 3+ 3+ /

Panel II 4+ 3+ 3+ /

Autocontrol 4+ 3+ 3+ /69

Page 70: A Anti

Crio AutoCrio Auto--aglutininas Fuertesaglutininas Fuertes

Una potente Crio Auto-aglutinina

PROBLEMAS TANTO CON LAS PROBLEMAS TANTO CON LAS CÉLULAS COMO CON EL SUEROCÉLULAS COMO CON EL SUERO

Una potente Crio Auto-aglutinina

Es comúnmente debida a un

fuerte Auto-Anti-I.

70

Page 71: A Anti

Crio AutoCrio Auto--aglutininas Fuertesaglutininas Fuertes

1. Para resolver las dificultades de la tipificación celular:

PROBLEMAS TANTO CON LAS PROBLEMAS TANTO CON LAS CÉLULAS COMO CON EL SUEROCÉLULAS COMO CON EL SUERO

tipificación celular:

· Lavar las células 3-4 veces con salina tibia (37ºC).

· Repetir con las células lavadas con salina tibia.

71

Page 72: A Anti

Crio AutoCrio Auto--aglutininas Fuertesaglutininas Fuertes

2. Para resolver las dificultades de la tipificación sérica:

PROBLEMAS TANTO CON LAS PROBLEMAS TANTO CON LAS CÉLULAS COMO CON EL SUEROCÉLULAS COMO CON EL SUERO

tipificación sérica:

• Realizar pruebas en suero a 37ºC , evitando perder con esta técnica la visualización de isoaglutininas Anti-A y Anti-B débiles).

• Auto-Absorber las crio-aglutininas a 4ºC sobre los hematíes del paciente.

72

Page 73: A Anti

73

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Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2

3

4

5

6

7

8 74

Page 75: A Anti

Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2 00 00 ++ 00 ++ 00

3

4

5

6

7

8 75

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Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2 00 00 ++ 00 ++ 00

3 00 00 ++ ++ ++ 00

4

5

6

7

8 76

Page 77: A Anti

Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2 00 00 ++ 00 ++ 00

3 00 00 ++ ++ ++ 00

4 ++ ++ ++ 00 ++ 00

5

6

7

8 77

Page 78: A Anti

Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2 00 00 ++ 00 ++ 00

3 00 00 ++ ++ ++ 00

4 ++ ++ ++ 00 ++ 00

5 00 ++ 00 ++ ++ 00

6

7

8 78

Page 79: A Anti

Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2 00 00 ++ 00 ++ 00

3 00 00 ++ ++ ++ 00

4 ++ ++ ++ 00 ++ 00

5 00 ++ 00 ++ ++ 00

6 00 00 00 ++ ++ ++

7

8 79

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Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2 00 00 ++ 00 ++ 00

3 00 00 ++ ++ ++ 00

4 ++ ++ ++ 00 ++ 00

5 00 ++ 00 ++ ++ 00

6 00 00 00 ++ ++ ++

7 ++ ++ ++ ++ ++ ++

8 80

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Caso

PruebaPrueba

DirectaDirectaABO Prueba InversaPrueba Inversa ABO Final

AntiAnti--AA

AntiAnti--BB

AntiAnti--A,BA,B

GRGRAA

GRGRBB

GRGROO

1 ++ 00 ++ ++ ++ 00

2 00 00 ++ 00 ++ 00

3 00 00 ++ ++ ++ 00

4 ++ ++ ++ 00 ++ 00

5 00 ++ 00 ++ ++ 00

6 00 00 00 ++ ++ ++

7 ++ ++ ++ ++ ++ ++

8 00 00 00 00 00 00 81

Page 82: A Anti

Sólo se diagnosticanSólo se diagnosticanlas circunstanciaslas circunstanciasque se sospechan,que se sospechan,que se sospechan,que se sospechan,y sólo se sospechany sólo se sospechanlas que se conocen. las que se conocen.

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