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7/26/2019 Cromatografía de Suelos
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CROMATOGRAFÍA DE SUELOS
La cromatografía es un método científico sencio! "arato e inde#endiente #ara reai$ar an%isis
cuaitati&os de sueos! com#ostas ' "iofertii$antes(
Ea"oraci)n de una cromatografía de sueo
*ncidir #rimeramente +ue un cronograma ofrece muc,a informaci)n cuaitati&a! so"re a
caidad de sueo ' de sus #artes! #ero no informa de as cantidades! no es un an%isis
cuantitati&o! #or o +ue si se desea conocer os nutrientes mineraes #resentes en e sueo ' en
+ué cantidades se de"er% reai$ar un an%isis en a"oratorio(
Materiaes necesarios #ara ea"orar una cromatografía desueo
Utensilios necesarios Cartón o papel
Colador de plástico
Mortero
Báscula, cucharita Vasos (o vasos de precipitados o erlenmeyers, tantos como muestras de suelos)
Recipientes de vidrio: para las preparaciones de los reactivos Filtros Whatman, sacaocado ! mm, clavo, ti"eras y lápi# Ca"a (de pore$pan u otro material) oscura, papel de váter
%apel de aluminio (para curir el recipiente &ue conten'a el nitrato de plata)
%lacas de %etri (u otros utensilios para misma unción)
erin'uilla
Productos y reactivos Muestra de suelo
*'ua destilada
+idró$ido de sodio (sólido, en escamas) -normarse acerca de este reactivo a&u. /
0itrato de plata (sólido, 'ranulado) -normarse acerca de este reactivo a&u. /
-aso a #aso #ara ea"orar a cromatografía
Toma de muestras
Coger una muestra de sueo +ue se +uiera anai$ar! guardaro en un reci#iente! me.or si no se
cierra com#etamente #ara +ue a tierra #ueda res#irar/ se #ueden usar "osas de #%stico #or
e.em#o! a ser #osi"e #orosas( Tomar una muestra de medio a 0 1io( En e caso de tomar una
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muestra de a ca#a su#erficia! desec,ar os #rimeros 2 cm de sueo de su#erficie #or ee&ado
riesgo de ateraci)n( *dentificar e reci#iente de cada muestra(
Se es#arce a muestra so"re cart)n o #a#e! +ue no sea #a#e de #eri)dico o #arecido de"ido a
+ue as tintas #ueden contaminar a muestra( De.ar secar durante 345 días a aire 6m%s días si
es necesario7! a so de forma indirecta! e ir remo&iendo a muestra con as manos #ara o"tenerun secado ,omogéneo( En caso de no conseguir secar a muestra de ninguna manera! se #uede
o#tar #or secara en una estufa a 89:C(
Muestra de sueo sec%ndose so"re un cart)n fino
Recomendaciones; Se recomienda tra"a.ar con un mante a "ase de #a#e de #eri)dico #or si
se &ierte ag<n í+uido! ' tam"ién se recomienda no reai$ar a cromatografía con una u$ .usto
encima! 'a +ue #uede catai$ar e re&eado(
Preparación de la muestra
La muestra de sueo se tami$a con un coador de #%stico ' se #u&eri$a con un mortero #ara
o"tener una muestra o m%s fina #osi"e( Un mortero rugoso #uede faciitar e #u&eri$ado( La
#u&eri$aci)n de a muestra en mortero de"e reai$arse girando a mano de mortero e irmac,acando a muestra! nunca se de"e ,acer con a mano de mortero ,acia adeante ' ,acia
atr%s! #uesto +ue se modifica a muestra( La #u&eri$aci)n se reai$a ,asta +ue a tierra +uede
fina! sin granos( Una &e$ moida a muestra! se #esan 2 gramos de sueo ' se #onen en un
Erenme'er 6o un &aso de #reci#itados! o un &aso de casa de "e"er agua7(
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1Preparación del reactivo sosa
-or otro ado! #ara #re#arar este reacti&o necesitamos sa"er cu%ntas muestras &amos a
anai$ar( Este reacti&o consiste en me$car e ,idr)=ido de sodio 6sosa! >aO?7 en de aguadestiada 6se recomienda agua destiada de caidad! #uesto +ue un agua de "a.a caidad #uede
entor#ecer os an%isis7 a 0@( -or e.em#o! #ara 03 muestras 6es decir 03 cromatografias7 se
#esan 8 gramos de sosa en 899 mL de agua destiada! ' así se o"tienen 899 mL de sosa a 0@(
Estos reacti&os se #ueden #oner en cua+uier reci#iente de crista +ue dis#onga de suficiente
&oumen #ara conteneros( Diso&er a sosa en e agua destiada dando &uetas a reci#iente(
Este reacti&o aguanta "astante tiem#o si est% "ien conser&ado(
Preparación de la muestra + el reactivo sosa
-osteriormente ec,ar 29 mL de sosa a 0@ en cada una de as muestras! ' me$car( La me$ca se
reai$a &eces Ba me$ca se ,ace de a siguiente manera; se dan &uetas ,acia un ado 6,acia
a derec,a7 ' ,acia e otro ado 6,acia a i$+uierda7! ' estas &uetas a un ado ' a otro se
re#ite &eces( E ,ec,o de girar ,acia un ado ' ,acia e otro es +ue os giros a i$+uierda '
derec,a estructuren moecuarmente e agua ' faciitar a disouci)n(
-aso a #aso;
Momento 0: 1e pesan los 2 'ramos de suelo tami#ado, se a3aden 24 m5 de 0a6+ al
78, se me#cla de la manera e$plicada anteriormente, y se de"a reposar 72 minutos9 Momento 15’: %asados 72 minutos se vuelve a me#clar de la manera indicada9 se
de"a reposar 7 hora9 Momento 1h: %asada una hora se vuelve a me#clar de la manera indicada, y se de"a
reposar 2;< horas9 Momento 5h: %asadas las 2;< horas no se me#cla más= >s el momento de hacer el
revelado9 ?urante este tiempo de 2 horas, se tienen &ue preparar los @ltros, el nitrato de plata yrevelar el nitrato de plata en los @ltros9 >s decir, &ue en el momento 2 h tiene &ue estar todopreparado para impre'nar el @ltro con la muestra de suelo9
E resto de sueo se guarda en una "osa de #a#e ' se #one dentro de un reci#iente de &idrio o
#%stico( Guardar a muestra #or o menos ,asta ,a"er terminado a cromatografía ' asegurarse
+ue se ,a reai$ado correctamente(
Preparación del fltro
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Fitro ,atman de n<mero
?a' +ue #re#arar tantos fitros como muestras tengamos( Se recomiendan os fitros ,atman!
#ara sueos se sueen usar os de n<mero 6o n<mero 07( Se usa este ti#o de fitro #or+ue es un#a#e sensi"e! así +ue ,a' +ue mani#uaro con cuidado ' tocaro o mínimo #osi"e ' con as
manos im#ias( E ,atman n<mero a"sor"e m%s! es m%s r%#ido! +ue e n<mero 0! +ue tarda
m%s de"ido a +ue es un fitro m%s a#retado(
Se usa un saca"ocado de 3 mm #ara reai$ar e agu.ero en e centro de #a#e fitro! #or d)nde
se #ondr% #osteriormente e #ai"o( E agu.ero se #uede reai$ar con a a'uda de un martio!
sin e=cederse en e go#e! #or o +ue se recomienda #oner una madera #or de"a.o( Se marca e
#a#e fitro con dos #untos! ,ec,os con a a'uda de un ca&o #e+ueo! a cm ' a 8 cm de
centro/ a marca de cm nos ser&ir% #ara im#regnar con nitrato de #ata! ' a de 8 cm nos
ser&ir% #ara im#regnar e fitro con a muestra de sueo ,asta esa marca(
*dentificar os fitros seg<n a muestra +ue se anai$a( La $ona #ara identificar as muestras es a
#arte m%s e=terna de fitro! de a marca de os 8 cm ,asta e "orde( Se recomienda escri"ir a
%#i$(
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E.em#o de #a#e de fitro #re#arado
Preparación del palibo
Uno de os fitros se usa #ara ea"orar os #ai"os( Con un %#i$ se di"u.an cuadrados de 33 cm
' se cortan con ti.era( A cada uno de estos cuadrados de #a#e se es da una forma de canuto!
,aciendo un ciindro +ue se u"icar% en e centro de #a#e de fitro! #or e agu.ero +ue se ,a
,ec,o anteriormente con e saca"ocados( E #ai"o ,ace a funci)n de a"sor"er e í+uido #ara
+ue se im#regne e fitro(
Se &an a usar 3 #ai"os #or cada muestra! uno #ara im#regnar #rimero e nitrato de #ata! ' e
segundo #ara im#regnar e fitro con a muestra de sueo(
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E.em#o de un fitro #re#arado #ara o"tener os #ai"os
Preparación del nitrato de plata
La #re#araci)n de nitrato de #ata se ,ace seg<n a cantidad de muestras +ue se deseen
re&ear( -ara 03 muestras es suficiente si se #esan 9!2 gramos de nitrato de #ata 6soido7 en un
reci#iente de &idrio ' se aaden 099 mL de agua destiada #ara o"tener una diuci)n de
9!2@( Recordar ue el nitrato de plata debe permanecer siempre en
oscuridad completa ya ue es altamente sensible a la lu! "y por este
motivo se usa para hacer el revelado#$ siempre hay ue %uardarlo
envuelto en papel de aluminio y en lu%ar oscuro& E nitrato de #ata soido dura
043 aos "a.o "uena conser&aci)n! #ero a .untaro con agua destiada ' &o&ero í+uido se
o=ida r%#idamente( -ara sa"er si e nitrato de #ata est% en ma estado! de"ido a e=ceso de u$
+ue o=ida e #roducto 6de a"riro re#etidamente #ara ea"orar as cromatografías7 de"e
o"ser&arse una #resencia agomerada ' con mac,as negras 6o=idado7! como #untitos negros(
Es recomenda"e ,acer a diuci)n necesaria de nitrato de #ata ' no guardaro 'a +ue dura u'
#oco tiem#o en í+uido 6entre una semana ' 09 días7(
'mpre%nación de los fltros con el nitrato de plata
Una &e$ #re#arado e nitrato de #ata a 9!2@! #oner un #oco en una #aca de -etri 6o un
#e+ueo reci#iente de &idrio7 e im#regnar e fitro a tra&és de un #ai"o ,asta a marca de cm(
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Cuando ega a esa marca! o retiramos ' sacamos e #ai"o con unas #in$as 6e #ai"o o
desec,amos7(
E fitro im#regnado de nitrato de #ata se #one en una ca.a +ue #ermita tota oscuridad 6+ue
+uede i"re de u$7! se recomienda una ca.a de #ore=#an( Lo #onemos entre un #oco de #a#e
de &%ter ,asta +ue se se+ue! ,a"ituamente 3 ,oras! aun+ue se #uede de.ar ,asta 8 ,oras( Esim#ortante #oner a secar os fitros im#regnados con nitrato de #ata en a ca.a! como mínimo!
3 ,oras antes de +ue transcurran as 2 ,oras de momento 2,! #ara #oder re&ear a muestra de
sueo una &e$ se ,a'a secado e nitro de #ata(
'mpre%nación de la muestra de suelo
Con una .eringuia se #onen 54 mL de muestra! de a #arte so"renadante! en una #aca de
-etri( Se #one un nue&o #ai"o en e fitro +ue ,emos sacado de a ca.a! im#regnado de nitrato
de #ata +ue 'a est% seco! ' se #one so"re a muestra! unos 39459 minutos! ,asta +ue a
im#reganci)n acance a marca de os 8 cm( A im#regnarse e fitro! este se #uede em#e$ar a
do"ar #or e #eso! #or o +ue se recomienda #oner una #aca de -etri 6o cua+uier otro
reci#iente +ue ofre$ca a misma souci)n7 m%s grande +ue mantenga en fitro sin do"arse(
E.em#o de a im#regnaci)n de a muestra de sueo en un fitro #re&iamente im#regnado de
nitrato de #ata
Cuanto m%s seco es e cima! m%s enta es a im#regnaci)n de fitro! de"ido a +ue en cimas,<medos os í+uidos corren m%s r%#ido a e&a#orarse menos(
Una &e$ a muestra acan$a a marca de 8 cm! se retira e fitro! se saca e #ai"o con unas #in$as
6e #ai"o se desec,a7 ' #rimero se de.a secar un #oco! se cuega con un tro$o de ceo en e
"orde de una mesa! o en ag<n ugar +ue no tenga contacto con e fitro a<n ,<medo( -asados
&arios minutos se ir% secando ' se em#e$ar% a re&ear(
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*magen i$+(; -acas de -etri! as #e+ueas dentro de as grandes(
*magen dc,a(; *m#regnaci)n de os fitros con as muestras de sueo! a tra&és de #ai"o
Revelado
-asados esos minutos! se #uede #egar en e crista de una &entana! donde a u$ soar sea
indirecta( La muestra se ir% re&eando con a u$ indirecta durante unos 84H días!momento en
&ue la cromato'ra.a estará lista para ser interpretada(
Si se de.a a muestra m%s tiem#o! esta seguir% re&e%ndose ' os coores ir%n &ariando! #or o
+ue #odemos entor#ecer a ectura( -ara #oder inter#retar de manera tran+uia a
cromatografía! se recomienda ,acer una fotografía indi&idua a cada cromatograma! desde amisma &entana donde se re&e) ' cuando ,a'a u$ indirecta a tra&és( Si se +uisieran mantener
os coores de manera #ersistente en e cromatograma! se de"ería sumergir en #arafina(
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Cromatogramas di&ersos re&eandose a u$ indirecta 6cara norte7
Con informaci)n de; AGROLOG*A4MAS?UMUS