Defectos en Células Fagocíticas y su Diagnóstico
JAIRO MUÑOZ CERÓN MD. Esp. MSc.Fundación Universitaria Sanitas
Facultad de Medicina
IDP
• Incidencia: 1/10,000 (2:1, ♂:♀)
• Distribución:
65%15%
5%10% 5%
Humorales
LT
Complemento
Fagocitos
Combinadas: LB LT
Fagocitos polimorfonucleares
• Producción, división y maduración en la médula
ósea (100.000 x 106 células por día)
• Circulación durante ~ 6-10 hs• Circulación durante ~ 6-10 hs
• Extravasación hacia los tejidos a través del endotelio
capilar
• Función efectora: Fagocitosis y lisis
• Deficiencias Cuantitativas
Neutropenia
Clasificación de los defectos en células fagocíticas
• Deficiencias Funcionales
Adhesión
Quimiotaxis
Fagocitosis
Microbicidas
Neutropenias
Neutropenia severa congénita: ELA2, R-GCSF,
RAS. RAN (<200/mm3).
• GFI1, HAX1 , Glucosa6PDH.• GFI1, HAX1 , Glucosa6PDH.
• Monocitosis
• Mcl-1(Antiapoptótica)
• Estrés RE.
Neutropenia cíclica
Anexina V
I. pr
opid
io
Neutropenias
10 10 10 10 100 1 2 3 4
8811.009
cMPO FITC ->
0 256 512 768 1024
8811.009
FSC-Height ->10 10 10 10 100 1 2 3 4
8811.009
CD45PECY5 ->
A
10 10 10 10 100 1 2 3 4
8911.015
CMPO FITC ->
10 10 10 10 100 1 2 3 4
8911.015
CD45 PECY5 ->
0 256 512 768 1024
8911.015
FSC-Height ->
B
Fagocitos polimorfonucleares
• Deficiencias Funcionales
Microbicidas
- Vía dependiente de O2: Enfermedad - Vía dependiente de O2: Enfermedad
granulomatosa crónica, deficiencia de
mieloperoxidasa, Glu-6-P dehidrogenasa, vía del
glutatión.
- Vía independiente de O2: Chediak-Higashi,
deficiencia de gránulos secundarios
Enfermedad granulomatosa Crónica (EGC)
• IDP, caracterizada por alteración NADPH Oxidasa e infecciones severas y recurrentes
(Dinauer et al., 1996).
• Prevalencia 1/200.000 a 1/250.000 RNV (Fleisher et al., 2009)
• Colombia ocupa el cuarto lugar en registro de casos a nivel latinoamericano (pacientes)
(Franco et al.,2009).
• Registro nacional de 18 pacientes con diagnostico de EGC (Franco et al.,2009)
• Diagnóstico por reducción de NBT y Citometría de flujo.
NADPH oxidasa
PKC
DAG o
PMA
PG
Modificado, Cell. Mol. Sci.2009;66: 553-558.
NADPH oxidasa
Especies reactivas del
oxígeno (EROs)
NADPHoxidasa
FuncionesDaño tisular
Presentación cruzada
Mutaciones en las subunidades de NADPH
Modificado, Semin Immunopathol. 2009; 30:209-235
Autosomal recessive CGD
<1%
NCF4 gene
123-Dihidrorodamina 123-Rodamina
C21H18N2O3
H202
C21H17ClN2O3
Análisis de la NADPH-oxidasa por la técnica de
123-Dihidrorodamina
Paciente 1
Sin estimulo PMA 1ug/ml
Control
IMF N: 1771
IMF M: 116
IMF N: 4.7
IMF M: 4.6
Paciente
Sin estimulo PMA 1ug/ml
.
IMF N: 4.7
IMF M: 4
N: Neutrófilos, M: Monocitos; IMF: Intensidad Media de Fluorescencia.
IMF N: 272
IMF M: 24
Disminución del estallido respiratorio en neutrófilos y monocitos del paciente con
respecto al control.
Paciente 2
Sin estimulo PMA 1ug/ml
Control
IMF N: 4.4
IMF M: 4.2
IMF N: 1489.7
IMF M: 64
IMF N: 12
Paciente
PMA 1ug/mlSin estimulo
Se observa una marcada disminución en el estallido respiratorio de neutrófilos y
monocitos del paciente.
IMF N: 4.0
IMF M: 3.9
IMF N: 12
IMF M: 10.5
N: Neutrófilos, M: Monocitos; IMF: Intensidad Media de Fluorescencia.
Madre del Paciente 2 (paciente 3)
En Rojo IMF Neutrófilos del
control: 1510
Subpoblación
celular
Paciente
IMF
Presencia de dos poblaciones de neutrófilos y monocito con diferente
IMF en la madre del paciente 2.
En Rojo IMF Monocitos del
control: 76.3
IMF
N1 1589.7
N2 26.6
M1 70.9
M2 13.3
Fagocitos polimorfonucleares
Gránulos de Chediak -Higashi
• Deficiencias Funcionales
Fagocitos polimorfonucleares
- Deficiencias de meléculas de adhesión
Deficiencia de Adhesión Leucocitaria Tipo 1
• 1980• 1 de cada 100.000 RNV• Glicoproteína 110kD• Autosómico recesivo• Autosómico recesivo• Infecciones por bacterias entéricas Gram negativas,
Staphylococcus aureus, Cándida.• Infecciones recurrentes en piel, TGI, Periodontales,
Cordón umbilical• Expresión de CD18 cuantificable.
DAL
Citometría de CD18
IMF N: 1397
IMF N: 19899
IMF N: 34932
Neutrófilos control Neutrófilos paciente
Paciente:
<10% de la
expresión de
CD18 del
control.
Citometría de CD18
CD18
control.
CD18
Paciente:
No incremento de
La expresión post
Activación.
DAL tipo 2
DAL
• Expresión anormal de
selectina E
• Deficiencia de Rac2:
Quimiotaxis,
Degranulación, NADPH
oxidasa.
• DAL 3
Otras Deficiencias Funcionales
Quimiotaxis
- Deficiencias de meléculas de adhesión, - Deficiencias de meléculas de adhesión,
periodontitis juvenil, deficiencia de β-actina,
quemaduras extensas, alcoholismo, Hiper IgE
Otras deficiencias funcionales
•Deficiencias Funcionales
Fagocitosis Fagocitosis
- Deficiencias de móléculas de adhesión
(mediado por Complemento), deficiencias de
anticuerpos, deficiencias de Complemento.
Deficiencia de NET ´s
Fagocitos mononucleares
• Células de estirpe mieloide producidas y maduradas en la médula ósea
• Circulan ~70 hs como monocitos, luego se extravasan hacia los tejidos transformándose en macrófagos tisulares
• Funciones: Fagocitosis y lisis, secreción de mediadores inflamatorios, presentación antigénica
MSMD
Citometría : IFNγ/IL-12/23
Detección de IL-12p40
Evaluación por citometría de flujo
CD64
IL-1
2p
40
LPS LPS+IFNγMONOCITOS
Síndrome MonoMac
Gracias……