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DESCRIPCIÓN SISTEMA DE MICROSCOPÍA-MICROFOTOGRAFÍA DIGITAL NIKON.

Microscopio de fases triocular modelo E200 Nikon, para técnicas de Campo claro, Contraste de fases y Campo oscuro. Cabezal triocular ergonómico y telescópico. Dotación apta para fases plan Fluor.

Sistema de Microfotografía Digital Nikon, modelo DS-5M-L1. Gobernada a través de monitor-controlador con sistema de captura Networking, compact-flash. Posibilidad de salida RGB a 2º monitor o retroproyector. Posibilidad de subprogramaciones para técnicas de campo claro, fases, DIC o epifluorescencia. Herramientas de trabajo de medida, calibración y otros.

IZASA, S.A. Contacto: Juan Antonio Díaz Molina (Móvil: 625 15 48 74) División Microscopía Óptica Grupo Instrumentación Científica Avda. de la Innovación, s/n Edificio Innova, 1ª planta 41020-Sevilla Tel. 902 20 30 80 Fax. 902 20 30 81

EJERCICIO INTERLABORATORIOS (Febrero 2008): Reportaje fotográfico

1

CARACTERÍSTICAS MACRO- Y MICROSCÓPICAS DEL FANGO ACTIVO

LÁMINA 1

■ ASPECTO GENERAL DE LA MUESTRA EN EL RECIPIENTE

C

Aspecto general de la muestra en el recipiente. El recipiente mostrado en la fotografía (de tapa de estrella) es igualmente válido que el frasco duquesa recomendado al inicio del circuito en cuanto a la conservación de la muestra. Sin embargo, por la doble tapa del frasco duquesa, su cierre es más seguro que el del frasco mostrado en la figura. Una vez más insistimos sobre la importancia de la disposición del recipiente en la nevera (necesariamente vertical), para que pueda ser recibida en las mejores condiciones de conservación y se eviten derrames durante el transporte.


2

■ EVOLUCIÓN DEL CLARIFICADO AL DÍA SIGUIENTE DE LA TOMA DE MUESTRA (13/2/08)

LÁMINA 2

Evaluación del clarificado de la muestra. Ensayo de sedimentabilidad en probeta y valoración del clarificado de la muestra durante el día de la toma de muestra (A) y al día siguiente o día del análisis (B). Prácticamente no existe variación macroscópica, salvo un leve aumento en el esponjamiento de la manta de fangos.

A

B

12/2/2008

13/2/2008


3

■ ENSAYO DE SEDIMENTABILIDAD EN PROBETA (13/2/08)

LÁMINA 3

Ensayo de la V30. A: Sedimentabilidad a los 5 minutos. B: Sedimentabilidad a los 20 minutos. C: V30. El ensayo muestra nivel de decantabilidad alta.

A B C


4

■ PROCESO DE DECANTACIÓN Y NIVEL DE TURBIDEZ (13/2/08)

LÁMINA 4

A: Macrofloculo < 0,5 cm. B: Alta turbidez al finalizar el ensayo de la V30. C: Alta turbidez. Detalle de la ausencia de visibilidad del objeto detrás de la probeta.

A B C


5

■ ESPUMAS EN SUPERFICIE (13/2/08)

LÁMINA 5

■ TEST DE VISCOSIDAD SOBRE LA MUESTRA DE FANGO ACTIVO

400x

Test de viscosidad con resultado positivo. En la figura se señala el sentido de avance de la tinta India. La probeta muestra la nube viscosa, tras 24 horas de decantación.

A: Capa cérea y presencia de burbujas. B: Grosor capa emulsionada.

A B


6

ESTRUCTURA FLOCULAR I

LÁMINA 6

A: Estructura media (100x). B: Textura fuerte (200x).C: Ausencia de núcleos floculares (200x). D: Surfactantes (100x). E: Abundante crecimiento disperso (100x). F: Microflóculos (100x).

A B

C D

E F


7

A, B: Flóculo con surfactantes procedente de la emulsión superficial de la V30 (100x)

A B

A: Forma irregular del flóculo (100x). B: Tamaño del flóculo medio/pequeño (500- 200 µm) (100x).

B A


8

Disgregación del fango activo: A y B: Crecimiento de MOF en los espacios interfloculares y abundante crecimiento disperso. 200X.

B GBS A GBS


9

ESTRUCTURA FLOCULAR II

LÁMINA 7

200x

Aspecto del fango activo (A-Tinción Azul de Metileno; B-C-Contraste de fases, 1000x). A: Agregados bacterianos en el entorno flocular, sin formar parte consistente de él, en formación mucilaginosa. B: Observación de Espiroquetas. 1000X C: Observación del fango a 1000x, la cual pone de manifiesto la importante diversidad bacteriana. Detalle de filamentos libres tipo Flexibacter, sin constricción y de la actividad del Azufre.

B A

C

GBS

GBS GBS


10

AGREGADOS BACTERIANOS DENTRO Y ALREDEDOR DEL FLÓCULO

LÁMINA 8

Agregados bacterianos fuera, dentro y alrededor del flóculo (A: In vivo 200x; B: Tinción Gram. 400X). Como se observa en estas imágenes, la presencia de bacterias tipo PAO libres en los espacios interfloculares ha sido muy importante en esta muestra. Ha sido normal visualizar morfología similar a bacterias acumuladoras de fosfato en los entornos floculares.

A: Candidatas P.A.O (1000x). B: Candidatas P.A.O. Tinción de polifosfatos, (1000x).

A B

B A GBS GBS


16

ORGANISMOS FILAMENTOSOS

ORGANISMOS FILAMENTOSOS EN VIVO (I)

LÁMINA 16

Filamentos In vivo: A: Galo, (1000x). B: Tipo 1701. Detalle vaina y perdida celular, (1000x). C: Galo (1000x). D: Tipo 021N, (1000x).

B

C D

A

GBS

GBS


17

ORGANISMOS FILAMENTOSOS EN VIVO (II) LÁMINA 17

A B

C D

E F

Filamentos In vivo: A: Haliscomenobacter hydrossis, (1000x) B Thiotrix sp. con fuerte reactiva al Azufre, (1000x). C: Tipo 1803, (1000x) D: Nostocoida limícola, (1000x). E: Tipo 1863 junto con Flexibacter. Destacar la numerosa aparición de morfotipos similares a Flexibacter sin constricción. , (1000x). F: Sphaerotilus natans, (1000x).

GBS GBS

GBS


18

ORGANISMOS FILAMENTOSOS EN VIVO (III) LÁMINA 18

A B

C D

Filamentos In vivo: A: Sphaerotilus natans. Detalle ramificaciones, (100x). B: Sphaerotilus natans. Detalle falsas ramificaciones, (400x). C: Sphaerotilus natans. Detalle constricciones y morfología celular, (1000x). D: Sphaerotilus natans. (400x). E: Microthrix parvicella, (400x). F: Nostocoida limícola, (1000x).

GBS

E F


19

ORGANISMOS FILAMENTOSOS EN VIVO (IV) LÁMINA 19

A B

C D

Filamentos In vivo: A: Tipo 0803 (1000x). B: Tipo 0914, (1000x). C: GALO. Detalle ramificaciones 90º, (1000x). D: GALO. Libre en el espacio interflocular, (1000x).E: Hongo (400x). F: Cianoficea (400x).

E F

GBS GBS


20

ORGANISMOS FILAMENTOSOS EN TINCIÓN (I)

LÁMINA 20

E F

A B

C D

Filamentos en tinción: A: Thiotrix sp. Tinción de Gran. Detalle coloración gránulos de Azufre. (1000x). B: GALO. Tinción de Gram positiva (1000x). C: GALO en tinción gránulos Neisser positiva (1000x). D: Sphaerotilus natans. Tinción de Gram negativa (1000x). E: Sphaerotilus natans. Tinción de Neisser negativa (1000x). F: Tipo 0092, Tinción de Neisser positiva, (1000x).

GBS


21

ORGANISMOS FILAMENTOSOS EN TINCIÓN (II)

LÁMINA 21

A B

Filamentos en Tinción: A: Nostocoida limícola. Tinción de Gram positiva, (1000x). B: Nostocoida limícola. Tinción de Neisser positiva, (1000x). C: Tipo 1701. Tinción de Gram, (1000x). D: Haliscomenobacter hydrossis. Tinción de Gram negativa, (1000x). E: Microthrix parvicella. Tinción de Gram positiva. (1000x). Detalle Tinción gránulos Neisser positiva, (1000x). F: Nostocoida limícola. Tinción de Neisser positiva, (1000x).

C D

E F


22

EMULSIÓN DE GALO

LÁMINA 22

Emulsión GALO: GALO. Muestra procedente de la emulsión, (1000x).

Es característico este tipo de formaciones en red de las GALO en formación de espumas.


23

FILAMENTO EN DISOLUCIÓN “Probablemente Flexibacter”

LÁMINA 23

A B

C

Filamento en disolución: A: Desconocida, (1000x). B: Desconocida. Tinción de Gram, (1000x).C: Desconocida, (1000x). D: Desconocida. Tinción de Gram, (1000x). E: Desconocida. Tinción Neisser negativa, (1000x). F: Desconocida. Tinción gránulos Neisser positiva, (1000x).

Sería necesario realizar análisis moleculares, para determinar este morfotipo en disolución, si bien la

coexistencia de morfología similar con y sin contracción, hace pensar que se trate de Flexibacter.

Las características de reactiva a tinciones, concuerdan parcialmente con Flexibacter, sin embargo, las

características asociadas a este filamento concuerdan con el estado de la muestra.

D

E F


9

PROTOZOOS Y METAZOOS

LÁMINA 9

CARNÍVOROS SÉSILES (SUCTORES)

Carnívoros sésil. Presente en la muestra a baja densidad.

GBS


10

LÁMINA 10

CILIADOS REPTANTES

Ciliados reptantes en la muestra. A-B: Acineria uncinata, ciliado bacterívoro. En B , detalle distintos orgánulos. C: Chilodonella sp

D: Aspidisca cicada de perfil.

A B

C D

400x 100x

100x 400x

GBS


11

LÁMINA 11

CILIADOS NADADORES

Ciliados nadadores. A-B: Uronema nigricans, con una densidad media en torno a 3-4 % de la población.

B A 100x 400x

GBS


12

LÁMINA 12

CILIADOS SÉSILES COLONIALES

A B

Ciliados sésiles coloniales. A Posiblemente Epistylis coronata (200x). B: Detalle.

1000400x


13

LÁMINA 13

CILIADOS SÉSILES SOLITARIOS

Clave de identificación simplificada del Género Vorticella1

◙ Complejo Vorticella aquadulcis

◙ Complejo Vorticella microstoma

1 Zornoza, A. (2005). Determinación de ciliados sésiles en estado de estrés. II Jornada Técnica sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 27 de Octubre de 2005. Asociación científica Grupo Bioindicación Sevilla.

Complejo Vorticella aquadulcis. Individuo del Complejo Vorticella aquadulcis en gemación. 400x, contraste de fases.

400x

Complejo Vorticella microstoma Individuo del Complejo Vorticella

microstoma.

Destaca la alta vacuolización y las

fuertes corrientes alimenticias.

200x

GBS


14

LÁMINA 14

Complejo Vorticella convallaria

Complejo Vorticella convallaria (400x, contraste de fases). Individuo del Complejo Vorticella convallaria.

Ha sido patente en la muestra la alta vacuolización de la mayoría de individuos del

genero Vorticella.

Este aspecto concuerda con los niveles de turbidez y crecimiento disperso estimados

por los participantes

GBS

400x


15

LÁMINA 15

PEQUEÑOS FLAGELADOS Y AMEBAS DESNUDAS

Pequeños flagelados A: Criptomonadidos (400x).

B: Amebas < 50 µm, (400x). C: Pequeños flagelados (400x). D: Bodo sp., (400x).

A B

C D

400x 400x

400x 400x


16

LÁMINA 16

METAZOOS

OTRAS OBSERVACIONES

Metazoos. Rotífero en proceso de contracción. (200x).

Otras observaciones. Resto de ameba testacea. Arcella sp., (400x).

400x

200x

Date post:	05-May-2020
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