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UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELAFACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE BIOANÁLISISHOSPTIAL GENERAL “Dr. JOSÉ IGNACIO BALDÓ“
Diagnóstico Micológico
Profa. Yotsabeth Saúl G.
Caracas - 2015
Diagnóstico Micológico• Recolección de muestras:
– Apropiadas.– Oportunas.– Representativas de la lesión.
• Transporte.• Procesamiento inicial:
– Estudio microscópico directo: • KOH 10% Y Tinta china.
– Preparaciones coloreadas:• Gram, Giemsa, Grocott, inmunofluorescencia.
• Aislamiento e identificación del agente causal.• Pruebas de susceptibilidad antifúngica.• Reporte de los resultados.
Fundamentos básicos para el diagnóstico micológico. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 3-1-3-22.
Diagnóstico MicológicoRecomendaciones para la recolección de muestras para estudio micológico:
• Recolectar las muestras asépticamente utilizando contenedores estériles.
• Remitirlas al laboratorio dentro de las primeras 2 horas de su recolección.
• Recolectar las muestras antes de instaurar el tratamiento .
• Evitar el uso de hisopos para la toma de muestras para estudio micológico.
• Las muestras de lesiones cerradas y abscesos deben ser aspiradas con jeringa y transferidas a un contenedor estéril.
• En situaciones que requieran un estudio epidemiológico, debe establecerse la necesidad de una recogida de muestras ambientales, familiares o de animales.
Fundamentos básicos para el diagnóstico micológico. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 3-1 - 3-22.
Micosis Superficiales
Micosis superficiales1. Dermatofitosis oTineas (Tiñas)
Tinea capitis no inflamatoria
Tinea faciei
Tinea corporisM. canis, T. rubrum
T. cruris por:
T. rubrum, E. floccosum
Tinea pedis interdigital. T. rubrum, T.
mentagrophytes, T. interdigitale
Tinea corporis
Subungueal, distal y lateral Blanca superficialDistrófica total
Agentes T. rubrum, E. floccosum, T. mentagrophytes
Micosis superficiales1. Dermatofitosis oTineas (Tiñas) Onicomicosis
Micosis superficiales1. Dermatofitosis o tiñas• Toma de muestra:
Raspado, depilación, cepillo, onicotomía.
• Examen directo: KOH 10% - 40%. Diagnóstico de enfermedad • Cultivo: Lactritmel, Sabouraud. T. Amb. Macroscópicas/ tubo o placa Microscópicas/cultivo en lámina Identificación del agente causal
Identificación de hongos dermatofitos. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 12-1 - 12-11.
Toma de Muestra:
pelos, piel ,uñas.
Hifas hialinas septadas.
Identificación de especie
Cultivos:
(placas/tubos)
Microcultivos
Examen Directo: Pelo Parasitado
Ataque Endotrix. T. tonsurans
Micosis superficiales1. Dermatofitosis oTineas (Tiñas)
Examen Directo (KOH 10%): Pelo parasitado
Tinea capitis
Micosis superficiales1. Dermatofitosis oTineas (Tiñas)
Examen directo (KOH 10%) Artroconidias
Micosis superficiales1. Dermatofitosis oTineas (Tiñas)
Micosis superficiales2. Pitiriasis versicolor
Diagnósticos diferenciales/Clínicos. Lámpara de Wood.
• Toma de muestra: Método de la cinta adhesiva. Escamas
• Examen directo: Acúmulos de levaduras e hifas. Diagnóstico de enfermedad
• Cultivo: Medios de cultivo enriquecidos con lípidos/ Saboraud+ aceite de oliva.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Micosis superficiales2. Pitiriasis versicolor
Toma de muestra:
método de la cinta adhesiva
Examen directo con Azul de metileno 0,05%:
Levaduras e hifas cortas gruesas de Malassezia spp.
Micosis superficiales2. Pitiriasis versicolor
Candidosis en el área del pañal
Onicomicosis por Candida
Candidosis de la cavidad oral: Muguet
Vaginitis por Cándida
Micosis superficiales3. Candidiasis mucocutánea
Toma de muestra:Examen directo/ KOH al 10%Cultivo: Sabouraud. Aislamiento
Identificación:Caracteristicas macroscópicas de crecimiento en
agar cromogénico.Bilis-agar/Clamidosporas. C. albicans, C.dubliniensisPruebas de asimilación y fermentación de azúcares.
Identificación de levaduras. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 11-1 – 11-20.
Micosis superficiales3. Candidiasis mucocutánea
Examen directo (KOH 10%)
Crecimiento en Sabouraud
Características de crecimiento en agar
cromogénico
Hidrólisis de la úrea
Asimilación de carbohidratos
(Auxonograma)
Bilis- agar, Clamidosporas
Micosis Subcutáneas
Micosis subcutáneas1. Cromoblastomicosis
• Toma de muestra:Escamocostras
• Examen directo: KOH 10% - 40%. Diagnóstico de enfermedad • Cultivo: Lactritmel, Sabouraud. T. Amb. Macroscópicas/ tubo o placa Microscópicas/cultivo en lámina Identificación del agente causal
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Micosis subcutáneas1. Cromoblastomicosis
Toma de Muestra:
escamocostras.
Cuerpos escleróticos.
Identificación de especie
Cultivos:
(placas/tubos)
Microcultivos
Forma cutánea fija Complejo cutáneo linfático
Micosis subcutáneas2. Esporotricosis
• Examen directo KOH 10% . Biopsia Forma levaduriforme
• Cultivo: Agar sabouraud, Temperatura Ambiente Forma Filamentosa
• Inmunodiagnostico: Esporotriquina, Pruebas Serologicas
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Micosis subcutáneas2. Esporotricosis
Examen directo de la muestra clínica
Cultivo de la muestra clínicaIdentificación del agente causal
Cultivo en tubo, T.Amb
Cultivo en lámina
Micosis subcutáneas2. Esporotricosis
Triada del micetoma:• Aumento de volumen y deformidad del miembro
afectado.• Presencia de fístulas.• Emisión de granos “ Formación in vivo de colonias
de los agentes causales”.
Micosis subcutáneas3. Micetoma
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Los granos son microcolonias compactas que constituyen una adaptación parasitaria del
hongo o bacteria.
MICETOMA
Granos: Negros, Claros, Rojos
Micosis subcutáneas3. Micetoma
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Micosis subcutáneas3. Micetoma
• Examen directo KOH10% Biopsia coloracion H&E Presencia de granos
• Cultivo: Medios especiales para hongos y bacterias
Identificacion del agente causal
• Exámenes complementarios Radiologicos
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Micosis Profundas o Sistémicas
HISTOPLASMOSIS DIAGNÓSTICO
Micosis Profundas o Sistémicas1. Histoplasmosis:
• Muestra clínica: Esputo, lavado broncoalveolar, médula ósea, biopsias de tejidos.
• Examen directo: Coloración de Giemsa Levaduras intracelulares
• Cultivo (25 °C) Sabouraud agar, Lactritmel, BHI Micelio y macroconidias tuberculadas
• Inmunodiagnóstico: Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
HISTOPLASMOSIS DIAGNÓSTICO
Micosis Profundas o Sistémicas1. Histoplasmosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Examen directo:Levaduras intracelulares
Coloración,Giemsa
Cultivo 24ºCMicelio y macroconidias
Coloración, azul de lactofenol
Micosis Profundas o Sistémicas1. Histoplasmosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Micosis Profundas o Sistémicas2. Coccidioidomicosis
• Muestra clínica: Esputo, lavado broncoalveolar, biopsias de tejidos, líquidos corporales (LCR)
• Examen directo: KOH AL 10%, Coloraciones histológicas ( H&E, PAS, plata-metenamina) • Cultivo (25 ºC) Sabouraud agar, Lactritmel • Inmunodiagnóstico: Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
COCCIDIOIDOMICOSIS: DIAGNÓSTICO
Micosis Profundas o Sistémicas2. Coccidioidomicosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Coccidiodes spp. Examen directo
37ºCEsférula con endosporas
Cultivo a 25°CMoho: Micelio septadoArtroconidias alternadas Células degenerativas yVacías
Micosis Profundas o Sistémicas3. Paracoccidioidomicosis
DIAGNÓSTICO
• Muestras: Esputo, lavado broncoalveolar, exudado de úlceras en mucosas y en piel, material purulento de nódulos linfáticos, biopsias, LCR, orina.
• Directo KOH 10%: Blastoconidias multigemantes “Timón de Barco”.
• Cultivo: Sabouraud Dimorfismo (temp. amb. y 37 oC)
• Estudio histopatológico: H&E, PAS, Grocott
• Inmunodiagnóstico: Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
Micosis Profundas o Sistémicas3. Paracoccidioidomicosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Cultivo:
Temp. Amb.
37 oC
Examen directo:Levaduras multigemantes
Estudio Histopatológico
Micosis Oportunistas
Micosis Oportunistas1. Candidiasis invasoras
Micosis Oportunistas1. Candidiasis invasoras• Muestra: secreciones vaginales, esputo, sedimento urinario,
biopsia, depende de la presentación clínica de la enfermedad.
• Directo: KOH 10%, Si presenta pocas levaduras hay colonización, grandes cantidades de levaduras y presencia de hifas indica parasitismo-enfermedad.
• Identificación: Caracteristicas macroscópicas de crecimiento en agar
cromogénico. Bilis-agar/Clamidosporas. C. albicans, C.dubliniensis Pruebas de asimilación y fermentación de azúcares.
• Estudio inmunológico: Detección de antígenos en candidosis invasora Candidina.
Micosis Oportunistas2. Criptococosis
Criptococosis, Diagnóstico
• Muestra: LCR, secreción respiratoria, piel, orina, etc.
• Directo: (tinta china), biopsia (PAS, Grocott).
• Cultivo: agar Sabouraud, hemocultivo.
• Inmunodiagnóstico: Detección de antígeno capsular, técnica
aglutinación de partículas de latex (LCR)
Micosis Oportunistas2. Criptococosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Criptococosis, DiagnósticoMicosis Oportunistas2. Criptococosis
Micosis Oportunistas3. Zigomicosis
Mucormicosis, diagnóstico
• Muestra: según localización de la lesión.
• Histopatología: el diagnóstico definitivo lo da el estudio histológico de biopsia coloreada con H&E, o con tinción de Gomori-Grocott, que evidencia filamentos no septados de diámetro variable y paredes delgadas. INVASIVO
• Directo y cultivo: tienen poca validez, sólo sugieren un diagnóstico presuntivo, ya que los mucorales son los más frecuentes contaminantes de laboratorios.
• Inmunología: No estandarizada.
Micosis Oportunistas3. Zigomicosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Histopatología Cultivo en placa
Cultivo en lámina
Micosis Oportunistas4. Aspergilosis
Aspergilosis, diagnóstico:
• Muestra: esputo, secreciones. biopsia, • Directo: KOH 10%.
• Cultivo: agar Sabouraud
• Inmunodiagnóstico: detección de antígenos polisacárido de pared de Aspergillus (galactomanano), con una especificidad de 85%, pero poco sensible (40%). Técnica: aglutinación por látex.
Micosis Oportunistas4. Aspergilosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Micosis Oportunistas4. Aspergilosis
Histopatología Examen directo KOH 10/. Esputo
Cultivo en placa Cultivo en lámina. A. fumigatus
AspergilosisDiagnóstico: cultivo en placa y lámina
Muestra: esputo• Esputo inducido, lavado bronquio-alveolar,• Biopsia abierta de pulmónColoraciones:Giemsa, azul de toluidina, Gomori-Groccot
Inmunofluorencia: calcofluorHerramientas moleculares:PCR. Ampliación de ADN
Micosis Oportunistas5. Pneumocistosis
Pneumocystis jirovecii
Col. Gomori-Groccot Metenamina nitrato de plata,
Gracias por su atención