Date post: | 25-Jan-2016 |
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INTRODUCCIÓN-CUESTIONARIO
FUNDAMENTOS DE LAS PRUEBAS DE DIGESTION
Hidrólisis de Gelatina
PRINCIPIO:Determinar la capacidad de un microorganismo de producir enzimas de tipo proteolítico que licuan/hidrolizan la gelatina.
ENZIMA GELATINASAS
La gelatina es una proteína que tiene la capacidad de gelificar, cuando es hidrolizada por la gelatinasa en los aminoácidos que la componen, pierde su característica de gelificar.
Proteína Aminoácidos Individuales Gelatinasas
Determinar la capacidad de un microorganismo de hidrolizar el almidón. Probar la desaparición del almidón con el uso de un reactivo con yodo.Estructura básica del almidón: amilosa (lineal), amilopectina (ramificada)
α -amilasa: Enzima que hidroliza los enlaces α(1-4) de polímeros de glucosa.
Hidrólisis del Almidón
Agar Almidón Sustrato: Almidón (polímero de glucosa). Enzima: Amilasa (exoenzima). Producto: Glucosa. Revelador: Lugol.Almidón Dextrinas Maltosa Glucosa
Las proteasas son excretadas al medio para la degradación de proteínas, la caseína es la proteína de la leche que le confiere el color blanco. cuando la caseína es hidrolizada desaparece el color blanco alrededor del crecimiento microbiano
Digestión de Caseína
Enzimas proteolíticas (caseasas) hidrolizan proteínas de la leche.Agar Leche Descremada Sustrato: Caseína (proteína). Enzima: Caseinasa (Proteasa, exoenzima). Producto: Aminoácidos. Revelador: No requiere.
Hidrólisis de FosfolípidosLos fosfolípidos son ésteres complejos de alcohol, ácido graso, ácido fosfórico y una base nitrogenada.Las fosfolipasas son enzimas catabolicas importantes en el metabolismo de los fosfolípidos que se producen constitutivamente.
● Nutritivo, proceso infeccioso*Fosfolipasa A
Fosfolípidos lisofosfolípidos y ácidos grasos*Fosfolipasa C: Fosfatidil colina Fosforilcolina y diglicérido
Composición:● Triptona, extracto de carne, extracto de levadura,
glicina, piruvato de sodio, cloruro de litio, telurito de potasio.
Interpretación:❖ Prueba positiva: Formación de un halo
transparente alrededor de la colonia.
Medio de cultivo agar yema de huevo
Prueba Positiva Prueba negativa
Composición:Infusión de corazón de ternera, triptosa, cloruro de sodio❖ Prueba positiva: Se visualiza una zona
amarillenta➔ opaca➔ traslúcida
hidrólisis de fosfolípidos de la membrana celular de los eritrocitos.
Medio de cultivo agar sangre
hemólisis parcial
Halo opaco amarillento
enlaces éster fosfato con acumulacion extracelular de digliceridos
hemólisis total
halo transparente
Enlaces éster y utilizacion de acidos grasos
sin hemólisis
sin halo no empleo de los fosfolípidos membranales de los eritrocitos
Interpretación:
Digestion de proteinas y fermentacion de la leche tornasolada
Accion sobre la leche tornasolada
INFORME
RESULTADOS: Hidrólisis de gelatina en tubo
Microorganismo
Crecimiento1 Hidrólisis2
48h 72h 48h 72h
Escherichia coli - -
Bacillus subtilis - -
Pseudomonas aeruginosa
+ -
Salmonella typhi - -
Proteus vulgaris +
Klebsiella pneumoniae
- -
Shigella flexneri + -
Staphylococcus aureus
+ -
No hubo crecimiento en gelatina en tubo.
Teoría: Desarrollo sin licuefacción
Posiblemente debido a la concentración de gelatina.
Escherichia coli.Hidrólisis de Gelatina
Bacillus subtilis. Hidrólisis de gelatina en tubo
Prueba resultó un 50 % positiva
Teórica: positiva
Sin desarrolloTeoría:Desarrollo y licuefacción
Proteus vulgaris
Hidrólisis gelatina
P. vulgaris
Prueba: Negativa
Teórica: Positiva
Staphylococcus Aureus.
S. aureus
Prueba: negativa
Teorica: Negativa
Klebsiella pneumoniae
K. pneumoniae
Microorganismo Crecimiento1 Hidrólisis2
Escherichia coli + -
Bacillus subtilis + +
Pseudomonas aeruginosa
+ +
Salmonella typhi + -
Proteus vulgaris + -
Klebsiella pneumoniae + -
Shigella flexneri + -
Staphylococcus aureus
+ +
HIDRÓLISIS DE GELATINA EN PLACA
Prueba negativa formación de p.p. blanco.
Proteus vulgaris
Hidrólisis de Gelatina en Placa
Prueba negativa: formó precipitado blanco.
Escherichia coliHidrólisis de Gelatina en Placa
E. Coli
Prueba 100% positiva
Teórica: positiva
Bacillus subtilis. Hidrólisis de fosfolípidos: yema de huevo
Prueba negativa.
Teoría: Prueba positiva
Proteus vulgaris
Hidrólisis Fosfólipidos: Yema de huevo
Staphylococcus Aureus.
Hemólisis tipo α: Halo opaco, hidrólisis de los enlaces éster fosfato.
Escherichia coli.Hidrólisis Fosfólipidos: Agar sangre
E. Coli
Prueba 75% hemolisis β y 25% hemolisis α
Teórica: hemolisis β
Bacillus subtilis.Hidrolisis de fosfolipidos: agar sangre
Bacillus subtilis
Hemólisis Ɣ: Ausencia de halo,no utilización de eritrocitos membranales.
Proteus vulgaris
Hidrólisis Fosfólipidos: Gelosa Sangre
Prueba negativa:no hay presencia de halos de hidrólisis.
Escherichia coliDigestión de la Caseína en placa
E. Coli
AcidificaciónCoagulaciónReducciónTeoría:
Escherichia coliLeche Tornasolada
E. Coli
Prueba positiva.Teoría: prueba positiva
Proteus vulgaris
Hidrólisis de Caseína
Prueba 100% positiva
Teórica: positiva
Bacillus subtilis.Digestión de caseína
Bacillus subtilis
Alcalinización.
Proteus vulgaris
Leche Tornasolada
Proteus vulgaris
Prueba ❖ reduccion❖ licuefaccion❖ alcalinizacion
Bacillus subtilisDigestión de proteinas y fermentacion de leche tornasolada
Bacillus subtilis