Date post: | 03-Jul-2015 |
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EVIDENCIAS FOTOGRAFICAS.Laboratorio de caracterización de
proteínas en la sangre.
IVY ALEXANDRA CASTILLO.
ERIKA NATALIA MONTENEGRO.
NUBIA MARGARITA SUAREZ .
KATHERIN SANCHEZ.
UNIVERSIDAD COOPERATIVA SEDE VILLAVICENCIO.
FACULTAD DE MEDICINA.
2014.
PROCEDIMIENTOS.
• Se tomo 1 mL de solución de gelatina sin sabor y se
adiciono 1 mL de NaOH al 10% y luego se agrego reactivo
de Biuret hasta que tomo una coloración violeta.
• Se obtuvo una muestra de sangre de uno de los integrantes
del grupo, se llevo a centrifugado por 10 minutos para
separar el plasma y los componentes celulares.
Se separo el plasma de
los componentes
celulares y se adiciono
cada uno en un tubo de
centrifugado.
• Se tomo 1 mL de componentes celulares y se pusieron en un
tubo de centrifuga, posteriormente se le adiciono 9 mL de
agua destilada.
• Se tomo 2 tubos de centrifuga, n uno se adiciono 5 mL de plasma y en l
otro 5 mL de solución de hemoglobina y a cada uno se adiciono
porciones pequeñas de 0.88 gr de sulfato de amonio. Esto correspondió
a un 30% de saturación.
Luego de centrifugar se saco el sobrenadante y se puso en otro tubo de
centrifuga y se añadió 1.48 gr de sulfato de amonio, correspondiente a
70% de saturación.
• Luego se juntaron el 30% y 70% de la saturación y se les
adiciono agua destilada a cada uno de los dos tubos (uno
componentes celulares y el otro componentes del plasma)
Luego se mezclo los componentes celulares y el plasma y logramos
obtener nuevamente nuestra sangre casi en su misma consistencia.
• se tomaron 2 mL de plasma y 2 de componentes celulares y
se llevo cada uno a un tubo de centrifuga, se adiciono 0.5 ml
de acido tricloroacetico a cada tubo, se mezclo y se llevo a
centrifugar.
Al agregar agua destilada
e intentar mezclar nos
dimos cuenta estas
sufrieron una disrupción
de su estructura nativa
(desnaturalización).
CONCLUSIONES.
La reacción de Biuret nos sirve para encontrar
enlaces peptídicos, por tanto, proteínas.
En el proceso de salting out se da una
insolubilización reversible de las proteínas pero
estas no sufren una desnaturalización, por este
hecho, la estructura puede volver a formarse casi
con las mismas características como sucedió con
la sangre.
Las proteínas sufren desnaturalización ante
cambios de temperatura, pH como sucedió al
adicionar acido tricloroacetico a las proteínas, la
estructura al querer unirla no fue igual.