INTRODUCCIN

La fagocitosis es un proceso en el que se interiorizan partculas grandes (mayores a 0.5 micras de dimetro) que depende del citoesqueleto. Un fagocito usa varios receptores de superficie para unirse a un microorganismo y extiende proyecciones membranosas en forma de copa a su alrededor. (Abbas. 2008)

La fagocitosis es iniciada por la adhesin del antgeno a la membrana celular del macrfago. Los antgenos complejos, como clulas bacterianas completas o partculas virales, tienden a adherirse bien y se fagocitan con facilidad. La adhesin induce salientes de la membrana, llamadas seudpodos, que se extiende alrededor del material fijado. La fusin de los seudpodos encierra el material dentro de una estructura limitada por una membrana conocida como fagosoma, que a continuacin ingresa a la va endoctica de procesamiento. (Kuby. 2007)

En esta va, un fagosoma se mueve hacia el interior de la clula, en donde se fusiona con un lisosoma para formar un fagolisosoma. Los lisosomas contienen una variedad de enzimas hidrolticas que digieren el material fagocitado. Despus se elimina el contenido digerido del fagolisosoma mediante un proceso llamado exocitosis. (Kuby. 2007)

Los macrfagos y los neutrfilos activados convierten el oxgeno molecular en intermediarios reactivos del oxgeno, que son sustancias oxidantes muy reactivas que destruyen los microorganismos. El principal sistema generador de especies libres de oxgeno es el sistema de la oxidasa del fagocito. Esta oxidasa es una enzima con mltiples subunidades que se ensambla principalmente en la membrana fagolisosmica de los fagocitos activados. La oxidasa del fagocito se induce y activa por numerosos estmulos, como el IFN- y seales procedentes de los RTT. (Abbas. 2008)

La funcin de esta enzima consiste en reducir el oxgeno molecular en especies libres de oxgeno, como los radicales de superxido, de manera que la forma reducida de (NADHP) acta como cofactor. Tras todas esas reacciones, el ltimo paso de la fagocitosis, es la eliminacin del contenido digerido del fagolisosoma mediante un proceso llamado exocitosis. (Abbas. 2008)

La membrana del macrfago tiene receptores para ciertas clases de anticuerpos. Si un antgeno est recubierto con el anticuerpo apropiado, el complejo de antgeno y anticuerpo se une con mayor facilidad a los receptores de anticuerpo en la membrana del macrfago que un antgeno solo y mejora la fagocitosis. (Kuby. 2007)

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Instituto Politcnico Nacional Escuela Superior de Medicina

Laboratorio de Inmunologa MdicaReporte de Prctica 2

Equipo 1

4CM5

Barberena Martnez Elba Grissell Len Leal Carlos Enrique Len Valle Anne Samilet

Rodriguez DCid Roberto Carlos Ruiz Hurtado Luis Alfredo

Profra. Ma. Margarita Perez Garcia

Por consiguiente, el anticuerpo acta como una opsonina, una molcula que se une al antgeno y el macrfago e incrementa la fagocitosis. El proceso por el cual las opsoninas hacen a los antgenos particulados ms susceptibles a la fagocitosis se denomina opsonizacin. (Kuby. 2007)

OBJETIVOS:

1. Diferenciar la fagocitosis entre un microorganismo opsonizado y no opsonizado.

2. Comprender el fundamento de la prueba de reduccin del nitroazul de tetrazolio.

3. Inferir las consecuencias de las alteraciones en la fagocitosis.

4. Observar macrfagos pulmonares en un proceso infeccioso crnico.

RESULTADOS Y DISCUSIN:

Preparaciones de fagocitos con levaduras opsonizadas y no opsonizadas teidas con NTB.

2En esta imagen solo se pueden identificar c l u l a s f a g o c t i c a s c o m o s o n l o s macrfagos.

MACROFAGOS

OBJETIVO: 40 X

Macrfagos

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MUESTRA DE MACRFAGO NO OPSONIZADOS. SEGUNDA IMAGEN VISTA CON ZOOM DE CMARA.

OBJETIVO: 40X

Levadura

Reduccin de NTB

Macrfagos con l e v a d u r a s endocitadas.

Macrfagos

De igual manera en esta preparacin observaremos macrfagos opsonizados con levaduras fagocitadas y de color morado se muestra el estallido respiratorio la reduccin de NTB.

La diferencia en esta muestra es que al ser opsonizados los macrfagos tienen mayor captacin para fagocitar las levaduras.

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MUESTRA DE MACRFAGOS OPSONIZADOS

TINCIN: NTB

OBJETIVO: 40X

Leucocitos Humanos con NBT

"

En este podemos observar el estallido respiratorio donde las partculas azules que se ven sealadas son las que se redujeron, antes coloradas de un amarillo transparente. Buscamos evaluar la capacidad oxidativa mediante la produccin del superxido por medio del sistema enzimtico NADPH oxidasa que es el que permite crear las especies reactivas del oxgeno, por medio del estallido respiratorio.

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MUESTRA DE LEUCOCITOS HUMANOS CON REDUCCIN DE NITROAZUL DE TETRAZOLIO.

TINCIN: HE

OBJETIVO: 40X

Leucocitos con Estallido Respiratorio

Macrfagos

"

En esta laminilla se lograron ver solo unos pocos macrfagos NBT positivos, lo que nos lleva a valorar la funcin fagoctica de los macrfagos que puede estar relacionada con defectos en la adherencia, reconocimiento, ingestin, etc. del material fagocitado.

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MUESTRA DE MACRFAGOS CON REDUCCIN DE NITROAZUL DE TETRAZOLIO.

TINCIN: NBT

OBJETIVO: 40X

Macrfagos que han fagocitado el NTB

Macrfagos alveolares con EPOC

"

En el EPOC hay una inflamacin debido a la inhalacin de partculas, por eso se ve la presencia de bastantes macrfagos, se dice que se desencadena una respuesta inmunolgica e inflamatoria. El nmero de macrfagos en el EPOC es 10 veces mayor en vas areas y parnquima relacionado con la gravedad del padecimiento.

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MUESTRA DE MACRFAGOS ALVEOLARES CON ENFERMEDAD OBSTRUCTIVA CRNICA.

TINCIN: HE

OBJETIVO: 40X

Macrfagos alveolares

Resultados:

DISCUSIN DE RESULTADOS:

En base a los resultados obtenidos en el conteo de las clulas nos damos cuenta que el al ser opsonizadas existe un mayor nmero de captacin de levaduras o agentes extraos, por lo que la respuesta inmunitaria e inflamatoria es de ms rapidez que las que no estn opsonizadas. En cuanto a las clulas fagocticas y reductoras de NBT evaluamos que los leucocitos con NBT es mayor su capacidad oxidativa que la de los macrfagos con NBT.

CONCLUSIN:

Al observar los cortes histolgicos en el microscopio pudimos evidenciar el estallido respiratorio que realizan los fagocitos para conseguir la degradacin de la estructura que ha sido fagocitada. Este proceso permite, en la mayora de los casos, que agentes patgenos no prosperen en nuestro organismo. Tambin fue posible observar la estructura de fagocitos, especficamente la de los macrfagos alveolares; cuya estructura est adaptada para que pueda cumplir con la funcin designada que es la fagocitosis ya que cuenta con muchos lisosomas los cuales contienen las enzimas requeridas para degradar al agente que fue endocitado.

Con las bases tericas que se proporcionaron en clase y la observacin en laboratorio conseguimos relacionar esta serie de eventos que se dan a nivel

CELULAS FAGOCITICAS (Macrfago)

No. De clulas totales

contadas

NO. De clulas con levaduras endocitadas

% NO.de clulas con reduccin

de NTB

%

NO OPSONIZADAS

25 10 40% 3 12%

OPSONIZADAS 25 19 76% 7 28%

MACRFAGOS NBT

25 10 40% 2 8%

LEUCOCITOS HUMANOS CON

NBT

25 18 72% 8 32%

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celular en los tejidos para as poder integrarlo en el contexto de una reaccin inflamatoria consecuencia de la respuesta inmunitaria montada contra algn antgeno. Estos procesos deben ser estudiados y comprendidos puesto que son parte de la respuesta inmunitaria, y servirn como base para el entendimiento de otros procesos que se realizan simultneamente con la finalidad de proteger nuestro organismo.

CUESTIONARIO:

1.

Cuantificacin de IgE

Prueba para medir bacterilisis in vitro

Tamiz metablico

Reduccin de DHR

2. Lesiones cutneas y alrededor de la nariz y orejas se infectan fcilmente y aumentan de tamao los ganglios regionales, se forman granulomas que vacan su contenido purulento en el exterior.

Hepatomegalia

Aumento de VSG

Osteomielitis

Infecciones pulmonares

3. Neutrfilos y macrfagos. Se acumulan los polimorfonucleares en el sitio de infeccin. Comienzan con una adherencia al endotelio y migracin al sitio de infeccin, adherencia del mismo por la membrana celular y englobamiento, fusin de lisosomas con una vacuola fagoctica y posterior degranulacin y estallido respiratorio.

4. Linfocitos T, y macrfagos.

5. Proceso por el cual se marca un patgeno para su ingestin u destruccin por fagocitos.

C3b

C5b

IgG1

IgG3

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REFERENCIA:

Abbas A, Lichtman A, Stranford S. Inmunologa Celular y Molecular 6 Edicin. Espaa. Editorial Elsevier Saunders. 2008. 285pp.

Kindt J, Inmunologa de Kuby. 6 Edicin. Mxico. Editorial McGraw Hill. 2007. 36, 337 pp.

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