HEMOGLOBINURIA PAROXÍSTICA NOCTURNA: Diagnóstico por Citometría de Flujo AUTORES: Miguel Ángel Castilla Reyes** Ángel Lara Bohórquez** Miguel Medina Alonso** María Cinta pavón López ** Antonio Amián Martínez *
** Diplomados de Enfermería del Servicio de Hematología del Hospital Juan Ramón Jiménez de Huelva * Hematólogo Adjunto del Servicio de Hematología del Hospital Juan Ramón Jiménez de Huelva
Hemoglobinuria Paroxística Nocturna
• Anemia Hemolítica crónica intravascular
• Mutación del gen fosfatidil-inositol-glucano A
• Es una enfermedad rara y grave
OBJETIVO
La Citometría de Flujo:
• Ejecución Rápida y fácil
• Económica • Mayor sensibilidad y especificidad frente a otros test
RECURSOS MATERIALES
• Citómetro Navios de Beckman CoulterR
• Anticuerpos monoclonales para serie roja: CD55, CD59, CD235, CD45
• Anticuerpos monoclonales para leucocitos: Serie Granulocítica ( CD16, CD55, CD59,CD45) Serie Monocítica (CD14, CD45,CD64)
• Muestra de sangre periférica anticoagulada con EDTA
• Solución de lavado (PBS) y Lisis (VERSALYSE)
RESULTADOS•Los resultados se basan en la negatividad o disminución de fluorescencia de la prueba:
1. Eritrocitos : CD55, CD59
Población
eritroide
2. Monocitos : CD24, CD64
Población monocítica
3. Granulocitos: CD16, CD64
Marcador CD16 paraPoblación leucocitaria
Población leucocitaria
Marcador CD59 para Población leucitaria
CONCLUSIONES
• Citometría de Flujo es una herramienta mas en el apoyo de búsqueda del diagnóstico
• Mayor sensibilidad y especificidad frente al resto de test
• Detecta y cuantifica pequeños clones de células HPN
• No interfiere que el paciente haya sido transfudido
GRACIAS