Date post: | 16-Apr-2017 |
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Health & Medicine |
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INMUNODIFUSION RADIAL
GRACE VANESSA PAJARO ROSANIA
ANGIE PAOLA SANDOVAL CIFUENTE
MARIA JOSE VIERA CONTRERAS
ANTECEDENTES
REACCIÓN ANTIGENO – ANTICUERPO (Ag-Ac)
TIPOS DE INTERACCIONES
Entre más se complementan las configuraciones moleculares, más uniones secundarias se forman entre el antígeno y el anticuerpo y por lo tanto, es más difícil que el complejo sea alterado por fuerzas tales como la agitación térmica.
Es una unión molecular entre el epitope (antígeno) y la región hipervariable del anticuerpo, mediante interacciones no covalentes o secundarias
PUENTES DE HIDROGENO
FUERZAS IONICAS
FUERZAS DE VAN DER WAALS
HIDROFOBICAS
TIPOS DE REACCIONE
S
En la unión Ag – Ac ocurre en dos reacciones las cuales son utilizadas principalmente en las pruebas serológicas
FORMACION DEL COMPLEJO Ag-Ac
EVIDENCIA DE ESOS COMPLEJOS
MEDIANTE LA OBSERVACION DE
UN FENOMENO
FACTORES QUE AFECTAN LA
FORMACION DE INMUNOCOMPL
EJOS
TEMPERATURA
pH
FUERZA IONICA
Características propias del Ac como la afinidad, la avidez y la concentración relativa de éstos en el medio
INMUNODIFUSION
Es una técnica que puede determinar cuantitativamente la concentración de un antígeno. Es una técnica sensible que es usada clínicamente para detectar niveles de proteínas plasmáticas o de anticuerpos como IgG, IgM e IgA que hay en el suero de un individuo y también para determinar fracciones de C3 y C4 del complemento, entre otras.
RADIAL DOBLE
INMUNODIFUSION RADIAL
los procedimientos basados en esta técnica son los más sencillos entre los actualmente utilizados y su límite de detección es inferior a 100 mg/L.
1965 INTRODUCIDO POR MANCINI
Empleaba la difusión única para la medición de concentración de antígenos
FUNDAMENTO DEL
METODO
• Existencia de una relación cuantitativa entre la concentración de Ag colocado en un pocillo excavado en una placa de agar, que contiene el anticuerpo correspondiente, y el halo de precipitación resultante.
• Requiere de 48 a 72 horas de difusión.
La especificidad de la reacción dependerá de la calidad y de
la mono especificidad del antisuero utilizado en el gel. • Desde el comienzo de la
difusión del antígeno se va formando complejo Ag-Ac y transcurrido el tiempo suficiente se alcanza el punto final de difusión que se denomina zona de equivalencia.
PROCEDIMIENTO PRUEBA
DE INMUNODIFUSION RADIAL
.
Se trata de una reacción in vitro.
El agar noble es el gel utilizado para este cultivo, generalmente este se prepara en cajas de PETRI de 100x15mm.
La colocación de los controles varia en lugar y numero de acuerdo a la enfermedad estudiada
Las cajas de Petri con las muestras se incuban a 30°c en cámara húmeda, la lectura inicial de la prueba se efectúa a las 24h y la lectura final a las 48h
El área del anillo de la precipitación, medida por el cuadrado del diámetro del anillo, es proporcional a la [ ] del Ag.
INCOVENIENTES DE LA
INMUNODIFUSION RADIAL. Es necesario que las concentraciones de Ag y Ac sean similares.
Las moléculas más pequeñas migran con más rapidez que las de gran tamaño y conforme la migración continúa el precipitado puede re disolverse y volverse a formar de acuerdo con los cambios de concentración de Ag o Ac en el gel.
Si hay grandes cantidades de Ac, el antígeno no se difunde muy lejos antes de alcanzar la equivalencia y el anillo es más grueso o espeso.
ALTERACIÓN EN LA
CONCENTRACIÓN DE ALGUNAS PROTEÍNAS
SÉRICAS Y SU RELACIÓN CON
ALGUNA PATOLOGÍA.
IgA
IgM
IgG
IgE
cirrosis, infecciones crónicas, mieloma, fiebre, síndrome de inmunodeficiencia adquirida, hígado graso, inflamación
hepatitis aguda, infecciones aguda, mieloma
enfermedades infecciosas crónicas, mieloma, mononucleosis infecciosa, Kala-azar
tumores, bronquitis, dermatitis atópica La cuantificación de IgE requiere de métodos de mayor sensibilidad debido a
su baja concentración
GRACIAS POR SU
ATENCION