INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
2 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
DIRECTOR IITCUP: TCNL. DEAP. RUBÉN P. GEMIO BUSTILLOS, UNIPOL EDITOR: LIC. ESP. RUDDY LUNA BARRÓN, DIC, UNIPOL
COMITÉ REVISOR: CNL. DESP. GARY GONZALO OMONTE VERA, P. B.
PhD. DRA. MARÍA TERESA ÁLVAREZ ALIAGA, UMSA
DR. GONZÁLO TABOADA LÓPEZ, UMSA
DR. BERNARDO TORRICO ARZADY, UMSA
DRA. BEATRIZ LUNA BARRÓN, UMSA
DRA. JACQUELINE CORTEZ G., UMSA
DERECHOS RESERVADOS IITCUP © 2014
IITCUP
CIENCIA® PUBLICACIÓN CIENTÍFICA DE LA POLICÍA BOLIVIANA
No2 DICIEMBRE 2014
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 3
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ÍNDICE
PRESENTACIÓN ________________________________________________________ 4
LA COOPERACIÓN INTERNACIONAL EN LA EDUCACIÓN POLICIAL ______ 5
LA CRIMINALIDAD EN LA VÍA __________________________________________ 7
DESARROLLO TECNOLÓGICO EN ANAPOL ¿ES POSIBLE? ________________ 10
CRIMINALÍSTICA
EFICIENCIA DEL ENSAYO DE QUIMIOLUMINISCENCIA (LUMINOL) ENTRE
DIFERENTES SOPORTES Y TRATAMIENTOS ________________________ 11
COMPARACIÓN DE LA TÉCNICA DEL “ÁRBOL DE NAVIDAD” ENTRE
MUESTRAS FRESCAS Y SECAS DE SEMEN HUMANO _______________ 18
ESTRÉS LABORAL Y ESTRATEGIAS DE AFRONTAMIENTO EN LA FUERZA
ESPECIAL DE LUCHA CONTRA LA VIOLENCIA CASO: POLICÍAS
FEMENINAS _____________________________________________________ 22
VELOCIDAD INICIAL DE PROYECTILES 9 MM DE CARTUCHOS
ENSAMBLADOS EN FÁBRICA VS. RECARGADOS ARTESANALMENTE34
SATURACIÓN DE TRÁFICO EN LA AVENIDA 6 DE MARZO, EL ALTO,
BOLIVIA _________________________________________________________ 43
IDENTIFICACION DE RESTOS HUMANOS SEMI-CALCINADOS MEDIANTE
ADN NUCLEAR Y MITOCONDRIAL _______________________________ 49
DISEÑO Y DESARROLLO DE UN SISTEMA TECNOLÓGICO PARA LA
CAPTURA DIGITAL DE IMPRESIONES DACTILARES ________________ 61
CUADERNO DE CAMPO PARA REGISTRO DEL LUGAR DEL HECHO ______ 65
CIENCIAS
PROTOCOLO DE PURIFICACIÓN DE ADN DE HOJAS DE THEOBROMA
CACAO L. PARA ESTUDIOS DE GENÉTICA POBLACIONAL CON
MICROSATÉLITES (STR) __________________________________________ 70
EXTRACCIÓN DE ADN EUCARIOTA A PARTIR DE HISOPADOS ORALES DE
AVES SILVESTRES EMPLEANDO PARTÍCULAS DE SILICA (DIÓXIDO DE
SILICIO) _________________________________________________________ 73
GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR DE HELICOBACTER PYLORI POR PCR
ANIDADO Y MULTIPLEX _________________________________________ 77
A LOS AUTORES _______________________________________________________ 81
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PRESENTACIÓN
A cuatro años y medio de su creación, el Instituto de Investigaciones Técnico Científicas de la Universi-
dad Policial (IITCUP) entrega el segundo número de su revista IITCUP CIENCIA, cuyo contenido refleja
el genuino interés de la Institución Policial por introducir en sus filas los principios universales de la ob-
jetividad científica y de la formación profesional integral de los oficiales de policía.
La oportunidad otorgada a Damas y Caballeros Cadetes de la Academia Nacional de Policías (ANAPOL)
de realizar ensayos experimentales en los laboratorios de nuestro instituto y publicar sus resultados, no
es más que la clara señal de un paso en la dirección correcta de la evolución institucional. Más aún, el
novedoso aporte en balística, accidentología o psicología simboliza el inicio de la participación activa de
los peritos policiales en la producción científica institucional y nacional sostenida, como se ha visto pre-
viamente, por el impulso y ejemplo de los profesionales científicos adscritos a nuestra institución verde
olivo.
La gestión 2014 ha significado una de las más productivas para el IITCUP pues no solo se ha consolida-
do, proyectado y priorizado la investigación científica pura, sino también se ha recibido el impulso defi-
nitivo con la implementación de equipos de elevadas prestaciones tecnológicas para nuestros laborato-
rios, se ha organizado el trabajo técnico pericial para incluir nuevas capacidades de identificación crimi-
nal, basada en biometría, se ha aportado a la seguridad ciudadana participando en los esfuerzos estatales
por controlar la tenencia de armas de fuego, y se ha proyectado la extensión de nuestros laboratorios al
interior del país con el apoyo y confianza de gobernaciones y alcaldías, lo cual inevitablemente repercuti-
rá en la calidad y cantidad de la producción científica policial. Más aún, no debe olvidarse que la misión
y producción del IITCUP provee calidad plena e integral a la Universidad Policial como miembro del
Sistema Universitario Boliviano, convirtiéndose en pilar fundamental de la producción científica institu-
cional.
Sea pues este segundo número, motivo de celebración por la continuidad que ha sido posible gracias a la
fe y confianza vertida en nosotros, y sea asimismo invitación y consigna para aquellos que tomarán las
riendas del brazo científico institucional en el futuro.
Tcnl. DEAP. Rubén P. Gemio Bustillos
DIRECTOR DEL IITCUP
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NOTA
LA COOPERACIÓN INTERNACIONAL
EN LA EDUCACIÓN POLICIAL
La internacionalización del crimen y los nuevos
escenarios determinados por los procesos de glo-
balización, plantean nuevos desafíos en materias
de seguridad, prevención y represión del delito,
que generan la necesidad de implementar y desa-
rrollar un abanico de estrategias que implica una
permanente actualización y fortalecimiento insti-
tucional, con criterios de cooperación e integra-
ción internacional en educación. En esa línea, exis-
ten importantes desafíos frente a la diversificación
del crimen y otros factores que inciden en la segu-
ridad humana, de las cuales naturalmente no se
sustrae ninguna Institución Policial, cuya misión,
como cualquier policía en un estado democrático
pasa por la generación de condiciones adecuadas
de convivencia, seguridad ciudadana y el control
racional del delito.
La experiencia ha demostrado que la cooperación
internacional en materias de educación policial es
un elemento determinante para el intercambio de
experiencias, el fortalecimiento de procesos co-
munes y la profesionalización de las policías, así
como un instrumento eficaz para cerrarle espacios
al delito. No podía ser de otro modo, puesto que
se generan espacios de intercambio de experien-
cias para contrastar opiniones con policías de dis-
tintos países y culturas, conociendo la dinámica
de la institución policial receptora, su cultura or-
ganizacional, su doctrina, sus problemas y las
formas de abordaje y solución para ellos, a la vez
que a nivel personal y profesional, se desarrolla
una mayor comprensión de distintas realidades
con mirada más crítica y sensibilidad frente a te-
mas policiales comunes de un mundo globaliza-
do. En suma, podemos afirmar que se internaliza
sobre las formas de cómo se aborda la profesión
policial en otros lugares, en sociedades con mani-
festaciones delictuales distintas pero con los mis-
mos problemas base: la inseguridad, el crimen
organizado trasnacional, la prevención situacional
del delito y otros similares.
Entonces, tenemos que la cooperación educativa
policial genera y optimiza espacios académicos
propicios entre los estados y sus instituciones po-
liciales, para ampliar panoramas de conocimiento
en temas de interés policial, seguridad ciudadana,
prevención, investigación criminal y problemáti-
cas sociales, además de potenciar la formación, la
especialización y el perfeccionamiento profesional
en aras de asimilar los avances y tecnologías sobre
aspectos que pueden ser tomados como elemen-
tos de referencia.
En perspectiva, que parte importante del proceso
de capacitación policial internacional es el de la
reproducción y socialización de los conocimientos
adquiridos (entiéndase condición sine qua non) en
los cuadros policiales nacionales. Es indistinta la
forma o procedimiento, lo importante es la distri-
bución del conocimiento fresco en forma oportu-
na. Bajo esa lógica, se deben poner en práctica
operativa las teorías, estrategias, planes, progra-
mas y buenas prácticas policiales que, sustancial-
mente, sean productivas para fortalecer las labo-
res institucionales, siempre teniendo el cuidado
que su aplicación responda a la base teórica de los
instrumentos metodológicos originales.
Esta ecuación se hace difícil, indudablemente,
porque a partir del respeto que se debe profesar
por aspectos propios de cultura, autonomía y au-
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todeterminación de cada país, se deben superar
diferencias en sistemas legales, incompatibilidad
de mecanismos de investigación y distancias entre
capacidades y conocimientos policiales de las di-
ferentes organizaciones policiales. Además, en el
aspecto de jurisdicción, la lucha es desigual, por-
que mientras el crimen organizado tiene a su fa-
vor la inexistencia de fronteras, las policías del
mundo restringen sus acciones a los límites de sus
respectivas soberanías. El crimen organizado es
transnacional, mientras las policías y los organis-
mos judiciales no.
Bolivia no ha estado ajena a los procesos de inter-
nacionalizacion del conocimiento policial. Es co-
nocido a nivel centro y sudamericano el prestigio,
la disciplina, el rigor e integralidad en la forma-
ción policial del “Alma Mater Institucional”: la
Academia Nacional de Policías (ANAPOL), cuyas
aulas reciben y forman varios lustros cadetes de
diferentes policías de la región.
Del mismo modo, la Universidad Policial “Mcal.
Antonio José de Sucre”, como órgano de forma-
ción de post grado de la Policía Boliviana, está a la
vanguardia de los nuevos paradigmas educacio-
nales, por lo que varios policías que en la actuali-
dad están en funciones de mando en sus respecti-
vas instituciones, realizaron el Curso de Adminis-
tración Policial y Comando y Alta Dirección en
ese Instituto.
Mención especial merece el Centro de Entrena-
miento Internacional Antinarcóticos “Garras del
Valor”, ubicado en la localidad de Chimoré, Co-
chabamba, que se convirtió prácticamente desde
su inauguración en referente de primer nivel para
las instituciones policiales americanas en cuanto a
la especialización en la interdicción al narcotráfi-
co.
En el particular caso del suscrito, es siempre re-
confortante y halagador encontrar camaradas,
varones y mujeres, de otros países que hicieron el
curso Garras, que casi al unísono recuerdan con
nostalgia y cariño su paso por ese centro de espe-
cialización.
Cap. Cristian Sánchez Rodríguez
ESPECIALISTA EN CRIMINALISTICA
JEFE REGIONAL IITCUP-SANTA CRUZ
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NOTA
LA CRIMINALIDAD EN LA VÍA
La presente nota discute y describe el fenómeno
social de la criminalidad en la vía de tránsito, esta
debe de realizarse desde criteritos claramente
establecidos y delimitados por las políticas crimi-
nales implantadas e impulsadas por el gobierno,
mismas, que están dirigidas a erradicar las con-
ductas criminales, la educación y prevención del
delito además del control social, tomando en
cuenta las distintas corrientes o escuelas crimino-
lógicas en función a los conceptos y objetivos que
componen el estudio de la criminología en gene-
ral, para que sea trazada desde diferentes enfo-
ques como el sociológico, psicológico, antropoló-
gico, jurídico y sobre todo el aspecto que involu-
cra al ser humano bajo la condición racional y
espiritual.
Es importante considerar que en los orígenes de la
criminología llega un momento que ocurre una
confusión y se llegan a superponer muchas veces
con las doctrinas, sobre las escuelas y los hom-
bres integrantes de su historia, por ello siguiendo
a Pablo Bonnet en su libro “Lecciones de Medici-
na Legal” establece que existen tres factores gene-
rales que marcan el inicio o la formación del inte-
rés del estudio del crimen en general. En primer
lugar, tenemos una reacción médico – jurídica
contra las escuelas penales exclusivistas que fun-
dan el derecho Penal considerando y analizando
solamente la infracción propia de la Normativa
Jurídica que se representa por la Ley y se descar-
ta o se deja de lado al elemento humano como
autor de la infracción, siendo este el principal ac-
tor de todo el proceso criminal. En segundo lugar,
se identifica la llegada de la exploración científica
del individuo humano, es decir, que hace un es-
tudio propio del elemento humano bajo diferentes
condiciones y perspectivas. Y en tercer lugar, la
revaluación a la luz de esta reacción y de estos
medios de exploración de doctrinas referentes a la
Fisiognomía y “Fisiognómica” (estudia el carácter
de la persona mediante el análisis de los rasgos
faciales) de Delia Porta y de Lavater, respectiva-
mente, a la “Frenología” (pretendía explicar por
medio de la inspección minuciosa del cráneo del
individuo características tales como la capacidad
mental, carácter y personalidad del mismo) de
Gall, a la “locura moral” de Prichard y Maudsley,
a la “ley de las grandes causas y de los grandes
efectos” de Quetelet, al concepto de “Degenera-
ción” de Morel y de Magnan y del “atavismo” de
Lombroso., pero además, ya en el año 1748 con
Charles de Secondat Baron de Mosntequieu, ex-
presa en su libro “Espíritu de las Leyes” que los
delitos que comenten las personas no deben ser
reprimidos con un pena dura y cruel, proponien-
do en sí que el legislador debe prevenir los delitos
y no castigarlos. El Sr. Jean Jacques Rousseau en el
año 1755 en su libro “Discurso sobre la desigual-
dad entre los hombres” sostiene la idea de que el
ser humano es por esencia bueno, es decir, que es
congénitamente bueno, pero este a medida que se
va desarrollando con la sociedad, es decir, va cre-
ciendo con la sociedad llega a adquirir la maldad.
En 1764 el Sr. Cesar Bonesana Marques de Beca-
ria, en su libro “De los Delitos y de las Penas”
protesta contra los castigos corporales aplicados
como pena. Si partimos de las definiciones plan-
teadas de la criminología como el concepto de
Pérez Pinzón que establece que es “el estudio del
origen y desarrollo de la criminalidad y de la cri-
minalización, con fines de política criminal” o que
según García Pablos de Molina en su libro Ma-
nual de Criminología (introducción y teorías de
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criminalidad) (1988) que la define como “la cien-
cia empírica e interdisciplinaria que se ocupa del
crimen, el delincuente, la víctima y el control so-
cial del comportamiento desviado” donde a crite-
rio mío, se debe realizar una valoración integral
de los siguientes aspectos:
1. Como elemento esencial el crimen o delito,
que cuando toma un aspecto objetivo o
material va a ser la condición propia, por
la que se va a generar el estudio en sí, del
derecho, es decir, es el motivo o razón por
la cual se da inicio a la valoración real de
las ciencias jurídicas.
2. El elemento activo conocido como criminal
o delincuente, asignándole ese rol o condi-
ción por la autoridad competente (en este
caso Órgano Judicial que de acuerdo a
normativa en actual vigencia es, una vez
que es hallado culpable del hecho que se le
imputa), pero para emitir un criterio obje-
tivo, claro y concreto es necesario impul-
sar una verdadera y adecuada valoración
de su imputabilidad, misma que tiene que
estar en función a estudios científicos en
este caso Médicos, Psicológicos y Crimino-
lógicos con el objetivo de develar la diná-
mica personal que se resuelve en la moti-
vación del acto delictivo.
3. El elemento pasivo conocido como la víc-
tima, misma que debe de ser valorada
desde una perspectiva psicológico – social,
ya que esta establece un relacionamiento
con el delincuente (ya sea positivo – sín-
drome de Estocolmo o negativo – miedo,
odio, etc.), lógicamente sufriendo las con-
secuencias del acto antijurídico, que de
una u otra forma llegaría a afectar su con-
dición propia de ser humano.
4. Un elemento fiscalizador conocido como el
control social de la delincuencia, que es
una competencia del derecho, de las auto-
ridades de gobierno con una participación
mucho más activa de los sistemas de puni-
ción y reinserción social (en nuestro caso
de lo que se conoce como Régimen Peni-
tenciario dependiente del Ministerio de
Gobierno) además de la sociedad civil, ha-
ciendo notar que se habrá de considerar la
importancia de la Criminológica, Psicoló-
gica y Psiquiatría al momento de emitir un
criterio sobre la condición propia del de-
lincuente, para que de esta manera se
pueda develar, con un criterio sistémico y
objetivo una verdadera política criminal.
Por lo anteriormente expuesto el presente artículo
tiene por objetivo resaltar la importancia que exis-
te entre el estudio cuantitativo y cualitativo del
fenómeno criminal, mismo que está en relación
directa con las normas de convivencia social entre
miembros de una sociedad, donde se incorpora al
conocimiento teórico desde su origen hasta su
actual desarrollo, con fin de obtener una visión
mucho más crítica y objetiva de este fenómeno
social.
Ahora bien, es necesario hacer una definición de
lo que es la Seguridad Vial que de acuerdo a Gon-
zales – Espallardo, se entiende como un “Conjun-
to de condiciones que abarcan múltiples factores
(institucionales, legales, normativos, de infraes-
tructura, factor humano, vehículo y asistencia de
servicios de emergencia y médicos), que permiten
que el transporte viario se realice con el mínimo
riesgo de sufrir un accidente y, en caso de que
éste se produzca, con las menores consecuencias
posibles”. Si nos enfocamos en un estudio acci-
dentológico más profundo y revisamos un poco
los cuadros estadísticos sobre las causas y factores
de riesgo podemos establecer que entre un 10% se
reparte las condiciones atmosféricas, viales y del
motorizado, en cambio existe un gran 90% identi-
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ficado como principal riesgo la conducta del hu-
mano en cualquiera de sus modalidades (conduc-
tor, peatón o pasajero), motivo por el cual es de
mucha importancia hacer un estudio y valoración
cabal del elemento humano dentro del proceso
accidentológico vial, por ello considero que se
forma el concepto de criminología vial, misma
que se identificada como: una disciplina depen-
diente de la criminología misma que está orienta-
da al estudio y prevención de los delitos contra la
seguridad vial, la evaluación del comportamiento
delictivo o desviado del elemento humano y a la
rehabilitación de la víctima, además del diseño de
políticas con apoyo del control social. Po sí sola la
Criminología tiene una función preventiva, como
explica Fernando Miró: "Pretendemos conocer
cómo sucede el incidente vial y cómo podemos
evitarlo. La Criminología está empezando a com-
prender que tiene un importante papel en la segu-
ridad vial, aplicando sus conocimientos científicos
en la prevención de la siniestralidad”.
Cap. Huáscar Wiliser Coca Maldonado
CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y
CAPACITACIÓN EN SEGURIDAD VIAL
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NOTA
DESARROLLO TECNOLÓGICO EN ANAPOL
¿ES POSIBLE?
En 2013 se inició un proceso experimental en la
Academia Nacional de Policías (ANAPOL) con la
introducción práctica del concepto de la tesis de
grado de investigación como modalidad de gra-
duación de DC y CC de cuarto año, bajo la coor-
dinación de docentes peritos IITCUP a cargo de
las materias de Biología, Genética, Estadística
Inferencial, Metodología de la Investigación Cien-
tífica y Taller de Graduación.
El “proyecto de grado” es el formato comúnmente
elegido para la graduación de los oficiales de po-
licía y aunque existen otros cuatro en la normati-
va vigente de la Universidad Policial (tesis de
grado, trabajo dirigido, examen de grado y exce-
lencia), este parece ser insustituible.
En el año 2013 se intentó en-
samblar un cronógrafo digital
(dispositivo para medir la ve-
locidad de proyectiles, foto
derecha), pero el tiempo no
fue suficiente. A finales de
2014 se intentó otra vez y dos
Caballeros Cadetes se atrevie-
ron a incursionar más allá de
las propuestas teóricas proyec-
tivas de carácter social, diseñando y ensamblando
un dispositivo simple para la captura digital de
impresiones digitales (Pág.79). Su trabajo fue re-
flejado en el cuerpo de un proyecto de grado, pe-
ro con el corazón de una tesis de investigación,
aunque al final éste recordó más un trabajo diri-
gido.
Dos prototipos se construyeron para tal fin, uno
de ellos permanece en los laboratorios del IITCUP
a la espera de una iniciativa sucesora, tanto en el
diseño como en el uso de programas informáticos
que optimicen su rendimiento y utilidad.
Sin embargo, los actuales subtenientes Carlos Án-
gel Patzi Vila y Jhonny Martín Alanoca Velasco
fueron los encargados de dar vida a esta iniciati-
va, cuyo objetivo fue reducir el costo de imple-
mentación tecnológica en huellografía y demos-
trar que es posible dar los primeros pasos hacia la
independencia tecnológica.
Ambos se graduaron como oficiales de policía
bajo la mención de Investigación Criminal, carrera
de la cual se espera surjan los futuros peritos ins-
titucionales, pero no fueron destinados en las filas
del IITCUP… Pues, aún faltan políticas de forma-
ción de “policías científicos”
que promuevan con ahínco la
carrera pericial de estos jóve-
nes policías.
El IITCUP se propone como
alternativa para lograrlo.
Nuestro instituto, el brazo
científico policial, es hoy un
barco que espera recibir al me-
nos dos valientes cada año para empezar ese viaje
a un nuevo mundo, a ese mundo donde nuestra
preciada Policía Boliviana es científica por exce-
lencia, por mérito, por dedicación, esfuerzo y es-
píritu, y es otra vez querida por su pueblo…
Ruddy Luna Barrón
DPTO. DE INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA
IITCUP – UNIPOL
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 11
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ARTÍCULO ORIGINAL – BIOLOGÍA
EFICIENCIA DEL ENSAYO DE QUIMIOLUMINISCENCIA
(LUMINOL) ENTRE DIFERENTES SOPORTES Y TRATAMIENTOS
Arteaga, D. & Serrudo, V.
División Biología, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia.
RESUMEN
Conociendo los buenos resultados que ofrece el ensayo quimioluminiscente de Luminol para la detección
presuntiva de manchas hemáticas, se propuso trabajar con el mismo para diferentes evaluaciones sobre
soportes (sustratos), fluidos biológicos, efecto de lavados, derivados de hidrocarburos e interferencia con
otros reactivos, para evaluar sensibilidad, especificidad y viabilidad para pruebas posteriores de ADN.
Los falsos positivos detectados fueron: hipoclorito de sodio, aluminio y asfalto, y los materiales porosos
absorbentes mostraron corto tiempo de fluorescencia. Se ha demostrado asimismo la interferencia nula
del Luminol para la amplificación posterior de marcadores moleculares tipo STR y de amelogenina en
cromosomas sexuales XY.
PALABRAS CLAVE: Luminol, soportes y genética.
ABSTRACT
Knowing the good results offered by the chemiluminescent assay of Luminol for presumptive detection
of hematological stains, it was proposed to work with the same for different assessments supports (sub-
strates), biological fluids, the effect of washes, hydrocarbon derivatives and interference with other rea-
gents, to evaluate sensitivity, specificity and feasibility for further DNA testing. False positives were de-
tected: sodium hypochlorite, aluminum and asphalt, porous and absorbent materials showed fluores-
cence short time. Were also demonstrated no interference of Luminol for subsequent amplification of
somatic STR type markers and the universal sexual amelogenin gene.
KEY WORDS: Luminol, supports and genetics.
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INTRODUCCIÓN
El luminol (C8H7N3O2) es un reactivo quimiolu-
miniscente (es decir, emite luz en lugar de color),
que puede ser utilizado tanto como un ensayo
presuntivo para sangre como un ensayo para el
mejoramiento químico de impresiones de sangre
en varias superficies. Es una excelente técnica
para la búsqueda de manchas de sangre latentes
en la escena del crimen o escenas donde se sospe-
cha que estas manchas fueron lavadas, pues no
destruye el ADN, aunque su aplicación poste-
riormente impide la detección de sangre por
pruebas bioquímicas. Además, no es corrosivo
para la escena del crimen, no obstante no reaccio-
na con resolución suficiente para la identificación
de huellas dactilares (Watkings & Brown, 2004;
James & Nordby, 2005; Rohrig, 2008; Santos &
Kalapothakis, 2009).
Los primeros experimentos conducidos con miras
a utilizar el luminol como una herramienta de la
ciencia forense se realizaron en 1937 por Specht,
quien ensayó la sustancia sobre una variedad de
soportes como pastos, ladrillos o piedras mojadas
en sangre (Watkings & Brown, 2004), a esta le
siguieron evaluaciones de volumen de sangre,
tipo de sustrato y efecto de los lavados (Gross et
al., 1999; Mak et al., 2000), interferentes del Lumi-
nol (Quickenden & Creamer 2001; Negre et al.,
2002; Creamer et al., 2003), especificidad medida
cuantitativamente (Quickenden & Cooper, 2001,
Quickenden & Creamer, 2001), la eficacia de su
uso para la obtención de perfiles de identidad
genética (Castelló et al., 2002; Blum et al., 2006;
Santos et al., 2009), sensibilidad y especificidad
(Watkins y Brown, 2004; Villegas et al., 2005; Tobe
et al., 2007).
El presente trabajo incluye un compendio de ex-
perimentaciones que van desde la determinación
del grado de sensibilidad hasta el efecto de la pin-
tura sobre paredes, esto con el objeto de cubrir
todas las evaluaciones necesarias para desarrollar
una estandarización completa del ensayo que
permita su uso práctico en los casos forenses,
aplicando los medios, reactivos y materiales acce-
sibles a nuestra realidad y considerando los mate-
riales como telas y soportes más comunes halla-
dos en las escenas de los hechos.
MATERIALES Y MÉTODOS
La preparación de luminol fue una modificación
del protocolo del “Manual de entrenamiento de
laboratorio para análisis de ADN”: 5 g de Na2CO3,
0,1 g de luminol y lo necesario en volumen de
H2O2 al 3%, 10 volúmenes para aforar a 500 ml.
Sensibilidad
Se evaluó la sensibilidad de la técnica con un vo-
lumen de 20 µl de sangre ORh+ (colectada en tu-
bos vacutainer con anticoagulante EDTA) en una
batería de diluciones 1/2; 1/5; 1/10; 1/50; 1/100;
1/200; 1/500; 1/750; 1/1000; 1/10000; 1/100.000;
1/1’000.000; 1/10’000.000 y 1/100’000.000 v/v en
agua destilada, considerando 10 réplicas por cada
variable. Se evaluó el efecto del volumen de la
misma sangre sin diluir con 0,1; 0,5; 1,0; 5,0; 10,0;
50,0 y 100,0 µl, considerando 10 réplicas por cada
variable. Para la reproducibilidad, en un soporte
de vidrio y en un trozo de tela blanca (100% algo-
dón) se colocaron 30 gotas de 20 µl de la misma
sangre, sin diluir.
Especificidad
Para la especificidad, sobre un soporte de vidrio
se colocaron gotas de 20 µl, o sólidos de un diá-
metro equivalente, de: a) jugo de naranja, b) zumo
de remolacha, c) perfume (“Moving Cyzone”), d)
ceniza de cigarrillo, e) pintura roja (pintura para
tela “Acrilex”), f) tinta roja de bolígrafo marca
Faber Castell, g) lápiz labial color carmín marca
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 13
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AVON y sangre ORh+, considerando 30 réplicas
por cada uno.
Para la especificidad con compuestos que contie-
nen elementos no metálicos de alta electronegati-
vidad, en distintos soportes de vidrio se colocaron
30 gotas de 20 µl de: hipoclorito de sodio (lavan-
dina al 8%), peróxido de hidrógeno (3%, 10 volú-
menes); alcohol iodado (1%) y pasta dental marca
Colgate (conteniendo monofluoruro fosfato de
sodio).
Para evaluar el efecto de compuestos orgánicos
derivados de hidrocarburos, se empleó el mismo
volumen y el mismo número de réplicas de aceite
hidráulico (color rojo) marca YPFB y aceite de
motor Castrol. Por otro lado, en un soporte de tela
blanca (100% algodón) se colocaron 10 gotas de 20
µl de aceite hidráulico, aceite de motor, aceite
para cadena de moto y gasolina.
Para valorar el efecto de otros fluidos biológicos
humanos, se trabajó con un volumen de 20 µl y 30
réplicas de saliva (5 gotas correspondientes a sali-
va de mujer y 5 gotas a saliva de varón), orina,
orina de un paciente con hemoglobinuria y líqui-
do seminal.
Para determinar cuál es el efecto del soporte (sus-
trato), se sembró sangre de distintos tipos sanguí-
neos (A, B, AB y O Rh+) con volúmenes de 1, 5,
20, 50, 100, 200 y 500 µl, en telas de: seda sintética,
seda, forro, tapiz, paño, lana, cuerina, popelina,
franela y tela licrada.
Se evaluó también: madera, metal, aluminio, plás-
tico, vidrio catedral, vidrio liso, tierra limosa seca,
tierra limosa húmeda, asfalto, pavimento rígido,
cemento, ladrillo gambote, madera de construc-
ción y azulejo.
Efecto de lavados
Para verificar el efecto de los posibles lavados en
el lugar del hecho, se manchó tela blanca (100%
algodón) con gotas de 20 µl de sangre tipo O Rh+,
con 30 réplicas que posteriormente fueron remo-
jadas en: lavandina con detergente y detergente
marca OMO. Del mismo modo se mancharon so-
portes de madera de zócalo y cerámica que fueron
lavadas con un cepillo de ropa de cerdas plásticas.
Finalmente, para evaluar si existía un efecto ad-
verso del Luminol frente al grupo sanguíneo (A, B
y O), se aplicó la técnica de Luminol a 30 gotas de
20 µl de los tres tipos en vidrio.
Todas las muestras secaron por 24 horas como
mínimo, aplicándose luego por aspersión la solu-
ción de luminol en oscuridad total. La toma foto-
gráfica se realizó con una cámara digital
SAMSUNG S1030 de 10,1 MP, lentes de 22,2 mm,
programación de disparo continuo, ISO1000,
apertura mayor “H”, a color, sin flash y con ma-
cro activado. Las fotografías obtenidas se editaron
convirtiendo las fotos oscuras en blanco y negro y
posteriormente se invirtió la coloración para que
resalte el color azul de la fluorescencia en el pro-
grama Adobe Photoshop CS4.
Efecto de pintura
A un trozo de pared sembrado con diez gotas de
20 µl de sangre, se aplicó una capa de pintura al
agua.
Ensayo genético
Las manchas sembradas sobre tela, hisopado de
las manchas procesadas sobre ladrillo gambote y
las manchas en tela lavada con detergente e hipo-
clorito de sodio, se remitieron al Centro de Inves-
tigación Genética (CINGEN) del Instituto de In-
vestigaciones Técnico Científicas de la Universi-
dad Policial (IITCUP), para la detección de ADN
14 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
y evaluación de su aplicación forense (identifica-
ción humana).
RESULTADOS
Tabla 1. Resultados estadísticos del ensayo de luminol
sobre diferentes soportes
Soporte Valor
chi2
Valor
p Característica
Madera zó-
calo 16,67 < 0,01 Buena señal
Metal 1,50 < 0,01 Buena señal
Aluminio - - Luminiscencia
tenue sin muestra
Plástico 2,04 0,19 Buena señal
Vidrio 1,50 0,24 Buena señal
Tierra limosa
seca 4,17 0,07
La señal se obser-
va como un res-
plandor
Tierra limosa
húmeda 15,04 < 0,01
La señal no es
nítida
Asfalto 0,00 0,06 Muestra una reac-
ción falso positivo
Pavimento
rígido 0,00 0,06
Absorbe y fluores-
ce rápidamente
Cemento 0,00 0,06 Absorbe y fluores-
ce rápidamente
Ladrillo
gambote 0,67 0,35
Absorbe y fluores-
ce rápidamente
Madera de
construcción 0,00 0,06
Fluorescencia
fugaz
Azulejo 0,00 0,06 Buena señal
Sensibilidad
En el ensayo de sensibilidad se observó luminis-
cencia detectable hasta la dilución v/v de
1/1’000.000 y en todo el rango de volúmenes (de
0.1 a 100.0 µl) de sangre. Su reproducibilidad tan-
to en vidrio como tela fue del 100%.
Especificidad
El ensayo de especificidad demostró que todos los
elementos empleados dieron resultados negati-
vos. El único compuesto no biológico y no metáli-
co de alta electronegatividad que mostro luminis-
cencia detectable fue el hipoclorito de sodio (la-
vandina al 8%).
Ningún compuesto orgánico derivado de hidro-
carburos presentó un resultado positivo frente al
Luminol y únicamente se observó una mancha
luminiscente, pero estadísticamente no significa-
tiva para las muestras de saliva.
En el caso de las telas, todas mostraron resultados
positivos. Sin embargo, algunas al ser más poro-
sas, como la lana, forro, paño y franela son más
absorbentes haciendo que el efecto de la luminis-
cencia perdure por un lapso menor de tiempo.
Figura 1. Luminiscencia en aluminio
(imagen en color invertido digitalmente).
El soporte de aluminio sin muestra de sangre
mostró una señal luminiscente tenue. Las mues-
tras realizadas utilizando el soporte de tierra (sue-
lo) mostraron resultados con poca luminiscencia,
ya que la misma absorbe la sangre rápidamente.
Las manchas que fueron lavadas en la tela de al-
godón no presentaron fluorescencia, lo contrario
ocurrió con las manchas sobre pared a las cuales
se les aplicó una capa de pintura cubriéndolas
totalmente.
Ensayo genético
De los quince marcadores genéticos que posee el
kit Identifiler (Applied Biosystems), se pudo ob-
tener más de la mitad con una intensidad prome-
dio de fluorescencia de 60 au (ver Figura 2).
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 15
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
DISCUSIÓN
Los resultados obtenidos en este trabajo no difi-
rieron en gran medida de los mostrados por otros
autores. En el caso de la sensibilidad, los mismos
resultados fueron obtenidos por Villegas et al.
(2005) y si bien, en cuanto a la especificidad, el
hipoclorito de sodio resultó ser un falso positivo,
lo que no fue para otros trabajos, es posible que
esto se deba al menor porcentaje de dilución (6%),
empleado por Tobe et al. (2007) demostrando así
la importancia que tiene el factor de dilución de
hipoclorito de sodio y el tiempo que transcurre
desde su uso, ya que según Creamer et al., (2003 y
2005), la lavandina no se considera un interferente
después de ocho horas porque se evapora.
Con respecto a los resultados obtenidos del ensa-
yo genético, se pudo obtener, al igual que Blum et
al. (2006), diez marcadores claramente identifica-
bles con las tres muestras: mancha sobre tela, hi-
sopado de manchas sobre ladrillo gambote y
manchas en tela lavada con detergente OMO e
hipoclorito de sodio, lo cual demuestra que si
para la muestra más difícil se puede obtener ADN
rescatando casi el 70% del total de marcadores, es
aún más factible obtener perfiles completos en
otras muestras que no han sido significativamente
alteradas.
Un resultado destacado en cuanto al pintado de
una pared en la cual se sembró sangre fue la dis-
persión de esta última sobre la superficie hacien-
do que se observe una luminiscencia no de las
manchas colocadas al principio sino de toda la
superficie pintada (Figura 3), lo que demostraría
que la sangre se diluye con la pintura por lo cual
no se elimina, resulta útil conocer este comporta-
miento al momento de hacer conjeturas acerca de
la luminiscencia en paredes.
Al haber observado una tenue luminiscencia en el
material de aluminio y asfalto, se puede compro-
bar que este último en su composición posee me-
tales altamente electronegativos que darían como
resultado falsos positivos, sin embargo, la inten-
sidad observada a simple vista es lo suficiente-
mente distinguible para no considerarla como un
resultado positivo.
Figura 2. Intensidad de fluorescencia promedio de 10 repeticiones de la amplificación de marcadores genéticos
tipo STR´s más el gen amelogenina a partir de manchas hemáticas en tela lavada con detergente y lavandina.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
PENTAD
FGA TPOX D2 D7 D8 TH01 vWA D3 D5 AME
LARGO MEDIO CORTO
Inte
ns
ida
d p
rom
ed
io d
e f
luo
res
cn
en
cia
(a
u)
Sistema
16 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
La reducción de luminiscencia en las telas más
porosas demostrarían la necesidad de utilizar
además de Luminol otro ensayo orientativo como
el de Kastle Meyer debido a que se puede hume-
decer las telas más porosas, para que estas reac-
cionen mejor con los reactivos de fenoftaleina y
se puedan obtener resultados colorimétricos más
distinguibles que los de luminiscencia al momen-
to de buscar manchas hemáticas, ya que obligato-
riamente en el procedimiento es necesario hume-
decer el soporte para aplicar los reactivos, opera-
ción que favorecería la detección de reacciones
positivas.
A) B)
Figura 3. A) Manchas de sangre sembradas sobre trozo
de pared, B) Luminiscencia observada luego de pintar
sobre las manchas de A) (foto mejorada digitalmente).
CONCLUSIONES
Los falsos positivos detectados en el presente es-
tudio fueron el hipoclorito de sodio (lavandina al
8%), aluminio y asfalto.
Los materiales más porosos son a la vez más ab-
sorbentes y tienen como efecto un corto tiempo de
fluorescencia al momento de aplicar el Luminol,
por lo que se recomienda, además de éste, em-
plear otro ensayo orientativo cuando se trabaja
con soportes como el ladrillo gambote, madera,
lana, forro, paño y franela.
Queda demostrada la NO interferencia del ensayo
de Luminol para pruebas posteriores de genética,
en las cuales se emplee marcadores del tipo STR y
amelogenina.
AGRADECIMIENTOS
Agradecemos al CINGEN por el procesamiento
de muestras de análisis genético. A Lidia Macu-
chapi y Vidal Huanca por el apoyo en la prepara-
ción de las muestras.
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18 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
ARTÍCULO ORIGINAL - BIOLOGÍA
COMPARACIÓN DE LA TÉCNICA DEL “ÁRBOL DE NAVIDAD”
ENTRE MUESTRAS FRESCAS Y SECAS DE SEMEN HUMANO
D. Arteaga V.1; J.L. Laura R.1 & Pol. L. Macuchapi2
1División Biología, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. 2 Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia.
Recibido Agosto 2014 – Aceptado Noviembre 2014
RESUMEN
La citología espermática provee un aporte significativo en la resolución de casos de delitos sexuales me-
diante el uso de la técnica del árbol de navidad (Christmas Tree, tinción Kernechtrot Picroindigocarmín)
para detectar células espermáticas en evidencia biológica. Muestras frescas y secas de semen humano
diluidas en agua miliQ e impregnadas en hisopos, fueron utilizadas para comparar la utilidad de la téc-
nica en el reconocimiento de células espermáticas. Se realizó la fijación mediante calor, posteriormente se
aplicaron colorantes y se observó al microscopio. La tinción e identificación de espermatozoides es más
adecuada en las muestras frescas en sus distintas diluciones respecto a las muestras secas, dificultándose
su observación y no distinguiéndose por completo su morfología.
PALABRAS CLAVE: Células espermáticas, tinción, muestras frescas y secas.
ABSTRACT
Sperm cytology provides a significant contribution in resolving cases of sexual crimes by the use of the
Christmas Tree (Kernechtrot Picroindigocarmín staining) to reveal sperm cells in biological evidence.
Fresh and dried samples of human semen, diluted in miliQ wáter and impregnated on swabs, were used
to compare the usefulness of the technique for recognizing sperm cells. Fixing was performed by heating,
and after appling the stains a microscope was used to photograph de results. They showed that the stain-
ing and identification of sperm is more suitable in fresh samples under various dilutions respect to the
dry samples, making it difficult to distinguish the sperm morphology.
KEY WORDS: Sperm cells, staining, samples cool and dry.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 19
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
INTRODUCCIÓN
El semen es un fluido de compleja composición
producido por los órganos sexuales masculinos.
Su componente celular lo constituyen los esper-
matozoides (células haploides), morfológicamente
distinguibles por una cabeza, que contiene un
acrosoma, el cuál alberga el material genético y
protaminas, con una longitud de 4,5 m y 2,5 m
de ancho y una cola compuesta de proteínas que
le otorga movilidad, con una longitud de 40 m
(Tilstone, 2005). El estudio, la identificación y la
caracterización del semen (fluido biológico mas-
culino) es de gran importancia en el caso de deli-
tos sexuales, donde los indicios colectados corres-
ponden principalmente a hisopados vaginales,
cervicales, anales u orales (Owen & Smalldon
1975).
La citología espermática se realiza a través de la
tinción de árbol de navidad o “Christmas tree”, en
inglés. Esta técnica utiliza el “nuclear fast red”
que tiñe diferencialmente el ADN contenido en la
cabeza del espermatozoide de un rojo carmín bri-
llante y el acrosoma de rojo suave (rosa), y una
contra-tinción de ácido pícrico - indigocarmín
(PIC) tiñe la cola verde-azul-gris en función del
contenido de cada segmento. Así, la tinción dife-
rencial se realiza gracias al contenido celular y
composición de la membrana de cada segmento;
debido a su sensibilidad y facilidad para la lectu-
ra, se cataloga a esta técnica como muy eficiente
(Allery et al. 2001).
El objeto del presente estudio es emplear la técni-
ca del árbol de navidad para comparar las células
espermáticas frescas respecto de las conservadas
en hisopos.
MATERIALES Y MÉTODOS
La muestra de semen humano fue obtenida de
CIES (Centro Integral de Estudios de Sexualidad)
y conservada a 4°C, dicha muestra se diluyó en
agua milliQ, obteniéndose las siguientes solucio-
nes: 100%, 50 % (½), 25 % (¼), 12,5% (1/8) y 6,25%
(1/16), mismas que fueron hisopadas para luego
realizar el frotis en placas de vidrio (portaobjetos)
de las muestras frescas, y dejando luego estos por
15 días a una temperatura de 21°C. Transcurrido
el tiempo indicado, se procedió a remojar en 100
µl del mismo solvente por espacio de 2 horas y se
realizó el frotis respectivo.
Las placas (portaobjetos) fueron fijadas con calor
con la ayuda de un mechero, se adicionó 20 µl de
“fast red” refrigerado (4ºC), expandiéndose el
colorante y dejándolo por 15 minutos, luego se
agregó 20 µl de ácido pícrico saturado (con índigo
carmín), se expandió y se esperó 3 minutos. Poste-
riormente, se realizó el lavado de manera vertical
con 200 µl de metanol absoluto y se escurrió la
placa, luego se colocó un cubreobjetos procedién-
dose a sellar con esmalte de uñas transparente,
para finalmente obser-
var al microscopio con
aumento de 1000 X,
utilizando aceite de
inmersión. Como con-
trol negativo se utilizó
un portaobjetos sin
muestra y como con-
trol positivo una placa
con células espermáti-
cas sin teñir (Protocolo
modificado OMS,
1999).
Figura 1. Control Positivo
de tinción (400x).
20 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Figura 2. Comparación de células espermáticas reveladas con la tinción “árbol de navidad”, empleando
diluciones seriadas de la solución de resuspensión de muestra al 100, 50, 25, 12.5 y 6.25% respectivamente,
en muestras frescas (izquierda) y secas (derecha).
1000X 1000X
1000X 400X
400X 400X
400X 400X
400X 400X
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 21
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
En el control positivo se observaron células es-
permáticas donde se distingue su flagelo, en cam-
bio, en el negativo no se observa la presencia de
ninguna célula (Figura 1).
La cantidad de células observadas fue de acuerdo
al tipo de dilución empleado, teniendo mayor
cantidad en las soluciones mayores y menor can-
tidad en las menores.
Las células espermáticas tienen la parte anterior
“cabeza” ovalada (acrosoma y núcleo) y un flage-
lo, al teñir estas células se observa que el acroso-
ma se tiñe de color rosado y verde en cambio el
flagelo únicamente se tiñe de color verde (Figura
2).
En las muestras frescas se distingue adecuada-
mente la morfología y estructura de los esperma-
tozoides, teniendo la cabeza ovalada y el flagelo
alargado (Figura 2).
Las células espermáticas observadas después de
pasado 15 días no son fácilmente distinguibles, la
estructura de la cabeza presenta constricciones y
el flagelo se observa con dificultad o no se lo ob-
serva. A medida que transcurre el tiempo la per-
sistencia de estas estructuras se dificulta por la
deshidratación del fluido seminal, por lo que se
puede distinguir únicamente la cabeza de los es-
permatozoides (Figura 2).
La técnica del árbol de navidad permite identifi-
car a células espermáticas mediante la tinción de
la cabeza (acrosoma) y su flagelo, estas células son
distinguidas de manera adecuada cuando la
muestra colectada en hisopos es fresca y se difi-
culta con muestras secas, además discrimina a las
células epiteliales.
Por lo tanto recomendamos aplicar la técnica en
muestras frescas o conservadas a bajas temperatu-
ras, más no así cuando el tiempo transcurre o si
no se encuentran a una temperatura adecuada de
conservación (4°C).
REFERENCIAS
Allery, J-P., Telmon, N., Mieusset, R., Blanc, A. &
Rougé, D.. 2001. Cytological detection of
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logía. IITCUP. La Paz – Bolivia. 15p.
Owen,G; Smalldon, K.. 1975. Blood and semen
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lated to crime: report a survey using pre-
sumptive test. ASTM International, 20 (2):
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Tilstone, B.. 2005. DNA Analyst Training, Foren-
sic Biology: Testing of Body Fluids and
Tissues. NFSTC, Science serving Justice.
22 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
ARTÍCULO ORIGINAL - PSICOLOGÍA
ESTRÉS LABORAL Y ESTRATEGIAS DE AFRONTAMIENTO EN LA
FUERZA ESPECIAL DE LUCHA CONTRA LA VIOLENCIA
CASO: POLICÍAS FEMENINAS
Danitza Teresa Chuquimia Mendoza
Carrera de Psicología, Facultad de Humanidades y Cs. de la Educación
Universidad Mayor de San Andrés
RESUMEN
La falta de espacios adecuados, el relacionamiento con compañeros, la acumulación de denuncias de vio-
lencia y horarios extensos de trabajo de las Policías Femeninas de la F.E.L.C.V., ocasionan “estrés labo-
ral”, lo que requiere y demanda Estrategias de Afrontamiento como medio de equilibrio. Para analizar
este fenómeno se realizó el análisis cuantitativo de estas variables y su relación intrínseca, demostrando
que el “estrés laboral” se debe a la ausencia de información sobre la reestructuración organizacional, difi-
cultades en las relaciones superior-subordinado, espacio vital e individual para el desempeño, control
auditado del trabajo, y apoyo grupal. Asimismo, se identificó también que la percepción de los elementos
positivos ante una situación estresante, el escape del problema y el aislamiento en lugar de la interacción
social, son las estrategias menos utilizadas, lo que indica que las Policías Femeninas con “estrés laboral”
no utilizan adecuadamente las Estrategias de Afrontamiento, influyendo negativamente en su desempe-
ño general en la F.E.L.C.V.
PALABRAS CLAVE: Estrés laboral, policía femenina, estrategias de afrontamiento.
ABSTRACT
The lack of adequate work space, of relationship with peers, the accumulation of complaints of violence
and long hours of work of the Women's Police from F.E.L.C.V. causes the presence of Job Stress, which
demands the use of Confront Strategies as means of balance. To analyze this phenomenon, quantitative
analysis of those variables and their intrinsic relationship were conducted, showing that the "job stress" is
due to the lack of information on organizational restructuring, difficulties in superior-subordinate rela-
tionships, and individual living space, performance control, and social support. Likewise, it was also
identified that the perception of the positive elements to a stressful situation, the escape of the problem
and isolation, rather than social interaction strategies, are less used, indicating that the Female Cops
"work stress" are not properly using efficient Confront Strategies, negatively impacting in the overall
performance of FELCV personnel.
KEY WORDS: Work stress, female police, confront strategies.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 23
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
INTRODUCCION
A partir de la declaración en 1975-1985 como la
década de la mujer (Pérez, 2009), comienza la in-
serción de la mujer al campo laboral progresiva-
mente en todas las profesiones. En Bolivia ac-
tualmente, las mujeres ocupan cargos y desempe-
ñan funciones al igual que los hombres, por ejem-
plo en el Gobierno Fuerzas Armadas y Policía
Boliviana; sin embargo, a la par de dicha inserción
también se originan aspectos como ser falta de
espacios adecuados para el desempeño de funcio-
nes, el buen relacionamiento con compañeros, así
como, el desequilibrio entre los roles familiar y
laboral, ocasionando la presencia de Estrés Labo-
ral y el empleo de Estrategias de Afrontamiento,
generando así el interés por la investigación de
ambas variables en la mayoría de los casos de
manera individual, siendo así, un desafío el análi-
sis de su relación ya que, por ejemplo la acumula-
ción de denuncias de violencia u horarios exten-
sos de trabajo, relación entre grupos de servicio,
de Policías Femeninas de la F.E.L.C.V., ocasiona
la presencia de Estrés Laboral definida como “un
conjunto de situaciones físicas y/o psicosociales
de carácter estimular que se dan en el trabajo y
que con frecuencia producen tensión y otros re-
sultados desagradables para la persona. Son por
tanto, elementos recurrentes de carácter estimular
ante las cuales las personas suelen experimentar
Estrés y consecuencias negativas”, asimismo, a
través de investigaciones la Organización Interna-
cional del Trabajo OIT define al Estrés Laboral
como “la reacción que puede tener el individuo
ante exigencias y presiones laborales que no se
ajustan a sus conocimientos y capacidades, y que
ponen a prueba su capacidad de afrontar la situa-
ción” proponiendo así, la clasificación de tipos de
estresores que juntamente con otras investigacio-
nes y análisis teórico se agrupan en tres dimen-
siones: 1) estresores organizacionales que con-
templan: clima, estructura y territorio organiza-
cional; 2) estresores individuales: territorio e in-
fluencia del líder; y 3) estresores grupales: falta de
cohesión y respaldo de grupo.
De esta manera, el individuo que presente niveles
de Estrés Laboral genera la utilización como me-
dio de equilibrio de Estrategias de Afrontamiento
término propuesto por Lázarus y Folkman repre-
sentantes máximos, quienes lo definen como
“conjunto de respuestas ante una situación estre-
sante ejecutadas para reducir de algún modo las
cualidades adversas de tal situación” (Salanova, et
al., 2005); que de acuerdo a su teoría el individuo
determina el significado de un evento, sin dicha
apreciación no hay experiencia de estrés, y duran-
te este proceso hay dos niveles:
- “Apreciación primaria: es la determinación
por parte del sujeto del carácter de un deter-
minado evento para él como irrelevante, be-
nigno o negativo. Esta puede estar influida
por variables personales como creencias,
compromisos, etc., y ambientales como fami-
liaridad del evento, probabilidad de ocurren-
cia y naturaleza de sus resultados.
- Apreciación secundaria: se da después que
un determinado evento ha sido apreciado
primariamente como negativo. Se refiere a la
evaluación de los recursos disponibles de
afrontamiento a nivel físico y psicológico; en
caso de que los recursos sean insuficientes
son considerados como necesidades.” (La-
zarus & Folkman, 1986)
Asimismo, investigaciones realizadas con base en
el aporte de Lázarus & Folkman (1986), quienes
proponen tres Estilos de Afrontamiento y que en
la adaptación española de su inventario realizado
por Cano, Rodríguez y García en el 2007 se pro-
ponen ocho Estrategias de Afrontamiento que
son: 1) Afrontamiento Cognitivo: resolución de
24 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
problemas, reestructuración cognitiva, pensa-
miento desiderativo y autocrítica; 2) Afrontamien-
to Afectivo: apoyo social y expresión emocional y;
3) Afrontamiento Conductual: evitación de pro-
blemas y retirada social.
Siendo así, de interés el determinar aquellos indi-
cadores percibidos como estresores y los tipos de
estrategias utilizadas por las Policías Femeninas.
Así como el nivel de relación entre el Estrés Labo-
ral y las Estrategias de Afrontamiento presente en
las Policías Femeninas destinadas en la Platafor-
ma de Atención de la F.E.L.C.V.
MATERIALES Y METODOS
Método y variables
El estudio se realizó bajo el enfoque de la Investi-
gación Cuantitativa que contempla un diseño de
investigación, recolección de datos y análisis esta-
dísticos mediante el Tipo de Investigación corre-
lacional, ya que se tiene al Estrés Laboral, y Estra-
tegias de Afrontamiento como variables; de las
cuales se estudiaron los niveles en que se presen-
tan y correlacionan.
El Diseño de Investigación implementado fue no
experimental de tipo transversal correlacional,
donde se estableció la relación entre Estrés Labo-
ral y Estrategias de Afrontamiento, identificando
las características de ambas variables así como el
grado de correlación.
Área de estudio
La población elegida para la investigación fueron
Policías Femeninas encargadas de la Plataforma
de Atención de la Fuerza Especial de Lucha Con-
tra la Violencia, Unidad Especializada de la Poli-
cía Boliviana específicamente la Dirección Depar-
tamental La Paz, que de acuerdo a datos obteni-
dos por la Unidad cuenta con un número de 40
Policías Femeninas destinadas al área de servicio
y recepción de casos en la Plataforma de Aten-
ción, cumpliendo un turno de 24 horas y que es-
tán divididos en tres grupos (datos obtenidos en
el año 2013).
Sujetos
La población que se estudió es una sola muestra
de tipo no probabilística de sujetos tipo, confor-
mado como un solo grupo; tomando en cuenta
como principal característica en común el perte-
necer a la Policía Boliviana y cumplir funciones
laborales dentro de la F.E.L.C.V., estando en con-
tacto permanente con la sociedad. La muestra
estuvo conformada por 40 sujetos, construida a
través de la técnica de muestra definida por crite-
rios del investigador. Siendo así Policías Femeni-
nas destinadas en la F.E.L.C.V., de diferente tiem-
po de permanencia en la Unidad, así como dife-
rencia en rango; en su mayoría madres de familia;
teniendo como característica principal el contacto
permanente con la sociedad por estar a cargo de
la sala de Plataforma de Atención, lugar donde se
reciben las denuncias de Violencia Intrafamiliar
y/o Doméstica, quienes después de la Resolución
Administrativa de la Policía Boliviana Nº01109/13
de la Gestión 2013 pasan a ser Investigadoras.
Instrumentos
Escala de Estrés Laboral u Organizacional:
Publicado por la OIT-OMS consta de veinticinco
ítems agrupados en siete criterios que generan
estrés, con un patrón de respuesta con escala de
tipo Likert comprendidas de 0 como condición
nunca, a 6 como condición siempre tomando en
cuenta que a mayor puntaje mayor nivel de Estrés
Laboral general. Permite también determinar ni-
vel de Estrés Laboral de forma específica a través
de 7 sub grupos mencionados en la introducción,
con la puntación directamente proporcional.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 25
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
La puntuación valorada total es de 150 puntos,
considerando puntuaciones entre 1 y 55 como
Nivel Bajo, puntuación 55 a 87 como Nivel Medio
o Moderado y de 88 a 150 como Nivel Alto de
Estrés Laboral u Organizacional a nivel general.
Inventario De Estrategias de Afrontamiento
(Adaptación Española)
Presenta una estructura jerárquica compuesta por
ocho Estrategias de Afrontamiento mencionadas
en la introducción respondidas a través de la na-
rración de una situación estresante, esta prueba
ha sido diseñada como resultado de la adaptación
del Inventario de Estrategias de Afrontamiento de
Lázarus y Folkman (2007), esta adaptación fue
realizada por Cano, Rodríguez y García en Espa-
ña durante el año 2007, conformando 40 ítems;
según una escala tipo Likert que presenta opcio-
nes de respuesta desde 0 condicionado como na-
da, hasta 4 condicionado como totalmente. Al
final de la escala se contesta a un ítem adicional
Nº 41 acerca de la Autoeficacia percibida del
afrontamiento («¿En qué grado manejó adecua-
damente la situación?»). Siendo su puntuación
directamente proporcional a la frecuencia de ma-
nejo o utilización de Estrategias de Afrontamien-
to, donde la sumatoria de los 40 ítems dan un to-
tal de 160 puntos, más 4 puntos adicionales del
ítem 41. Considerando puntuaciones entre 1 y 70
como Nivel Bajo, puntuación 71 a 110 como Nivel
Medio o Moderado y de 111 a 160 como Nivel
Alto en cuanto a la utilización de Estrategias de
Afrontamiento general.
En cuanto a la narración sobre la situación estre-
sante su corrección es de tipo cualitativa y, de-
pendiendo de los indicadores identificados serán
agrupados a criterio del evaluador en una clasifi-
cación organizada.
Confiabilidad, Validez y Procedimiento
Cálculo de confiabilidad: Existen diversos proce-
dimientos para calcular la confiabilidad de un
instrumento de medición. Todos utilizan fórmulas
que producen coeficientes de confiabilidad. Estos
coeficientes pueden oscilar entre 0 y 1; dónde un
coeficiente de 0 significa nula confiabilidad y 1
representa un máximo de confiabilidad (confiabi-
lidad total). Entre más se acerque el coeficiente a
cero (0), hay mayor error en la medición.
En este sentido para ambos instrumentos el coefi-
ciente Spearman fue igual a 0,82, que sugiere con-
fiabilidad en los instrumentos para la medición de
las variables hasta en un 82%.
Validez
En cuanto a la validación de los instrumentos se
utilizó el tipo de “validez de expertos”, “que se
refiere en que aparentemente un instrumento de
medición mide la variable en cuestión de acuerdo
con expertos en el tema” (Hernández et al., 2010).
En este sentido para la validación de ambos ins-
trumentos en el contexto donde se realizó la in-
vestigación, se tomó en cuenta los siguientes crite-
rios:
Expertos en el tema: tomando en cuenta a tres
psicólogos que hayan observado la problemática
de la investigación en cuanto a la población selec-
cionada.
Los tres expertos tienen formación en Psicología,
siendo dos también Policías, desempeñando fun-
ciones laborales dentro de los Departamentos De
Psicología en la F.E.L.C.C. y F.E.L.C.V.. El tercer
experto también con formación en psicología
desempeñó funciones laborales dentro de la Poli-
cía Boliviana por más de diez años.
Los instrumentos fueron analizados en dos opor-
tunidades por los tres expertos seleccionados
quienes aprueban la aplicación de la prueba al ver
26 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
que el contenido, criterio y constructo conside-
rándolo como adecuado para la investigación y
para la medición de las variables en la población
seleccionada.
RESULTADOS
Se muestran los datos e información recogida en
el Trabajo de Campo, mismos datos que han se-
guido el procedimiento correspondiente, vale
decir la estructura de base de datos, tablas de fre-
cuencia, gráficos y cuadros; además del empleo
de procedimientos estadísticos en cuanto a la veri-
ficación de hipótesis y correlaciones, de acuerdo
al diseño de investigación correspondiente a la
investigación.
En lo que se refiere a datos generales, se obtuvo
como resultados que las Policías Femeninas desti-
nadas en la Plataforma de Atención en la
F.E.L.C.V. oscilan entre los 22 a 40 años lo cual
indica ser una población adulto joven; asimismo,
36 de las 40 Policías tienen conformado una fami-
lia estable y su tiempo de permanencia en la Uni-
dad Especializada varía de 1 a 5 años.
En cuanto al Nivel General de Estrés Laboral, se
aprecia que 20 policías, equivalente al 50% de la
muestra, tienen un Nivel Alto de Estrés Laboral
General considerando las puntuaciones directa-
mente proporcionales de la escala de entre 88 y
150 puntos. A su vez 16 Policías Femeninas que
corresponde al 40%, mantienen un Nivel de Estrés
Laboral general Moderado, entendiendo que ob-
tuvieron puntuaciones entre 55 y 87; y 4 Policías
Femeninas que implica el 10%, mantienen un Ni-
vel Bajo de Estrés Laboral, vale decir que obtuvie-
ron puntuaciones entre 1 y 55 en cuanto a la esca-
la de Estrés Laboral.
La Tabla 1 muestra la comparación de Niveles de
Estrés Laboral, Alto, Medio y Bajo en cuanto a las
Siete Dimensiones que evalúa el instrumento;
identificando aquellas Dimensiones donde se
concentra mayor número de Policías Femeninas
con Estrés Laboral Alto y con Nivel Medio enten-
Tabla 1: Niveles de Estrés Laboral en relación a las 7 dimensiones.
Dimensión Nivel alto Nivel Medio Total Nivel Bajo Total
Nº PF % Nº PF % % Nº PF % Nº PF
Clima Organi-
zacional 11 27% 23 58% 85% 6 15% 40
Estructura Or-
ganizacional 10 25% 24 60% 85% 6 15% 40
Territorio Or-
ganizacional 12 30% 23 57% 87% 5 13% 40
Territorio 16 40% 19 47% 87% 5 13% 40
Influencia del
Líder 12 30% 26 65% 95% 2 5% 40
Falta de Cohe-
sión 5 12% 31 78% 90% 4 10% 40
Respaldo de
Grupo 13 32% 23 58% 90% 4 10% 40
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 27
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
diendo que este nivel es considerado como riesgo
de pasar al Nivel Alto de Estrés Laboral (Tabla 1).
De esta manera, se observa en el Cuadro las com-
paraciones de los niveles de Estrés Laboral Alto,
Medio y Bajo en cuanto a las Dimensiones de
acuerdo al número de Policías Femeninas y sus
porcentajes correspondientes obtenidos como
resultados de sus puntuaciones al momento de la
aplicación del instrumento.
En primer lugar, se observa el número de Policías
Femeninas que están dentro del Nivel Alto de
Estrés Laboral, donde la concentración máxima en
porcentaje se encuentra dentro de las Dimensio-
nes Territorio Organizacional, Territorio, Influen-
cia del Líder y Respaldo de Grupo, considerando
que es la tercera parte de la muestra al estar por
encima del 30%, logrando así unos de los objeti-
vos de la presente investigación al determinar las
situaciones que ocasionan mayor nivel de Estrés
Laboral.
En segundo lugar, como se observa dentro del
Nivel Medio de Estrés Laboral se concentra gran
parte de la muestra, lo que da como resultado que
las Policías Femeninas dentro de este grupo están
en riesgo de incrementar su Nivel de Estrés a Al-
to; a su vez, las Dimensiones Estructura Organi-
zacional, Influencia de Líder y Falta de Cohesión,
son las que concentran la mayor proporción de
Policías Femeninas, con porcentajes por encima
del 60%.
De esta manera, considerando los porcentajes
tanto del Nivel Alto como del Medio se tiene que
por encima del 85% de la muestra se encuentra en
situación de riesgo o ya con Nivel Alto de Estrés
Laboral en alguna de las dimensiones, siendo In-
fluencia del Líder, Falta de Cohesión y Respaldo
Tabla 2: Niveles de Utilización de Estrategias de Afrontamiento en relación a las 7 dimensiones.
Dimensión/ Tipo
de Estrategia de
Afrontamiento
Nivel Bajo Nivel Medio Total Nivel alto Total
Nº PF % Nº PF % % Nº PF % Nº PF
Resolución de
Problemas 2 5% 25 63% 68% 13 32% 40
Reestructuración
Cognitiva 19 48% 16 40% 88% 5 12% 40
Pensamiento De-
siderativo 2 5% 7 18% 23% 31 77% 40
Autocrítica 10 25% 26 65% 90% 4 10% 40
Apoyo Social 9 29% 16 52% 81% 6 19% 40
Expresión
Emocional 8 20% 21 53% 73% 11 27% 40
Evitación de Pro-
blemas 14 35% 22 55% 90% 4 10% 40
Retirada Social 13 33% 25 62% 95% 2 5% 40
28 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
de Grupo las Dimensiones que producen mayor
nivel de Estrés Laboral en las Policías Femeninas
de la F.E.L.C.V..
En cuanto a las Estrategias de Afrontamiento se
obtuvo que 21 Policías Femeninas que corres-
ponde al 52%, mantiene un uso de las Estrategias
de Afrontamiento medianamente considerable
ante una situación de Estrés Laboral con puntua-
ciones entre 71 a 110 puntos, a su vez 15 Policías
Femeninas equivalente al 38% obtuvieron entre 1
y 70 puntos, que indica un Nivel Bajo de utiliza-
ción, y 4 Policías Femeninas que son el 10% man-
tiene un Nivel Alto con puntuaciones entre 111 y
160 puntos.
Asimismo, en cuanto a la utilización de los ocho
tipos de Estrategias de Afrontamiento se presenta
el cuadro de la Tabla 2.
En primer lugar, se observa el número de Policías
Femeninas que están dentro del Nivel Alto de
utilización de Estrategias de Afrontamiento, don-
de la concentración máxima en porcentaje se en-
cuentra dentro de las Dimensiones Pensamiento
Desiderativo con un 77% de la muestra, seguido
del 32% que utiliza Resolución de Problemas y el
27% que utilizan la Expresión Emocional. En se-
gundo lugar, como se observa dentro del Nivel
Medio se concentra gran parte de la muestra, lo
que da como resultado que las Policías Femeninas
dentro de este grupo están en riesgo de dejar la
utilización de las Estrategias para afrontar situa-
ciones de Estrés Laboral, sin embargo, Estrategias
como ser resolución de problemas, autocrítica y
retirada social son las que concentran mayor por-
centaje de utilización en cuanto a Nivel Medio y
que no son totalmente utilizadas en cada situación
estresante.
Y, en tercer lugar se tiene aquellas dimensiones
que son las menos utilizadas como ser Reestruc-
turación Cognitiva, Evitación de Problemas y Re-
tirada Social, ya que concentran los mayores por-
centajes en cuanto al Nivel Bajo de utilización. Por
último, se observaría entonces que las dimensio-
nes que concentran porcentajes de utilización de
Tabla 3: Clasificación y niveles de la narración estresante en el trabajo F.E.L.C.V.
Clasificación de Patrón de respuesta Nº Policías
Femeninas %
Tipo de Estrés La-
boral
1. Cambios en la estructura de la FELC-V
(Implementación de nuevo sistema de acuerdo
a la Ley Nº 348)
3 7% Estructura Organi-
zacional
1. Incremento de denuncias atendidas debido
al número de personal
(Acumulación de trabajo- presión)
12 21% Territorio
2. Falta de capacitación y orientación sobre las
funciones bajo la nueva Ley Nº348 (Temor a
equivocaciones)
16 28% Territorio y Estruc-
tura Organizacional
3. Temor y falta de confianza hacia superiores
(Temor a equivocaciones o sanciones) 14 24% Influencia del Líder
4. Falta de recursos materiales
(Dotación de material de escritorio) 6 10%
Estructura Organi-
zacional
5. Descuido de actividades paralelas al ámbito
laboral
(Familiar – Social – Personal)
6 10% Tipos de estresores
no Laborales
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 29
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Bajo a Medio son consideradas como riesgo de
dejar de ser la opción ante una situación de Estrés
Laboral.
En cuanto a la narración estresante se obtuvo los
datos expuestos en la Tabla 3.
Como se observa un 28% de la muestra al no con-
tar con el conocimiento total de dichas funciones
incrementan su Estrés Laboral por temor a equi-
vocaciones. Esta clasificación correspondería a su
vez al tipo de Estrés Laboral –territorio por con-
templar funciones individuales.
El 24% de las Policías Femeninas del total de la
muestra, mencionan como situación estresante
Temor y falta de confianza hacia superiores; si-
tuación que desencadena Estrés Laboral por te-
mor a equivocaciones y posibles sanciones al no
poder contar con la confianza necesaria para dar
las explicaciones respectivas ante cualquier situa-
ción. Esta clasificación corresponde al tipo de Es-
trés Laboral - Influencia del Líder, por estar den-
tro del tipo de relacionamiento con Jefes Superio-
res.
También, se tiene que el 21% de la muestra total
percibe como situación estresante a la Nº 2 Incre-
mento de denuncias atendidas, que, de acuerdo a
las funciones nuevas y el tiempo determinado
para todo el proceso, perciben que el número de
Policías Femeninas debería ser incrementado, ya
que la acumulación de trabajo y presión por el
tiempo ocasionaría estrés Laboral en ellas. Esta
clasificación correspondería a dos tipos de Estrés
Laboral, a Territorio por contemplar funciones
individuales y, Estructura Organizacional, ya que
involucra a la Estructura de la F.E.L.C.V. en cuan-
to a Recursos Humanos y demás clasificaciones en
menores porcentajes.
Con estos datos encontrados se dio cumplimiento
a los objetivos planteados en la investigación, de-
terminando los niveles generales en cuanto a la
presencia de Estrés Laboral y utilización de Estra-
tegias de Afrontamiento; así como la determina-
ción de situaciones más estresantes y aquellas
situaciones percibidas como estresantes por las
Policías Femeninas, del mismo modo aquellas
estrategias mayormente y menormente utilizadas.
En cuanto a la validación de la hipótesis propues-
ta se realizó el análisis a través de la Correlación
de Pearson y docimasia de hipótesis. La correla-
ción de Pearson es, según Hernández et al., (2010),
una prueba estadística que permite analizar la
relación entre dos variables medidas en un nivel
por intervalos o de razón; y cuya simbolización es
“r”. Este tipo de análisis permite aprobar Hipóte-
sis cuyos resultados puede variar de -1.00 como
correlación negativa perfecta, a +1.00 como corre-
lación positiva perfecta, análisis que se realiza a
través de una regresión lineal (Gráfica 1).
Estos datos muestran que las variables Estrés La-
boral y Estrategias de Afrontamiento se encuen-
tran relacionadas, ya que presentan un r negativo
de –0,68, entre los Niveles de Medición Negativa
Media que es - 0,50 a Negativa Considerable que
es – 0,75; de esta manera se define que su Nivel de
Correlación es de Negativa Media a Considerable.
En cuanto a la docimasia de hipótesis entendida
como el análisis de los indicadores con los resul-
y = -0,4409x + 120,71R² = 0,4632R= -0,6806
0
20
40
60
80
100
120
0 50 100 150
Estr
és L
abo
ral
Estrategias de Afrontamiento
Gráfica 1: Correlación de estrategias vs. estrés laboral
30 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
tados encontrados, se halló que de 15 indicadores
presentados 9 aprueban la hipótesis, mientras que
6 lo rechazan, eso significa una aprobación alre-
dedor del 60%. Lo que indica que se estaría acep-
tando la hipótesis afirmativa y rechazando la hi-
pótesis nula y alternativa que se presentó en la
investigación de la Tesis de Grado.
Con este análisis queda probada y aceptada la
Hipótesis de Investigación:
Hi: A mayor nivel de Estrés Laboral, menor
nivel en el manejo de Estrategias de Afron-
tamiento; afectando de esta manera su
desempeño laboral.
Se descartan las hipótesis Nula y Alternativa;
quedando así comprobado que mientras se in-
cremente los niveles de Estrés Laboral en las Poli-
cías Femeninas, menor será la utilización de Estra-
tegias de Afrontamiento o viceversa. Además de
haber encontrado otros datos que no son dejados
de lado y que son explicados en las conclusiones
del presente artículo.
DISCUSIÓN
Si bien se determinaron los objetivos planteados y
comprobado la hipótesis propuesta, no se puede
dejar de lado las características de los resultados
encontrados, ya que la investigación realizada
muestra que gran parte de la población estudiada
mantiene niveles de riesgo y altos de Estrés Labo-
ral, lo cual obstaculiza el desempeño de sus fun-
ciones generales empezando por la utilización de
Estrategias de Afrontamiento para hacer frente a
situaciones dentro del trabajo, de igual manera se
tiene que la transición de Brigada de Protección a
la Familia a F.E.L.C.V., incrementó en sobremane-
ra dichos niveles, por las demandas de orienta-
ción y capacitación por parte de las Policías Fe-
meninas acerca del manejo de la ley Nº 348 que
garantiza a las mujeres una vida libre de violen-
cia.
Entendiendo de esta manera, que el individuo
ante cualquier cambio desconocido incrementa su
estrés ya sea dentro del campo laboral o cualquier
otro, lo cual dificulta su buen desenvolvimiento
obstruyendo la aplicación de las diferentes Estra-
tegias de Afrontamiento para hacer frente a tales
situaciones.
Dando así la inmediata idea que para cualquier
cambio dentro de la estructura, en este caso Poli-
cial y en las diferentes Unidades que compone la
misma, se deben fortalecer con actividades que
dispersen dudas, capacitaciones y nuevas funcio-
nes que serán implementadas para así proporcio-
nar los elementos necesarios a las Policías Feme-
ninas y así puedan cumplir con sus actividades
sin ocasionar cambios abruptos manejando los
niveles de estrés.
Por otra parte, el fomento de actividades paralelas
de distracción, relaciones entre pares y con supe-
riores y subordinados, son de igual importancia al
momento de despeñar las funciones en un día de
servicio, manejo de empatía con los camaradas y
apoyo intra e intergrupal impulsaría el desempe-
ño al momento de la atención a una víctima de
violencia, ya que estas características reducirían el
nivel de Estrés Laboral y potenciaría la utilización
de las Estrategias de Afrontamiento por parte de
las Policías Femeninas.
Una vez ya aplicado estos instrumentos y con los
resultados encontrados también se podría exten-
der la aplicación a diferentes Unidades Policiales
y a policías de ambos sexos para enriquecer las
investigaciones y determinar en una población
más numerosa aquellas situaciones estresantes
percibidas por policías y potenciar a través de
programas la utilización de las estrategias de
afrontamiento, incluso a descubrir nuevas estra-
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 31
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
tegias que sean utilizadas por los mismos fuera de
las propuestas y analizadas en esta investigación.
De esta manera, se puede evidenciar que esta in-
vestigación así como los resultados encontrados
es un aporte importante para la Policía Boliviana,
ya que a través de investigaciones de este tipo se
pueden proyectar programas, capacitaciones y
talleres en beneficio de los policías.
CONCLUSIONES
Respecto a los objetivos planteados, la investiga-
ción logró conocer los Niveles de Estrés Laboral
presente en Policías Femeninas de la F.E.L.C.V.,
siendo considerado como Nivel Alto, lo cual indi-
ca que las policías destinadas a la atención de ca-
sos e investigación de los mismos, no sólo presen-
tan niveles de Estrés por el constante contacto con
la sociedad como indica la REFERENCIAS revi-
sada, si no que a la vez presentan Estrés de tipo
Laboral.
También se pudo determinar aquellas situaciones
predominantes que generan Estrés Laboral en las
Policías Femeninas, siendo situaciones a nivel de
territorio y respaldo de grupo donde se concentra
el mayor porcentaje de Policías Femeninas con
Nivel Alto de Estrés Laboral. Lo cual da a enten-
der que situaciones como falta de ambiente pri-
vado y control de trabajo individual; así como
ausencia de apoyo de cualquier tipo, por parte del
Grupo de Servicio al que pertenecen incrementan
sus Niveles de Estrés Laboral.
Influencia del Líder y Territorio Organizacional
también incrementan el Nivel de Estrés Laboral, a
través de situaciones como ser la relación Supe-
rior- Subordinado, el apoyo y respeto por parte de
Superiores, así como el ambiente en cuanto a in-
fraestructura y lugar de trabajo de la F.E.L.C.V.,
podría tener también la responsabilidad de los
Niveles Altos de Estrés Laboral en la tercera parte
de las Policías Femeninas que atienden denuncias
de violencia en la Plataforma de Atención.
Si bien, se determinó las dimensiones que generan
Nivel Alto también se identificó aquellas dimen-
siones que ocasionan un Nivel Medio o Moderado
de Estrés Laboral que es considerado en la presen-
te investigación como Nivel de Riesgo por poder
incrementar a Nivel Alto, de esta manera se tiene
que la dimensión Falta de Cohesión, produce un
Nivel de Riesgo Moderado de Estrés Laboral en
las Policías Femeninas, entendiendo que la ausen-
cia apoyo por parte del Grupo de Servicio así co-
mo, el sentido de pertenencia al mismo, ocasiona
cierto nivel de Estrés Laboral.
De igual manera, la Estructura Organizacional e
influencia del Líder que contempla la organiza-
ción en cuanto flujo de atención y organización de
la F.E.L.C.V. como Unidad Especializada, así co-
mo el apoyo y la relación con los Superiores, oca-
sionaría en la mayoría de las Policías Femeninas
un Nivel Moderado o Medio de Estrés Laboral,
debido a los cambios estructurales por la imple-
mentación de la Ley Nº 348 que garantiza a la
mujer una vida libre de violencia además de la
resolución Administrativa Nº0109/13 de la Policía
Boliviana.
De igual manera, se puede concluir que la In-
fluencia del Líder, que contempla la relación con
Superiores es la Dimensión concerniente a Estre-
sores Individuales que ocasionaría Estrés Laboral
en casi la totalidad de las Policías Femeninas en
cuanto a Medio o Alto. A su vez la Falta de Cohe-
sión y Respaldo de Grupo que se relaciona con el
apoyo y la relación con el Grupo de Servicio, Di-
mensiones que pertenecen a Estresores Grupales
ocasionaría también en gran parte de ellas Niveles
de Estrés Laboral de Medio a Alto.
Por otra parte, la investigación logró identificar
aquellas Estrategias de Afrontamiento que no son
32 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
utilizadas por las Policías Femeninas, siendo la
Reestructuración Cognitiva encargada de ver el
aspecto positivo antes de una situación estresante,
la Estrategia que las Policías Femeninas no la uti-
lizan manteniéndola en un nivel Bajo; al igual
que, Evitación de Problemas y Retirada Social,
que expresan el escape ante el problema y aisla-
miento de interacción social son las menos utili-
zadas por la tercera parte de las Policías Femeni-
nas.
Si bien son estas las Estrategias de Afrontamiento
con Nivel Bajo también existen las que mantienen
un Nivel Medio o Moderado de uso como ser la
Autocrítica, Resolución de Problemas y Retirada
Social encargadas del autoanálisis, búsqueda de
soluciones y aislamiento, las estrategias que son
utilizadas de forma moderada.
De esta manera, si se toma en cuenta los Niveles
Bajo y Medio se concluye que las Estrategias Evi-
tación de Problemas y Retirada Social que corres-
ponde a la Dimensión Afrontamiento Conductual,
son las menos utilizadas al mantener una Nivel
hasta Moderado o Medio. A su vez, la Autocrítica
y Reestructuración Cognitiva, que pertenecen al
Afrontamiento Cognitivo y Apoyo Social que es
del tipo afrontamiento afectivo son de igual ma-
nera utilizadas moderadamente.
Las Hipótesis planteadas en la presente investiga-
ción fueron analizadas y validadas tanto de forma
cualitativa como cuantitativa. En lo que se refiere
a la primera se estableció a través de la docimasia
que las Policías Femeninas si mantienen un Nivel
de Moderado a Alto en cuanto a Estrés Laboral y
que la utilización de casi todas las Estrategias de
Afrontamiento son de Moderado a Bajo.
A su vez, en cuanto a la prueba de Correlación de
Pearson se concluye que si existe la relación entre
el nivel alto de Estrés Laboral y en Nivel Bajo de
utilización de Estrategias de Afrontamiento al
tener un resultado de R= -0,68, teniendo de esta
manera una Correlación Negativa de Media a
Considerable. Quedando así aprobada la Hipóte-
sis de Investigación que A mayor nivel de Estrés
Laboral, menor nivel en el manejo de Estrategias
de Afrontamiento; afectando de esta manera en su
desempeño laboral.
La investigación si bien se guió por el cumpli-
miento de los objetivos y verificación de hipótesis,
también encontró otros datos importantes que no
pueden ser dejados de lado, mismos que demues-
tran que aquellas policías que ya tienen confor-
mado un hogar con hijos son las que presentan
Nivel Alto de Estrés Laboral y a su vez son las
que utilizan Estrategias de Afrontamiento en un
Nivel Bajo.
También, aquellas Policías Femeninas que tienen
menor tiempo de permanencia siendo indiferente
su estado civil son la que presentan Niveles Altos
de Estrés Laboral y Nivel Bajo en uso de Estrate-
gias de Afrontamiento. Estos datos de ambos re-
sultados encontrados apoyan una vez más la Hi-
pótesis de Investigación.
Por otra parte, en cuanto a las narraciones reali-
zadas por las Policías Femeninas se puede con-
cluir que la falta de capacitación, así como temor
y falta de confianza hacia superiores y el incre-
mento de denuncias debido a poco personal, fue-
ron los factores percibidos como estresantes, en su
mayoría, debido a la implementación de la nueva
ley Nº 348; factores que se pueden relacionar con
Estructura Organizacional e Influencia del Líder
en cuanto a dimensiones de Estrés Laboral.
Concluyendo de esta manera, que las Policías
Femeninas que presentan Estrés Laboral no utili-
zan adecuadamente las Estrategias de Afronta-
miento, afectando su desempeño general en la
F.E.L.C.V., por lo que es pertinente la aplicación
de políticas de intervención para modificar la
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 33
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
estructura de la Unidad Policial brindando un
clima laboral estable a las Policías Femeninas de-
mostrando de esta manera la importancia, signifi-
cancia y viabilidad de esta investigación, siendo
importante que todos los resultados encontrados
no se los considere como un aspecto privado o
aislado, al contrario podría ser el impulsor de la
creación de una acción planificada desde el Alto
Mando Policial para la socialización de los pro-
blemas presentes en las diferentes Unidades, así
como la introducción de soluciones teniendo co-
mo resultado el bienestar general del personal
Policial Femenino en especial de la F.E.L.C.V. y su
buena interacción con la sociedad.
REFERENCIAS
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ción Española del Inventario de Estrate-
gias de Afrontamiento”. España
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de Afrontamiento: El Rol Modulador de
la Autoeficacia Profesional”: España.
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34 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
NOTA TÉCNICA - BALÍSTICA
VELOCIDAD INICIAL DE PROYECTILES 9 mm DE CARTUCHOS
ENSAMBLADOS EN FÁBRICA vs. RECARGADOS
ARTESANALMENTE
Tcnl. DEAP. Rubén Gemio B.1; Sbtte. Igor Gutierrez1 & R. Luna-Barrón.2
1División Balística, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. 2 Dpto. Inv. Científica, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. [email protected]
RESUMEN
Se analizó la relación entre la velocidad inicial (VI) de proyectiles 9 mm de cartuchos ensamblados en
fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC), con sus respectivos pesos y dimensiones. Aunque la VI
de FAB es ligeramente mayor a REC, la comparación de promedios muestra paralelismo en el diseño y
en la VI de los proyectiles, no obstante los REC presentan mayor desviación típica que FAB para sus va-
riables. La correlación de la masa del cartucho, de la vaina, del proyectil, de la carga de pólvora, de la
longitud del cartucho y de la vaina, del diámetro de la vaina y del proyectil (calibre) con la VI inicial del
mismo, muestra que no existe dependencia lineal significativa. Se ha probado estadísticamente que exis-
ten diferencias significativas entre cartuchos FAB y REC. Se sugiere incluir variables de composición
química de carga, material del proyectil y elementos mecánicos del arma.
PALABRAS CLAVE: Velocidad inicial de proyectiles, carga de pólvora, cartuchos recargados.
ABSTRACT
The relationship between the initial speed of 9 mm bullets of cartridges assembled in factory (FAB) and
refilled by hand (REC), with their weights and dimensions was analyzed. Although FAB’s VI is slightly
higher than REC, the comparison of means suggest parallel design and similar bullet’s initial speed,
however REC present greater standard deviation tan FAB for its variables. The correlation of mass of the
cartridge, the sheath, the projectile and of the powder charge, the length of the cartridge and sheath, the
diameter of sheath and projectile (caliber) with the projectile initial speed, shows no significant linear
dependence. It has been proven significant statistically differences between FAB and REC cartridges. It is
suggested to include in future other variables like the chemical composition of load, construction materi-
al and mechanical weapon elements.
KEY WORDS: Initial projectile speed, gunpowder load, refilled firearm cartridges.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 35
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
INTRODUCCIÓN
Balística es la ciencia que trata con el movimiento
de los proyectiles. Técnicamente se refiere al estu-
dio de la trayectoria de un proyectil disparado
por un arma de fuego, su vuelo por el aire y su
impacto en el blanco u objetivo. No obstante, des-
de Calvin Goddard en la década de 1920, el tér-
mino “balística” se emplea comúnmente para la
“identificación científica de armas de fuego”, me-
diante el cotejo con proyectiles recuperados du-
rante una investigación criminal (Stelle, 2008).
Autores modernos dividen a la balística en inte-
rior, exterior y de efectos, siendo su objeto de es-
tudio respectivo la propulsión, el vuelo atmosféri-
co y el impacto (McCoy, 2005). Varios factores
influyen en el vuelo atmosférico del proyectil, que
se inicia el momento en que abandona la boca de
cañón del arma con determinada velocidad inicial
(VI), misma que puede estar afectada por factores
como el coeficiente balístico, la forma y masa del
proyectil, la carga de pólvora, el calibre, la longi-
tud del cartucho y otros (Carlucci & Jacobson,
2007).
El presente ensayo comparó la VI de proyectiles 9
mm ensamblados en fábrica (FAB) y recargados
artesanalmente (REC), con la masa de su respeti-
vo cartucho, su vaina, su proyectil, su carga de
pólvora, longitud del cartucho y vaina, y con su
diámetro (calibre real) y el de la vaina (Tablas 1 y
2).
MATERIALES Y MÉTODOS
Empleando un arma de fuego marca NNNN, se
realizaron 28 disparos con cartuchos originales de
fábrica (FAB) de la marca mexicana “Águila Am-
munition” y 30 disparos con cartuchos recargados
artesanalmente (REC) por personal de tiro del
“Club Hípico Los Sargentos” de La Paz, todos
ellos de calibre nominal 9 mm.
Cada cartucho fue pesado en una balanza digital
“OHAUS Adventurer” y medido con una regla
vernier digital “TRUPPER” para determinar su
longitud y calibre reales. Durante el disparo se
midió la VI del proyectil con un cronógrafo
“PACT Professional XP” de dos parantes.
Cada proyectil disparado y su vaina respectiva
fueron recuperados, pesados y medidos. La masa
aproximada de la carga de pólvora fue deducida
de las masas del cartucho, la vaina y el proyectil.
Los datos se compilaron y analizaron con estadís-
ticos de correlación.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Las Tablas 1 y 2 resumen los datos obtenidos con
los cartuchos originales y recargados respectiva-
mente. Para elaborar las Gráficas 1 y 2, se ordena-
ron los datos de las Tablas 1 y 2 de forma ascen-
dente en relación a la Velocidad Inicial (VI) de los
proyectiles disparados.
La VI de los proyectiles de cartuchos recargados
artesanalmente (REC) mostró mayor variación
entre disparos que los cartuchos de fábrica (FAB).
El promedio de VI para FAB fue de 280,2 m/s,
apenas 2,75% por encima de REC (272,5 m/s). No
obstante, la desviación estándar de FAB de 12,4
m/s fue menor a los 27,2 m/s de REC, que es
219.4% la de FAB. La carga de pólvora promedio
para FAB fue de 460 mg y para REC de 411 mg
(diferencia del 10,6%), con desviaciones respecti-
vas de 45 y 93 mg (diferencia de 207,0%) respecti-
vamente, mostrando similar comportamiento al
de VI (Tablas 1 y 2).
Esto sugiere a primera vista una posible relación
directa entre la VI del proyectil y la carga de pól-
vora en su cartucho, no obstante los datos de co-
rrelación mostrarán más adelante que no es así
(Gráfica 5).
36 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Tabla 1. Datos de 28 disparos con cartuchos 9 mm ensamblados en fábrica (FAB). Todas las variables se
determinaron experimentalmente excepto la carga de pólvora (*), que se dedujo matemáticamente a
partir de las masas del cartucho, antes, y de vaina y proyectil, después del disparo.
Cartucho (g) Vaina (g) Proyectil (g)Carga
(mg x100)Cartucho Vaina Vaina Proyectil
O25 26,31 12,48 3,95 8,01 5,22 29,46 18,78 9,55 9,00
O27 26,34 12,57 4,02 8,01 5,40 29,44 18,89 9,25 8,93
O30 26,44 12,58 4,01 8,01 5,60 29,57 18,53 9,46 9,02
O28 26,46 12,55 4,01 8,03 5,05 29,88 18,99 9,57 8,98
O22 26,49 12,47 4,02 8,03 4,15 29,46 18,75 9,68 8,99
O21 26,75 12,48 4,02 8,03 4,27 29,37 18,90 9,77 8,91
O11 26,91 12,47 4,00 8,04 4,26 29,26 18,84 9,65 9,10
O24 26,96 12,48 4,04 8,03 4,06 29,47 18,80 9,80 9,03
O2 27,23 12,50 3,99 8,01 5,01 29,38 18,74 9,80 8,99
O26 27,53 12,46 4,01 8,02 4,26 29,47 18,54 9,54 9,03
O10 27,54 12,48 4,01 7,99 4,76 29,32 18,85 9,66 9,02
O9 27,74 12,50 4,02 8,01 4,70 29,32 18,83 9,68 8,90
O12 27,82 12,48 3,99 8,01 4,82 29,67 18,88 9,67 9,17
O13 27,83 12,46 4,02 8,07 3,71 29,11 18,90 9,80 9,01
O23 27,89 12,47 4,01 8,00 4,56 29,35 18,98 9,65 9,02
O5 28,13 12,48 3,97 8,03 4,82 29,33 18,75 9,78 9,01
O6 28,21 12,50 4,01 8,07 4,23 29,28 18,95 9,79 9,02
O29 28,27 12,56 4,02 8,02 5,15 29,49 18,86 9,23 9,01
O7 28,42 12,50 4,03 8,05 4,18 29,43 18,85 9,79 9,01
O3 28,82 12,51 4,02 8,05 4,44 29,28 18,92 9,77 9,03
O14 28,93 12,51 4,02 8,03 4,61 29,27 18,90 9,67 9,10
O19 29,10 12,47 3,97 8,03 4,66 29,30 18,84 9,66 8,91
O17 29,28 12,51 3,97 8,07 4,67 29,52 18,90 9,66 8,98
O4 29,34 12,55 4,01 8,07 4,73 29,34 18,78 9,73 9,05
O18 29,39 12,43 3,97 8,02 4,40 29,35 18,73 9,66 8,92
O16 29,75 12,50 4,02 8,10 3,83 29,33 18,90 9,66 8,90
O15 29,88 12,51 4,01 8,03 4,71 29,30 18,82 9,67 8,85
O1 30,92 12,46 3,98 8,04 4,40 29,46 18,83 9,78 8,93
Max 30,92 12,58 4,04 8,10 5,60 29,88 18,99 9,80 9,17
Promedio 28,02 12,50 4,00 8,03 4,60 29,40 18,83 9,66 8,99
Min 26,31 12,43 3,95 7,99 3,71 29,11 18,53 9,23 8,85
Desv (s) 1,24 0,04 0,02 0,03 0,45 0,15 0,11 0,15 0,07
Asimetría 0,39 0,74 -0,91 0,83 0,23 1,32 -1,34 -1,71 0,19
Diámetro (mm)Velocidad
(m/s x10)Código
Masa Longitud (mm)
*
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 37
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Tabla 2. Datos de 30 disparos con cartuchos 9 mm recargados artesanalmente (REC). Todas las variables
se determinaron experimentalmente excepto la carga de pólvora (*), que se dedujo matemáticamente a
partir de las masas del cartucho, antes, y de vaina y proyectil, después del disparo.
Cartucho (g) Vaina (g) Proyectil (g)Carga
(mg x100)Cartucho Vaina Vaina Proyectil
R2 21,93 12,138 3,83 7,89 4,11 28,88 18,76 9,69 8,92
R3 22,15 12,257 3,94 8,02 3,03 28,89 18,90 9,74 8,95
R13 25,18 12,507 4,12 8,06 3,23 28,60 18,80 9,76 9,02
R20 25,79 12,552 4,16 8,02 3,65 28,63 18,81 9,78 9,11
R14 25,88 12,601 4,16 8,08 3,65 28,76 18,88 9,64 9,10
R15 25,88 12,57 4,17 7,91 4,84 28,68 18,83 9,60 9,00
R19 26,01 12,533 4,19 8,02 3,22 28,73 18,90 9,71 8,98
R24 26,03 12,573 4,17 8,00 4,11 28,76 18,78 9,83 8,99
R22 26,11 12,57 4,14 7,95 4,80 28,69 18,88 9,80 9,15
R25 26,31 12,587 4,17 8,01 4,05 28,73 18,83 9,77 8,64
R27 26,34 12,57 4,16 8,06 3,48 28,64 18,82 9,75 8,87
R16 26,35 12,567 4,14 8,04 3,93 28,16 18,77 9,83 8,99
R21 26,36 12,561 4,14 7,99 4,30 28,68 18,84 9,62 9,03
R30 26,44 12,581 4,17 8,01 4,05 28,75 18,80 9,74 9,60
R28 26,46 12,545 4,17 7,99 3,81 28,65 18,80 9,65 9,30
R5 26,65 12,501 4,01 8,09 4,01 29,25 18,89 9,67 8,70
R17 27,06 12,587 4,17 7,97 4,43 28,63 18,81 9,62 8,95
R18 27,06 12,613 4,14 7,91 5,65 28,63 18,82 9,63 8,07
R26 27,53 12,579 4,16 7,96 4,56 28,66 18,80 9,81 8,24
R23 27,89 12,539 4,15 8,00 3,94 28,66 18,96 9,68 8,95
R4 27,96 12,396 3,96 8,05 3,88 29,71 18,82 9,65 8,88
R29 28,27 12,555 4,17 7,91 4,79 28,65 18,81 9,62 9,65
R7 28,78 12,502 4,02 8,07 4,12 29,30 18,85 9,72 9,11
R12 28,78 12,559 4,16 7,69 7,17 28,74 18,77 9,71 9,05
R6 28,92 12,241 3,94 8,04 2,70 28,87 18,90 9,73 8,98
R11 29,24 12,568 4,15 8,08 3,38 28,61 18,82 9,77 9,08
R8 29,37 12,09 3,73 7,81 5,48 28,77 18,80 9,71 8,95
R9 29,37 12,166 3,90 8,03 2,28 28,96 18,66 9,81 9,20
R10 29,37 12,474 4,02 8,03 4,22 29,32 18,82 9,73 9,12
R1 37,95 12,101 3,74 7,91 4,55 28,84 18,81 9,63 8,70
Max 37,95 12,61 4,19 8,09 7,17 29,71 18,96 9,83 9,65
Med 27,25 12,47 4,08 7,99 4,11 28,79 18,82 9,71 8,98
Min 21,93 12,09 3,73 7,69 2,28 28,16 18,66 9,60 8,07
Desvest (s) 2,72 0,16 0,13 0,09 0,93 0,28 0,06 0,07 0,31
Asimetría 1,77 -1,48 -1,42 -1,70 1,06 1,36 -0,18 0,04 -0,76
CódigoVelocidad
(m/s x10)
Masa Longitud (mm) Diámetro (mm)
*
38 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 39
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Para FAB, las masas del cartucho, proyectil y vai-
na, al igual que la longitud y diámetro de la vaina
más el diámetro del proyectil (calibre), guardan
relativa uniformidad; mientras que la longitud del
cartucho y la masa de carga (pólvora) son varia-
bles (Gráfica 1).
Para REC solo las masas del cartucho, proyectil y
vaina, así como el diámetro y longitud de la vai-
na, guardan relativa uniformidad; mientras que la
masa de carga (pólvora), al igual que la longitud
del cartucho y el diámetro del proyectil, son va-
riables (Gráfica 2).
La Gráfica 3 de dispersión radial de “promedios”
para las nueve variables comparadas, mostró una
distribución similar entre FAB y REC. Esto sugie-
re uniformidad en el diseño y estructura de los
cartuchos, así como en el comportamiento del
proyectil.
En contraste, la Gráfica 4 de “desviaciones están-
dar” muestra que las variables de REC están más
dispersas en torno a su media, especialmente la VI
y la masa de carga. Esto es coincidente con el po-
sible efecto que la manera artesanal de ensambla-
do de los cartuchos recargados (REC) puede tener
en su equivalencia o paridad, lo cual ha sido dis-
minuido con la automatización de fábrica (FAB).
Sin embargo, aunque los promedios sugieren si-
militud de diseño y comportamiento, al analizar
la correlación entre las ocho variables estudiadas
con la VI respectiva para FAB y REC, la depen-
dencia lineal (calculada mediante el estadístico
Pearson, Gráfica 5), sugiere un comportamiento
diferencial entre ambos tipos de cartuchos. Más
aún, indica que la variable más influyente sobre la
Gráfica 3. Dispersión radial del PROMEDIO de las variables estudiadas para cartuchos
ensamblados en fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC). VI = Velocidad Inicial.
40 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
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Gráfica 4. Dispersión radial de la DESVIACIÓN ESTÁNDAR de las variables estudiadas
para cartuchos ensamblados en fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC). VI = Velocidad Inicial.
Gráfica 5. Dispersión radial del índice de dependencia lineal PEARSON entre las variables
estudiadas y la VI de cartuchos de fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC).
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 41
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VI para FAB es la “masa del proyectil” (0,47) y el
“diámetro de la vaina” (0,31), mientras que para
REC la “masa de la carga” (0,19) y “la longitud
del cartucho” (0,16).
No obstante, debe notarse que en ningún caso
Pearson superó el 50% (de hecho se obtuvieron
algunos valores negativos), lo que significa que no
existe dependencia lineal significativa entre las
variables estudiadas y la VI, y que las diferencias
se deben probablemente a la estocasticidad espe-
rada por los fabricantes (Carlucci & Jacobson,
2007).
El rango de VI medida (219 a 309 m/s) no permite
apreciar el efecto esperado de variables como la
“masa de carga” o la “masa del proyectil”. Por
otro lado, es totalmente lógico esperar que la VI
dependa también de la interacción entre el cartu-
cho y el proyectil, con los elementos mecánicos
del arma como el cañón, la estriación interna del
mismo, el material de fabricación, la química de la
carga u otras variables, que no fueron estudiadas
en el presente ensayo.
La Tabla 3 resume el promedio, desviación típica
y asimetría, calculadas para las nueve variables
entre FAB y REC, cuya dispersión puede verse en
la Gráfica 3.
El análisis comparativo entre FAB y REC em-
pleando t-student para determinar corresponden-
cia de origen muestral, con la “VI del proyectil”
como referencia (Tabla 3), muestra que sólo la
longitud de la vaina y el diámetro del proyectil
(calibre) son significativamente similares entre
ambas, lo que sugiere uniformidad en la fabrica-
ción y en la selección de la vaina y del proyectil.
Las demás variables sugieren un origen muestral
distinto para FAB y REC, excepto para la “masa
del cartucho” que tiene un valor inconcluyente t-
student de 0,45.
La prueba de correlación de varianzas de Fisher
entre FAB y REC para las nueve variables (Tabla
4) muestra que la variabilidad entre ambas no está
relacionada. El índice de dependencia lineal Pear-
son propone al diámetro del proyectil (0,1346)
como posible variable común entre FAB y REC, si
se considera a la “VI” como factor de correlación,
y a la masa del proyectil (-0,5704) y la carga de
pólvora (-0,2765) en relación inversa, que son por
tanto los factores más discordantes entre cartu-
chos FAB y REC.
La Gráfica 6 muestra la relación entre la VI del
Tabla 3. Comparación de “promedio”, “desviación estándar” y “asimetría” de las variables
estudiadas en cartuchos de fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC).
Cartucho
(g)
Vaina
(g)
Proyecti l
(g)
Carga
(mg x100)Cartucho Vaina Vaina Proyecti l
Promedio 28,02 12,50 4,00 8,03 4,60 29,40 18,83 9,66 8,99
Desv (s ) 1,24 0,04 0,02 0,03 0,45 0,15 0,11 0,15 0,07
Asimetría 0,39 0,74 -0,91 0,83 0,23 1,32 -1,34 -1,71 0,19
Promedio 27,25 12,47 4,08 7,99 4,11 28,79 18,82 9,71 8,98
Desvest (s ) 2,72 0,16 0,13 0,09 0,93 0,28 0,06 0,07 0,31
Asimetría 1,77 -1,48 -1,42 -1,70 1,06 1,36 -0,18 0,04 -0,76
0,1649 0,4500 0,0075 0,0079 0,0154 0,0000 0,8282 0,0676 0,7639
8,89E-05 1,4E-11 4,6E-15 7,7E-09 0,00029 0,00089 0,00073 0,00015 1,5E-11
0,906643 -0,157 0,07815 -0,5704 -0,2765 -0,0927 0,07071 -0,3545 0,1346
t-s tudent
Fisher
Pearson
FAB
REC
VARIABLEVelocidad
(m/s x10)
Masa Longitud (mm) Diámetro (mm)
42 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
proyectil y su calibre real y su masa de pólvora.
La carga y calibre de los cartuchos FAB (azul y
verde) muestran mayor proximidad y uniformi-
dad en relación a su la VI, con leve tendencia a
estar por encima de los REC. Asimismo, el índice
de correlación r2 es levemente mayor para FAB,
aunque en ambos casos no es significativo en rela-
ción a la VI.
Es importante notar que la menor carga de pólvo-
ra corresponde a una de las más altas VI y que la
mayor carga no mostró la mayor VI, aunque el
proyectil más veloz corresponde a FAB y el más
lento a REC.
Mención especial merece el ordenamiento más
próximo a 9 mm de los proyectiles FAB en rela-
ción a la notable dispersión de REC (Gráfica 6,
derecha), aunque igualmente sus índices r2 no
guardan correlación significativa con la VI.
Es necesario un número muestral mayor y la con-
sideración de otras variables, especialmente el
material de construcción de los proyectiles, de las
vainas, la composición química de la carga, el
coeficiente balístico y los elementos mecánicos del
arma que puedan influir en la trayectoria interna
del proyectil (Hackborn, 2005).
AGRADECIMIENTOS
Al tercer curso B de Damas y Caballeros Cadetes
de ANAPOL 2014 de la materia “Metodología de
la Investigación Científica”, por el aporte de datos
al presente ensayo.
REFERENCIAS
Carlucci, D. & Jacobson, S..2007. ALLISTICS -
Theroy and Design of Guns and Ammu-
nition. USA: CRC Press, 502 p.
Hackborn, W.. 2005. The Science of Ballistics:
Mathematics Serving the Dark Side. 14 p.
McCoy, R.. 2012. Modern Exterior Ballistics.
USA: Schiffer Publishing, 326 p.
Steele, L.. 2008. Ballistics. En: YORK, E. Science
for Lawyers. USA: ABA Book Publishing,
400 p.
Gráfica 6. Distribución de Carga de Pólvora y Calibre Real vs. VI del proyectil,
para
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 43
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
NOTA TÉCNICA – SEGURIDAD VIAL
SATURACIÓN DE TRÁFICO EN LA AVENIDA
6 DE MARZO, EL ALTO, BOLIVIA
Pol. M. Villalobos H.1 & Luna, R.2
1Centro de Investigación y Capacitación en Seguridad Vial, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. 2 Dpto. Inv. Científica, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. [email protected]
RESUMEN
En la ciudad de El Alto circulan más de 45.000 vehículos por día y “la ceja” de esta urbe se considera uno
de los puntos urbanos más inseguros del país, por el que transitan hasta 13.500 personas cada dos horas.
El congestionamiento vehicular en la Av. 6 de marzo esq. calles 11 a la 1 fue cuantificado en un ensayo de
7 días, observando el tiempo de congestión por carril y la densidad vehicular en el tramo. Los resultados
sugieren que factores como el comportamiento de los conductores, las normas de circulación o el diseño
de las vías, podrían ser más influyentes que la cantidad de vehículos en circulación o el horario y se re-
comienda investigarlos sistemáticamente.
PALABRAS CLAVE: Saturación de tráfico, Av. 6 de marzo, densidad vehicular.
ABSTRACT
In the city of El Alto circulate over 45,000 vehicles per day and the “eyebrow” site of this city is consid-
ered one of the most insecure urban parts of the country, through which pass up to 13,500 persons every
two hours. Traffic congestion on Av. 6 de marzo between streets 11 to 1 was quantified in a 7-day test,
observing the time of congestion and traffic lane density in this section. The results suggest that factors
such as driver behavior, traffic rules or road design could be more influential than the number of vehicles
in circulation, which should be systematically investigated.
KEY WORDS: Traffic saturation, Av. 6 de marzo, vehicular density.
44 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
INTRODUCCIÓN
Una de las más frecuentes y erróneas asunciones
de los conductores de vehículos es que a mayor
velocidad, menor tiempo de recorrido total. Esto
es real en condiciones ideales, cuando el flujo
vehicular es ininterrumpido y el contacto entre
vehículo, vía y peatón es mínimo. En entornos
urbanos, la circulación vehicular se ve afectada
por factores como intersecciones, señales de trá-
fico, peatones, escuelas o la congestión de los
vehículos predecesores y otros, que impiden
adoptar una velocidad constante (flujo vehicular
interrumpido).
Mediante el análisis de los elementos del flujo
vehicular se pueden entender las características
y el comportamiento del tránsito, requisitos bá-
sicos para el planeamiento, proyección y opera-
ción de carreteras, calles y sus obras complemen-
tarias dentro del sistema de transporte.
El objeto, al abordar el análisis del flujo vehicu-
lar es dar a conocer algunas de las metodologías
e investigaciones y sus aplicaciones más relevan-
tes, con particular énfasis en los aspectos que
relaciona con las variables del flujo vehicular la
descripción probabilística o casual del flujo de
tránsito, la distribución de los vehículos en una
vía y las distribuciones estadísticas empleadas
en proyectos y control de tránsito.
Un reporte de la “Transportation Research
Board” norteamericana demostró que la veloci-
dad de circulación es directamente dependiente
del diseño de la vía y factores geométricos de
correlación con el flujo vehicular (TRB, 1998). La
congestión vehicular tiene serias implicaciones
en la economía. Los retrasos consecuente y el
consumo innecesario de combustible, han llega-
do a representar hasta 78 millones de $us en paí-
ses desarrollados (Albalate y Bel, 2008).
Uno de los principales problemas por los que
atraviesa la mayoría de las ciudades de nuestro
Estado Plurinacional de Bolivia es esta “conges-
tión vehicular”, que tiene su origen en el incre-
mento desmesurado del parque automotor,
además del poco o escaso desarrollo de la infra-
estructura vial, lógicamente apoyado en alguna
mediada por la improvisación y la falta de plani-
Figura 1. Vista satelital de la Av. 6 de marzo de El
Alto, señalando uno de los sitios de observación.
Figura 2. Av. 6 de marzo, El Alto, Bolivia. La flecha
indica el sentido observado de tráfico.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 45
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
ficación.
El diccionario de la Lengua Española (Real Aca-
demia Española, 2001) la define “congestión”
como “acción y efecto de congestionar o conges-
tionarse” y, “congestionar” como “obstruir o
entorpecer el paso, la circulación o el movimien-
to de algo”, en nuestro caso el tránsito vehicular:
muchos vehículos circulando lenta e irregular-
mente en una misma vía.
La Avenida 6 de marzo de la ciudad de El Alto,
Bolivia (Figura 1), es una de vía de cuatro carri-
les troncales que sirve de nexo entre las vías
principales hacia la ciudad de La Paz y las diver-
sas zonas de El Alto, y es asimismo uno de los
centros más importantes de embarque y desem-
barque de pasajeros. El presente ensayo observó
la densidad y duración de la congestión vehicu-
lar desde un punto fijo (Calle 11) de esta aveni-
da.
Tabla 1. Sumatoria (SUM), promedio (X),
desviación estándar (S) y asimetría (ASIM)
semanales de cantidad por tipo de vehículo.
SUM X S ASIM %
MINIBUS 34908 4986,9 114,57 -0,203 74,208
AUTOMÓVIL 2367 338,14 19,386 -0,73 5,032
VAGONETA 2308 329,71 33,822 1,3702 4,906
MICROBUS 2042 291,71 11,743 -1,264 4,341
4X4 1890 270 31,754 0,0854 4,018
CAMIONETA 1551 221,57 51,707 0,2703 3,297
BUS 1223 174,71 42,512 -0,825 2,600
CAMIÓN 356 50,857 15,313 -0,277 0,757
MOTO 174 24,857 4,7759 0,7404 0,370
AMBULANCIA 83 11,857 1,215 -0,414 0,176
FLOTA 82 11,714 2,8115 0,2185 0,174
POLICÍA 57 8,1429 2,2678 -0,845 0,121
MEDIA 7237,1 560,01 27,657 -0,156 ----
DESV 9802,2 1400,3 32,146 0,7432 ----
TOTAL 47041
MATERIALES Y MÉTODOS
Empleando un cronómetro y observación directa
(flotando sobre el flujo de tránsito), durante siete
días se midió el tiempo de congestión en minu-
tos y la densidad por tipo de vehículo en tres
horarios, para cada uno de los cuatro carriles de
la Av. 6 de marzo de la ciudad de El Alto, Boli-
via (Figuras 1 y 2), desde un punto fijo sobre la
Gráfica 1. Promedio de “minibuses” por día.
Gráfica 2. Cantidad semanal promedio de vehículos.
Gráfica 3. Cantidad promedio de circulación
vehicular según hora del día y tipo.
46 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
transversal calle 11 a la 1 (dirección de retorno a
La Paz).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Durante la semana de observación se identifica-
ron 12 tipos de vehículos, de los cuales el tipo
“minibús” representó más del 74% de los 47041
vehículos contados durante la semana de ensayo
(Tabla 1).
Este elevado número sugiere que la mayor parte
del congestionamiento se debería al tipo “mini-
bús”. La Gráfica 1 muestra que la cantidad pro-
medio de “minibuses”, a lo largo del día, es si-
milar durante toda la semana, incluso sábado y
domingo, lo cual es más evidente en la Gráfica 2,
que muestra la relación de los 12 tipos de
vehículos circulantes durante las observaciones.
La Gráfica 3 muestra comparativamente el pro-
medio de la cantidad vehicular en tres horarios
diferentes durante la semana. Solo para los tipos
“minibús”, “automóvil” y “vagoneta” (aunque
debe aclararse que el “minibús” se clasifica como
“vagoneta” y por conveniencia el presente em-
pleará la descripción previa), la correlación es
ascendente a lo largo del día (Pearson mínimo =
0,9706), lo cual indica que el horario nocturno es
el más saturado, aunque debe recordarse que
“automóvil” y “vagoneta” representan menos
del 10% del total de vehículos (Tabla 1).
La Gráfica 4 ordena los datos según cantidad por
día de semana y muestra que el martes es el más
saturado (en contraste al reporte municipal que
signa los jueves), seguido del viernes; lunes y
sábado son los menos saturados. Sin embargo,
Gráfica 4. Cantidad promedio de vehículos
según día de semana.
Gráfica 5. Duración del congestionamiento vehicular
por día de semana en tres horarios diferentes.
Gráfica 6. Duración promedio del congestionamiento
diario por hora del día y carril de circulación.
Gráfica 7. Correlación entre la cantidad promedio
de vehículos y la duración (minutos) del congestio-
namiento vehicular semanal en la Av. 6 de marzo.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 47
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como se verá más adelante, la cantidad no está
relacionada directamente con la duración del
congestionamiento vehicular.
Por otro lado la Gráfica 5 muestra, en orden des-
cendente, el tiempo promedio de congestión
observada por hora del día, que coincide con el
reporte municipal de los jueves con casi 29 mi-
nutos para recorrer 250 metros en puntos de
parada.
Y la Gráfica 6 complementa esta información
mostrando la duración del congestionamiento
por carril de la avenida, habida cuenta que el
carril 1 corresponde próximo a la jardinera y el 4
a la acera peatonal.
En síntesis el día con más saturación de tráfico es
el jueves, seguido del miércoles, el viernes, el
martes, sábado, lunes y finalmente domingo.
Esta distribución tal vez se deba a la presencia
de actividad comercial de alta densidad el día
jueves (Gráfica 7), aunque puesto que en domin-
go se realiza la misma actividad, es posible que
otro factor sea más influyente.
Al observar la correlación lineal la entre la dura-
ción promedio del congestionamiento y la canti-
dad promedio de vehículos (Gráfica 8), encon-
tramos un r2 de 0.3, muy por debajo de lo espe-
rado para vincular ambas variables, lo que su-
giere que la cantidad de vehículos NO es factor
predominante en la duración del congestiona-
miento.
Tal vez otros factores como la educación, la co-
modidad del pasajero, el excesivo comercio in-
formal que acapara aceras y calzadas (entre las
calles 1 y 3 hay más de 80 comerciantes en un
solo lado de acera), los elementos culturales, el
comportamiento de los conductores, las normas
de circulación, el diseño de las vías o la dejadez
de la autoridad para hacer cumplir las normas
Gráfica 8. Distribución radial de la duración de congestionamiento vehicular (minutos) en la Av. 6 de
marzo de El Alto, por día de semana, hora del día y carril de circulación.
48 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
de asentamiento urbano (comercio) y vialidad,
sean más influyentes que la cantidad de vehícu-
los o el horario. Se recomienda investigar cada
uno de estos factores sistemáticamente.
REFERENCIAS
Albalate, D. & Bel, G.. 2008. Shaping urban traf-
fic patterns through congestion charg-
ing: What factors drive success or fail-
ure?. Research Institute of Applied Econom-
ics, 1: 27p.
TRB Special Report 254. 1998. Managing Speed:
Review of Current Practice for Setting
and Enforcing Speed Limits. Transporta-
tion Research Board, USA.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 49
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
REPORTE DE CASO
IDENTIFICACION DE RESTOS HUMANOS SEMI-CALCINADOS
MEDIANTE ADN NUCLEAR Y MITOCONDRIAL
K. Salazar Ch., E. Torres T., G. Poquechoque B., Pol. L. Macuchapi & R. Luna B.
Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial, La Paz, Bolivia.
RESUMEN
Siete familias involucradas en un accidente vehicular con incendio de combustibles fueron convocadas
para identificar los restos del incidente. Se emplearon marcadores STR somáticos, Y-STRs y secuencias de
ADN mitocondrial para la caracterización genética de siete cuerpos semi-calcinados y fragmentos tisula-
res varios encontrados en el lugar y depositados en la morgue, para contrastarlos con siete familias de
parentesco alegado en primer grado (padre, madre, hijo o hermano). Los resultados combinados mostra-
ron que seis de los siete cuerpos pertenecían a las familias alegadas. La familia restante fue identificada
con algunos de los restos analizados pero no con el cuerpo alegado. El trabajo pericial demuestra la nece-
sidad de combinar sistemas moleculares en casos complejos como este, además de probar la eficacia de
las técnicas aplicadas para recuperar ADN viable en tejido semi-calcinado.
PALABRAS CLAVE: Restos semi-calcinados, parentesco genético, STR, Y-STR, ADNm.
ABSTRACT
Seven families involved in a vehicular accident with fired fuels were convened to identify the recovered
remains of the incident. Somatic STR and Y-STR matkers, and mitochondrial DNA sequences were used
for the genetic characterization of the remains deposited at the morgue, to contrast with the seven fami-
lies with first grade alleged kinship (parent, child or sibling). The combined results showed that six of the
seven bodies belonged to the alleged families. The non-belonging family was positive identified with
other non recognized remains. The work demonstrates the usefulnes of combine molecular systems in
complex cases such as this, in addition to effectiveness of the techniques used to recover DNA from semi-
charred tissues.
KEY WORDS: Semi-charred remains, genetic kinship, STR, Y-STR, mtDNA.
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INTRODUCCION
En la actualidad se han desarrollado varias técni-
cas forenses que se aplican a la identificación de
restos humanos y su aplicación depende de las
circunstancias y condiciones de los restos a ser
examinados. Rutinariamente se emplean métodos
basados en la observación y comparación de ca-
racterísticas distintivas como por ejemplo, cicatri-
ces específicas, tatuajes, comparación de las hue-
llas digitales o dentales con patrones, sin embar-
go, la mayoría de ellas depende en gran medida
del estado de preservación estructural del resto,
así como de la disponibilidad de archivos o regis-
tros para su comparación (Alonso et al., 2001).
Así, escenas de incendios fatales proporcionan
alguno de los retos más difíciles para los investi-
gadores, pues las evaluaciones de causa de muer-
te son significativamente más difíciles si la escena
y la víctima son sometidos al fuego, destruyendo
características que permitan identificar a las víc-
timas a través de ciertos rasgos faciales o huellas
dactilares o bien destruir pruebas relacionadas
con la circunstancias de la muerte, considerando
que las modificaciones en la escena hacen que sea
difícil distinguir el cuerpo y escombros circun-
dantes. El consumo de los tejidos blandos por el
fuego puede obstaculizar significativamente el
análisis de otros especialistas (Symes et al., 2012).
Frente a estas limitaciones, el estudio de polimor-
fismos del ácido desoxirribonucleico (ADN) ha
sido ampliamente empleado en la identificación
de personas en casos de investigación forense, tal
como lo reportaron por primera vez Jeffreys et al.,
en 1985. El desarrollo de esta tecnología ha permi-
tido identificar cadáveres y restos humanos des-
pués de las guerras, disturbios sociopolíticos y
desastres masivos (Corach et al., 1997; Lorente et
al., 2001; Muñoz, 1999; Olaisen et al., 1997; Primo-
rac et al., 2000) a través del empleo de la reacción
en cadena de la polimerasa (PCR) para la amplifi-
cación de secuencias repetitivas cortas (STRs) del
ADN nuclear o el análisis de fragmentos de la
región hipervariable del ADN mitocondrial que
proporcionan información valiosa para la identifi-
cación de personas.
Sin embargo, como toda prueba también se en-
cuentra limitada por factores y circunstancias in-
terrelacionadas que pueden desafiar la identifica-
ción final de ADN, tales como, el número de víc-
timas, el mecanismo de destrucción y el grado de
fragmentación de los restos, la tasa de degrada-
ción del ADN, la accesibilidad de las muestras
colectadas y la disponibilidad de muestras de
referencia (Alonso et al., 2005). Schwark et al.
(2010), en una investigación realizada empleando
huesos de diferentes partes del cuerpo expuestos
a diferentes temperaturas demostraron que es
posible extraer ADN de huesos bien preservados
o parcialmente calcinados, logrando amplificar
entre 10 a 15 STRs. En los huesos con quemaduras
de color negro el ADN mostró una alta degrada-
ción y en algunos casos el análisis del ADN nu-
clear no fue posible, guiando al análisis del ADN
mitocondrial como una opción. Los huesos azul
grisáceos esporádicamente produjeron perfiles
parciales o esporádicos y en huesos quemados
azulados grisáceos blanquecinos raramente se
obtienen resultados confiables, concluyendo que
la identificación genética de restos humanos
quemados es posible si la quemadura no alcanzó
tejido blando o medular. Si el hueso presenta ca-
racterísticas de azul grisáceo blanquecino, es muy
probable que el ADN se encuentre degradado y la
identificación genética no sea posible.
ESTUDIO DE CASO
Aunque los accidentes masivos son de baja fre-
cuencia en nuestro medio, el acontecido el 21 de
Junio del 2013 en la localidad de Huancollo, carre-
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 51
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
tera La Paz - Desaguadero, fue notable, pues el
choque de un vehículo cisterna contra varias mo-
vilidades públicas y particulares, desató un voraz
incendio que produjo la muerte de al menos 10
personas.
Frente a este tipo de hechos, donde la identifica-
ción de personas es una de las tareas más arduas,
puesto que se carecen de huellas dactilares o ras-
gos particulares que identifiquen a la persona
como consecuencia de las quemaduras, llegando
en muchos casos solamente a contar con restos
óseos. Asimismo, debe considerarse que los efec-
tos que pueda causar el calor sobre los restos es-
queléticos dependen de la temperatura del calor
aplicado, de la duración, del suministro de oxí-
geno y del grado de carne o de otro material de
protección que se encuentre en contacto con los
restos óseos (Hurlbut, 2000; Duffy et al., 1991).
Estas características de los restos óseos y cuerpos
expuestos a altas temperaturas marcan un desafío
para la obtención de material genético analizable.
Indudablemente este hecho marcó un desafío pa-
ra la institución policial en la individualización e
identificación de personas fallecidas en incendios.
A continuación, se describe el trabajo técnico-
científico que permitió responder ante esta de-
manda de la sociedad.
MATERIALES Y MÉTODOS
Localización Geográfica
El voraz incendio del carro cisterna y otras movi-
lidades particulares se suscitó en la localidad de
Huancollo, carretera La Paz – Desaguadero, de
donde se remitieron a la morgue de la ciudad de
La Paz los cuerpos quemados para su autopsia y
posterior identificación.
Muestras analizadas
Se remitieron al laboratorio fragmentos óseos
quemados correspondientes al fémur, dientes y
vertebras, así como porciones quemadas de tejido
muscular e hisopos con sangre del miocardio y
arterias coronarias correspondiente a ocho cadá-
veres con quemaduras que impedían su identifi-
cación a través de huellas dactilares y otras carac-
terísticas morfológicas. Todas las muestras remi-
tidas fueron colectadas durante la autopsia de ley.
Por otra parte, se colectaron muestras sanguíneas
de 17 parientes, de 7 familias, como muestras de
referencia para la identificación de los cadáveres.
La tabla 1, muestra en detalle el tipo de resto re-
mitido para cada cadáver y la hipótesis planteada
para el análisis genético, así también, la figura 1
muestra las características de los restos óseos y
tejidos remitidos al laboratorio.
Extracción de ADN de las muestras de referencia (fa-
miliares)
Figura 1. Restos tisulares, óseos y
dentales recuperados y analizados.
52 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Las muestras sanguíneas colectadas de los fami-
liares fueron sometidas a un procedimiento de
extracción automatiza de ADN en el instrumento
Maxwell®16 empleando el kit DNA IQTM Refe-
rence Sample (Promega).
Extracción de ADN de los restos de huesos, tejido e
hisopos con sangre (cadáveres no identificados)
Todas las superficies óseas fueron limpiadas de
los restos de tejidos blandos y carbonizados em-
pleando soluciones de hipoclorito de sodio e irra-
diación UV para su posterior pulverización con
nitrógeno líquido. El polvo de hueso fue sometido
a un procedimiento de descalcificación y lisis con
proteinasa K (20 mg/ml). Esta mezcla fue incuba-
da a 65ºC por 24 horas y el ADN fue aislado em-
pleando la extracción orgánica fe-
nol/cloroformo/alcohol isoamilico (24:24:1).
Los restos de tejido muscular e hisopos embebi-
dos con sangre fueron sometidos a un procedi-
miento de extracción química de ADN total me-
diante precipitación salina y deshidratación em-
pleando una modificación del kit Wizard Geno-
mic (Promega).
Todos los extractos de ADN fueron verificados
por electroforesis en agarosa y cuantificados por
espectrofotometría UV.
Amplificación y caracterización de microsatélites
(STRs) del ADN nuclear
Se realizó la caracterización de los marcadores
moleculares STRs del ADN nuclear empleando el
kit Identifiler Plus (Applied Byosistems) y de los
Y-STRs del cromosoma Y empleando el kit Y-Filer
(Applied Byosistems) a través de la amplificación
enzimática multiplex bajo estringencia controlada
por temperatura (PCR). Los productos resultan-
tes de este procedimiento fueron caracterizados
según su peso molecular mediante electroforesis
capilar y detección de fluoróforos por láser, em-
pleando el Analizador Genético ABI 3130 y el
software GeneMapper versión 3.2.
Amplificación de la región hipervariable HVI y HVII
del ADN mitocondrial
Se realizó la amplificación de un fragmento de
440pb (HVI) y 400pb (HVII) de la región hiperva-
riable del ADN mitocondrial, utilizando los ceba-
dores L15997 y H16391 para HVI (Costa et al.,
2008) y para la región HVII L48 y H 408 (Costa et
al., 2008). El producto de PCR se evaluó en elec-
troforesis en gel de agarosa al 1,8% a 100 voltios
durante 15 minutos.
El producto obtenido se purificó con solucio-
nes alcohólicas (etanol absoluto e isopropanol),
para luego realizar la electroforesis capilar en el
Tabla 1. Codificación y descripción de los restos analizados.
Código RESTOS REMITIDOS HIPÓTESIS PLANTEADA
Cadáver A E1 Hisopos con sangre de aorta baja
Los perfiles genéticos caracteriza-
dos de los restos analizados, guar-
dan correlación con alguno de los
perfiles genéticos de referencia de
los familiares de las víctimas.
E2 Tejido de aorta
Cadáver B E3 Restos dentales primer molar
E4 Cóndilo de fémur derecho con tejido
Cadáver D E5 Hisopo con sangre arterial venosa
Cadáver E E6 Hisopo con sangre arterial, ventrículo con sangre venosa
Cadáver F E7 Dos hisopos con sangre venosa miocardio
Cadáver G E8 Cabeza de fémur
Cadáver H E9 Fragmento de hueso iliaco derecho (tejido cortical y esponjoso)
Cadáver I E10 Músculo de región axilar izquierda
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 53
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Analizador Genético ABI 3130 con el kit Big
Dye Terminator Cycle Sequencing v. 3.1 (Ap-
plied Byosistems), de acuerdo a las instruccio-
nes del fabricante, evaluando la calidad de la
secuencia obtenida con el software Sequencig
Analysis versión 5.2.
El alineamiento de secuencias se realizó en
relación con la secuencia revisada de Cam-
bridge (Anderson et al., 1981; Andrews et al.,
1999), que se encuentra disponible online en la
base de datos NIH Genetic Sequence Database
(GenBank http://www.ncbi.nlm.nih.gov).
RESULTADOS
Inspección de los restos
Cuando se queman los huesos, el calor del fuego
ocasiona una deshidratación del contenido de
agua del hueso destruyendo la estructura del co-
lágeno del mismo (Hanson, 2006). Los poros en
los huesos se agrandan y entre cada poro es existe
una pieza delgada y quebradiza de hueso que con
la menor presión puede causar que el hueso se
rompa.
El fuego puede en gran medida destruir o alterar
la forma de hueso (Jefferson, 2003; Murray & Ro-
se, 1993). Razón por la cual es necesario valorar el
estado de los mismos. En el presente trabajo se
consideró la clasificación de las quemaduras sobre
los restos óseos propuesta por Thorsten et al.
(2010): quemados bien preservados, semiquema-
dos, quemados negros, quemados azul grisáceos
y quemados azul grisáceos blanquecinos, la colo-
ración del hueso expuesto a temperaturas varía de
acuerdo a la temperatura y tiempo de exposición,
disponibilidad de oxígeno y contacto con otros
materiales del entorno (Tsuchimochi et al., 2002;
Walker & Miller, 2005). En este sentido, se obser-
vó que los restos óseos analizados presentaban
deformaciones y contracciones propias de la ex-
posición al fuego (Tabla 2).
De todas las muestras inspeccionadas se descartó
el análisis de la pieza dental (E3) del cuerpo B por
observarse una completa carbonización de la
misma (Figura 1).
Fig. 2. Electroforesis en agarosa de los produc-
tos de la extracción y purificación de ADN. Ca-
rril 1 y 2 hisopo con sangre y tejido del cadáver
A (E1 y E2); carril 3 fémur del cadáver B (E4);
carril 4 hisopo con sangre del cadáver D (E5);
carril 5 hisopo con sangre del cadáver E (E6);
carril 6 hisopo con sangre del cadáver F (E7);
carril 7 tejido muscular del cadáver I (E10); ca-
rril 8 cabeza de fémur de cadáver G (E8) y carril
9 hueso iliaco de cadáver H (E9).
Obtención de ADN
Se evaluó la presencia de ADN total en las mues-
tras remitidas al laboratorio, estimando en ng/ml la
cantidad recuperada entre 114 a 250 para los hiso-
pos embebidos con sangre (carril 1, 4, 5 y 6) y entre
200 a 550 para las muestras de huesos y tejidos
1 2 3 4 5 6 7 8
9
Tabla 2. Clasificación de los restos óseos según
Thorsten S. et al., 2010.
CÓD TIPO CLASE
Cadáver
B
E3 Restos dentales
primer molar
Quemado azul
grisáceo
E4
Cóndilo de fé-
mur derecho con
tejido
Quemado negro
Cadáver
G E8 Cabeza de fémur Bien preservado
Cadáver
H E9
Fragmento de
hueso iliaco
derecho (tejido
cortical y espon-
joso)
Bien preservado
54 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
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(carril 2, 3, 7, 8 y 9), Figura 2. Por otro parte, la can-
tidad estimada de ADN total extraído de las mues-
tras de referencia se encuentra entre 250 a 360
ng/ml.
Obteniéndose en todas las muestras ADN total
para la amplificación de STRs y la secuenciación
de ADNmt, conforme a lo reportado para vícti-
mas que exhiben extrema carbonización por in-
cendios (Cattaneo, 1999; Brown & Donoghue.,
1995).
La pieza dental recuperada del cadáver B (E3) se
excluyó, ya que se encontraba completamente
carbonizada sin contar con pulpa dental para la
extracción (Figura 3), pues Tsuchimochi et al.
(2002) reportó que el logro de extracción y ampli-
ficación exitosa de ADN de huesos expuestos a
temperaturas superiores a 300ºC, se debe a la pre-
sencia de pulpa dental, siendo requisito para pro-
seguir con el análisis de ADN.
Fig. 3. Pieza dental carbonizada (E3) del cuerpo B.
Asimismo, Alves da Silva et al. (2012) verificó que
no es posible recuperar ADN genómico contenido
en la parte de la raíz de los dientes para la identi-
ficación humana cuando se someten a diferentes
condiciones de tiempo de calor y de exposición.
Amplificación y caracterización de microsatélites
(STRs) de ADN nuclear
Se han caracterizado diecisiete perfiles completos
de marcadores moleculares tipo STRs para las
muestras de referencia analizadas, identificando a
siete familias. La Tabla 3 muestra el perfil de STRs
de referencia, caracterizados para cada familia.
En las evidencias remitidas al laboratorio (E1 a
E10) se han caracterizado perfiles completos en
todos los casos, a excepción de E3 (piezas denta-
les calcinadas) en el cual no fue posible realizar la
extracción de material genético por su extrema
carbonización (Figura 3).
En E1 y E2 se ha encontrado el mismo perfil de un
individuo de sexo masculino, así también, en E5 y
E9 se ha encontrado el perfil de dos individuos
diferentes de sexo masculino, respectivamente. En
E4, E6, E8 y E10 se ha caracterizado el perfil gené-
tico de cuatro individuos diferentes de sexo fe-
menino.
La Tabla 4, resume el perfil de ADN obtenido de
los restos en estudio, empleando el sistema de
STRs, detallando la estructura de alelos en cada
una de las evidencias.
En los cadáveres caracterizados con el gen Ame-
logenina como individuos de sexo masculino
(XY), cadáver A (E1), D (E5) y H (E9), se logró
caracterizar 16 marcadores adicionales para el
cromosoma Y con el objetivo de realizar el análi-
sis patrilineal con las muestras de referencia de
parientes masculinos de familias que buscaban a
un individuo de sexo masculino, familias 1, 2 y 3.
En la Tabla 5, se observa que el perfil de cromo-
soma Y del cadáver A y el pariente masculino
(padre) de la familia 1 presentan el mismo haplo-
tipo, del mismo modo sucede entre el cadáver D y
la familia 3 y entre el cadáver H y la familia 2,
estableciéndose de esta forma una relación patri-
lineal entre ellos.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 55
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Amplificación de la región hipervariable HVI y HVII
del ADN mitocondrial
Por otra parte, se ha caracterizado según secuen-
ciación un fragmento de 700 pb del genoma mito-
condrial humano aislado de las muestras y evi-
dencias analizadas y se han identificado distintos
sitios polimórficos según la secuencia de referen-
cia Cambrige (1982), encontrándose correlación
entre el cadáver B y la familia 5, el cadáver E y la
familia 4, el cadáver G y la familia 2, el cadáver H
y la familia 2, el cadáver I y la familia 6. No se
observó correlación del cadáver F con ninguna de
las familias analizadas, asimismo, la familia 7 no
presentó correlación con ninguno de los cadáve-
res estudiados, tal como se muestra en la Tabla 6.
En todos los casos, se obtuvo perfiles completos
para los STRs autosómico y del cromosoma Y, así
como de las secuencias de la región HVI y HVII
del ADN mitocondrial, identificando con una
probabilidad mayor al 99,99% los cadáveres con
Tabla 3. Perfil de STRs de las muestras de referencia.
FAMILIA 1 FAMILIA 2 FAMILIA 3 FAMILIA 4
STRs PADRE MADRE HERMANO HIJA ESPOSO MADRE PADRE HIJO HERMANA
D8S1179 11 12 15 15 13 15 14 15 14 15 13 14 12 14 12 13 12 15
D21S11 30,2 31,2 28 31,2 30 31 30 33,2 31 33,2 31 32,2 30 32,2 31,2 32,2 31,2 32,2
D7S820 10 12 9 11 11 12 9 11 11 11 11 12 10 11 10 13 11 12
CSF1P0 12 12 11 11 12 12 10 12 10 11 10 11 10 10 11 12 11 12
D3S1358 15 16 15 15 16 16 15 17 15 17 15 16 15 16 15 16 15 17
THO1 7 7 7 7 6 9,3 6 6 6 7 7 7 9 9,3 7 7 6 7
D13S317 9 10 9 11 9 12 9 12 9 12 10 14 9 9 11 12 12 13
D16S539 10 12 10 12 9 13 11 13 9 11 10 11 9 9 10 12 9 10
D2S1338 22 23 17 23 20 23 19 23 17 19 17 19 19 20 17 23 19 23
D19S433 13,2 15 13,2 14 13 13 13,2 14 13 14 14 15 13 14 13,2 14 13,2 14
vWA 15 17 15 16 16 16 16 17 16 16 15 16 16 17 16 18 7 19
TPOX 8 10 8 8 8 11 8 8 8 8 8 12 8 8 11 12 8 11
D18S51 12 15 16 18 12 13 12 17 12 14 14 16 14 14 12 14 18 18
D5S818 7 11 11 11 11 11 11 12 7 11 7 11 11 11 9 11 11 11
FGA 19 25 23 26 19 24 23 24 24 25 19 26 22 26 19 24 24 25
AmelXY X Y X X X Y X X X Y X X X Y X Y X X
FAMILIA 5 FAMILIA 6 FAMILIA 7
STRS HIJA HIJO HIJO HERMANO HIJO HIJO HIJA HERMANO
D8S1179 14 14 14 16 14 16 12 13 12 13 14 14 14 14 14 14
D21S11 30 31 31,2 32,2 30 32,2 30 32,2 30 30 31,2 32,2 30 32,2 29 29
D7S820 11 12 10 11 11 11 12 12 12 12 10 11 10 11 10 10
CSF1P0 10 12 10 12 10 11 11 13 10 10 12 12 11 12 11 12
D3S1358 15 17 15 17 15 17 15 15 15 16 17 17 15 17 15 17
THO1 6 7 7 7 6 7 7 7 6 7 9,3 9,3 7 9,3 7 9,3
D13S317 9 10 9 10 9 10 11 14 9 12 11 12 11 12 11 12
D16S539 10 10 9 10 10 10 9 12 9 10 9 9 9 9 9 9
D2S1338 20 24 20 24 19 20 22 23 19 23 19 22 22 23 19 20
D19S433 12,2 14 12,2 13 14 15 13,2 15 15 17 14 15 13 13,2 14 14
vWA 16 19 16 19 16 17 16 17 17 17 17 18 7 18 16 18
TPOX 8 8 8 8 8 8 8 8 8 11 8 12 8 11 11 12
D18S51 12 14 12 16 12 14 14 15 14 17 12 14 12 13 12 15
D5S818 11 11 11 11 11 11 9 11 9 11 11 11 7 11 7 11
FGA 22 25 26 26 22 26 22 22 22 25 21 26 21 22 21 27
AmelXY X X X Y X Y X Y X Y X Y X X X Y
56 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
las familias que reportaron a una persona desapa-
recida (Tabla 7).
CONCLUSIONES
Este estudio muestra que la identificación a través
del ADN es confiable y reproducible cuando se
analizan huesos quemados bien preservados o
parcialmente calcinados, siendo necesaria una
pre-valoración de los mismos en relación a la ex-
posición del fuego, demostrando que los huesos
son más resistentes al calor por su estructura y la
protección del tejido que se encuentra a su alre-
dedor.
Los resultados muestran que es posible realizar la
tipificación de STR y ADN mitocondrial a partir
de restos humanos expuestos a incendios para su
comparación con muestras de referencia de pa-
rientes. No obstante, deben considerarse que
cuando un cuerpo es descubierto en un incendio,
los objetos extraños tales como plástico derretido
o textil se funden con el hueso interfiriendo en el
análisis e imposibilitando la identificación, este
fenómeno no se observó en los restos analizados.
RECOMENDACIONES
La identificación de personas a través del material
genético presente en cualquier muestra biológica
permite aplicar esta tecnología en la identificación
de personas desaparecidas donde generalmente
solo se cuenta con restos como huesos, dientes,
pelos, etc. En este sentido, se recomienda que las
autoridades, instituciones y sociedad en general
aprovechen el uso de esta tecnología en la identi-
ficación de personas desaparecidas o víctimas de
desastres.
Tabla 4. Perfil de STRs de los restos analizados.
STRs
CUERPO A CUERPO
B
CUERPO
D
CUERPO
E
CUERPO
F
CUERPO
G
CUERPO
H
CUERPO
I
E1 E2 E4 E5 E6 E7 E8 E9 E10
Hisopo
sangre
aorta
Tejido de
aorta
Cóndilo
de
fémur
Hisopo
con sangre
arterial
Hisopo
sangre
arterial
Hisopo
sangre
miocardio
Cabeza
de fémur
Hueso
iliaco
Músculo
axilar
D8S1179 11 15 11 15 14 16 13 14 12 15 13 15 13 15 15 15 12 13
D21S11 28 31,2 28 31,2 31 32,2 31 32,2 31,2 32,2 30 32,2 29 30 30 33,2 30 32,2
D7S820 9 12 9 12 11 12 10 12 10 11 10 11 9 12 11 12 12 12
CSF1P0 11 12 11 12 10 12 10 10 12 12 11 11 11 12 11 11 10 12
D3S1358 15 15 15 15 15 15 15 16 16 16 16 16 16 17 15 16 16 17
THO1 7 7 7 7 7 7 7 9,3 7 7 6 7 6 7 7 7 6 7
D13S317 9 11 9 11 9 12 9 10 9 12 9 14 9 12 12 12 12 14
D16S539 12 12 12 12 9 10 9 11 9 12 9 13 12 13 9 13 9 9
D2S1338 22 23 22 23 20 22 17 20 19 23 19 23 17 23 17 23 19 22
D19S433 13,2 14 13,2 14 12,2 15 14 15 13,2 13,2 13,2 14 13 14 13 13,2 13,2 17
vWA 16 17 16 17 17 19 16 16 16 17 16 17 16 17 16 17 17 17
TPOX 8 10 8 10 8 11 8 8 8 12 12 12 8 8 8 8 8 8
D18S51 15 18 15 18 14 16 14 14 14 14 12 17 17 17 14 17 14 15
D5S818 7 11 7 11 11 11 11 11 9 11 11 11 12 12 7 12 9 11
FGA 19 26 19 26 25 26 22 26 24 26 20 27 20 23 20 24 22 22
AmelXY X Y X Y X X X Y X X X X X X X Y X X
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58 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
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Tabla 7. Genealogía y probabilidad de correlación combinada establecida entre los familiares y
los cadáveres estudiados. ( Familiar de referencia, Víctima, X Familiar no disponible).
GENEALOGÍA
SISTEMAS DE
IDENTIFICACIÓN CORRESPONDENCIA
COMBINADA STRs Y-STRs ADNm
Familia 1 Vs. cadáver A
+ + - 99,999999%
Familia 2 Vs. cadáver G
Familia 2 Vs. cadáver H
+ + + 99,999999%
Familia 3 Vs. cadáver D
+ + - 99,999999%
Familia 4 Vs. cadáver E
+ - + 99,999999%
Familia 5 Vs. cadáver B
+ - + 99,999999%
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 59
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Familia 6 Vs. cadáver I
+ - + 99,999999%
Familia 7 Vs. cadáver no
identificado
+ - + 99,999999%
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IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 61
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
NOTA TÉCNICA - INFORMÁTICA
DISEÑO Y DESARROLLO DE UN SISTEMA TECNOLÓGICO PARA LA
CAPTURA DIGITAL DE IMPRESIONES DACTILARES
Patzi, V., Carlos Ángel & Alanoca, V., Jhonny Martín
Academia Nacional de Policías, Universidad Policial “Mcal. Antonio José de Sucre”. La Paz, Bolivia.
INTRODUCCIÓN
El desarrollo tecnológico puede definirse como la
Intensificación del empleo de la tecnología para
elevar el nivel de vida de una región o para pro-
porcionar medios concretos que mejoren el ren-
dimiento de una función o programa de produc-
ción.
En el año 1686 Marcelo Malpighi elabora la “capa
de Malpighi”, misma que señala las diferencias
entre las crestas, espirales y lazos en las huellas
dactilares. Sir Richard Edward Henry en el año
1896 empleó las huellas dactilares como método
de identificación de individuos. Sir Francis Galton
definió algunos de los puntos o características
desde las cuales las huellas dactilares podían ser
identificadas. Estos "puntos Galton" son la base
para la ciencia de identificación por huella dacti-
lar. Es de esta forma que, la identificación por
huella digital comienza su transición a la automa-
tización a finales de los años 60 junto con la apari-
ción de las tecnologías de computación.
Una huella dactilar es la impresión visible o mol-
deada que produce el contacto de las crestas papi-
lares de un dedo (generalmente se usan el dedo
pulgar o el dedo índice) sobre una superficie. Es
una característica individual que se utiliza como
medio de identificación de las personas.
La huella dactilar es considerada en la actualidad
como una señal auténtica e intransferible de la
identidad que permite no sólo la identificación de
las personas, sino también le validan para el uso
de equipos informáticos o para acceder a espacios
físicos en los cuales se utilizan protocolos de alta
seguridad. (Identificaciones, 2014).
En 1969, el Buró Federal de Investigaciones (FBI)
comenzó con el estudio del proceso de automati-
zación de la clasificación, búsqueda y concordan-
cia de las huellas dactilares y, conforme a la nece-
sidad de un sistema de identificación integrado en
la comunidad de la justicia criminal de los Esta-
dos Unidos se volvió rápidamente evidente, la
próxima fase en la automatización de huellas dac-
tilares, teniendo hoy en el campo tecnológico el
Sistema de Identificación Automatizada de Im-
presiones dactilares (Automated Fingerprint Iden-
tification System (AFIS)). (Wayman et al.,2005).
Si bien, actualmente se cuenta con tecnología de
este tipo, su costo resulta bastante elevado para
poder ser adquirido por todas las instituciones
que sirven al país, tal como es la Policía boliviana,
es de esta forma que se propone un sistema de
captura de impresiones dactilares tecnológico,
elaborado con materiales de bajo costo con la fina-
lidad de mejorar el desarrollo tecnológico y coad-
yuvar al inicio de la independencia tecnológica
del estado Plurinacional de Bolivia, pues se pro-
pone la fabricación de un equipo y sistema de
captura de impresiones dactilares. (Patzi, C. &
Alanoca, J., 2014).
62 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
MATERIALES Y MÉTODOS
Ensamblado del equipo
Se seleccionó una cámara web de resolución alta,
un led de alto brillo color azul, cuya finalidad es
brindar luminosidad, resistencia de 180 ohmios
para asegurar que el LED presente una intensidad
constante, sin perderla con el tiempo.
Se crea una cubierta con láminas de plástico para
proteger la cámara y el circuito electrónico, dicha
cubierta debe ser forrada con hojas plásticas ray-
ban color negro y, en la parte superior del equipo
se debe ubicar un vidrio transparente, cuyo obje-
tivo es proteger la cámara web, para ubicar el lu-
gar de la captura de la huella dactilar, este vidrio
debe ser forrado con una lámina anti ralladuras y
anti grasas para conservarla. (Figura 1, 2 y 3).
Sistema Software
Para almacenar y procesar cada imagen capturada
el equipo ensamblado se utilizó macros del pro-
grama informático PhotshopCS, que permiten
editar y modificar las imágenes con sólo apretar
un botón.
Para ello, se debe combinar una segmentación
basada en el color con una frecuencia de las cres-
tas papilares de la yema del dedo como un mapa
de estimación. La idea básica consiste en la selec-
ción de los píxeles de la imagen que pertenecen a
un modelo de color disponible en la literatura
asociada a los tipos de piel. Debido a las diferen-
cias en la iluminación de fondo de la yema del
dedo, las zonas segmentadas deben ser regulari-
zadas por la morfológica básica de la segmenta-
ción, el modelo se puede hacer más robusto com-
binando la información proveniente de la estima-
ción de la frecuencia de cresta papilar de la yema
del dedo. En este caso, el retorno de la inversión
contendrá sólo las regiones de imagen donde hay
energía en la frecuencia espacial asociada a las
crestas de la yema del dedo.
El registro son las operaciones necesarias para
escalar y rotar la imagen de la punta del dedo de
manera que la imagen de entrada se transforma
en una imagen estándar que tiene las siguientes
características:
1) El centro de la yema del dedo debe ser colo-
cada en el centro de la pantalla de vidrio.
Figura 1. Diagrama de flujo de la fabrica-
ción y ensamblado del equipo del sistema
de captura de huellas dactilares.
Figura 2. Ensamblado de la cámara oscura
para la cámara WEB.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 63
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Figura 3. Equipo y captura de imagen de
impresiones dactilares.
2) La orientación de la punta del dedo debe ser
horizontal, de tal forma que se obtenga la má-
xima resolución rectangular.
3) La punta del dedo debe emplearse para cal-
cular el área y tamaño real en píxeles.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Se obtiene un equipo de bajo costo y eficiente para
la captura de impresiones dactilares.
Con ayuda PhotoshopCS se obtuvo una imagen
más clara de las crestas papilares (Figura 4). Estos
resultados en combinación de los datos generales
de una persona, son la base para la elaboración de
equipos y sistemas que coadyuvan a la identifica-
ción y almacenamiento de datos de un individuo.
Desafortunadamente, el uso de cámaras web y
cámaras de bajo costo como un sensor biométrico
produce variaciones significativas de escala, posi-
ción y rotación de la punta de los dedos entre las
diferentes adquisiciones en el tiempo, este paso
corresponde a la alineación horizontal de la yema
del dedo de la imagen resultante, siendo a su vez
el último pasó de la fase de registro.
También debemos mencionar que una institución
como la nuestra tiene una obligación jurídica que
es expresada en las diferentes leyes como ser: la
Constitución Política del Estado, La Ley Orgánica
de la Policía Nacional, Ley Orgánica del Ministe-
rio Público, en la cual da a conocer las funciones
que la institución debe cumplir, por ejemplo en
casos de delitos, somos responsables de la inves-
tigación y del esclarecimiento del hecho, siendo
necesario la actualización y adquisición de equi-
pos tecnológicos con la finalidad de
IDENTIFICAR a los presuntos autores u otro tipo
de personas relacionadas con el caso.
Pero debido a los altos precios que tienen estos
aparatos tecnológicos, este equipamiento no pue-
de llevarse a cabo, pues sistemas como el AFIS
cuestan alrededor de los 9.8 millones de dólares
(Rocha, 2014), cuando el equipo ensamblado tiene
un costo inferior a los 200 bolivianos.
CONCLUSIONES
Se logró diseñar y fabricar un equipo de captura
de impresiones dactilares, así como se creó ma-
cros en el software PhotoshoCS para la edición y
almacenamiento de las imágenes capturadas.
El presente trabajo representa el afán y el deseo de
los cadetes formados en la Policía boliviana para
Figura 4. Imagen capturada por el disposi-
tivo artesanal y procesada con
PhotoshopCS.
64 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
coadyuvar y dirigirnos a un camino de la inde-
pendencia tecnológica.
AGRADECIMIENTOS
Se agradece al personal del IITCUP por abrir las
puertas a los cadetes de la ANAPOL en su afán y
sed de conocimiento. Un agradecimiento profun-
do al Lic. Ruddy Luna Barrón por el apoyo y la
orientación brindada.
REFERENCIAS
Patzi, C. & Alanoca, J., 2014. Diseño y desarrollo
de un sistema tecnológico para la captura
digital de impresiones dactilares a ser uti-
lizada en el centro de investigación gené-
tica del IITCUP de la ciudad de La Paz.
Trabajo Dirigido. Academia Nacional de la
Policía.
Rocha,B.. 2014. Proyecto AFIS. (A. M. JHONNY,
Entrevistador)
Wayman, J., Jain, A., Maltoni, D., Maio, D.. 2005.
Biometric systems technology. Springer-
Verlag London Limited. London, springer.
356p.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 65
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
SINOPSIS DE TESIS
CUADERNO DE CAMPO PARA REGISTRO
DEL LUGAR DEL HECHO
Sbtte. MSc. Andree Bernal C.
División Criminalística de Campo, Centro de Investigación Criminalística, IITCUP, UNIPOL, La Paz, Bolivia
RESUMEN
Se presenta información que podrá ser aplicada para la confección de “cuadernos de campo” durante el
registro del lugar del hecho, especialmente para los investigadores criminalistas del Instituto de Investi-
gaciones Técnico Científicas de la Universidad Policial Mcal. Antonio José de Sucre (IITCUP), de la Fuer-
za Especial de Lucha Contra el Crimen (FELCC), la Fuerza Especial de Lucha Contra la Violencia
(FELCV) u otras unidades policiales que realicen labor criminalista de campo según el actual ordena-
miento jurídico boliviano, a fin de reducir la perdida de datos e incrementar la calidad de la información
generada durante el procesamiento del sitio donde ocurrió un hecho delictivo.
Palabras clave: Criminalística de campo, registro del lugar del hecho, cuaderno de campo.
ABSTRACT
This overview presents information that can be applied for making the “field notebook” during the crime
scene registration, especially for criminal investigators of the Instituto de Investigaciones Técnico
Científicas de la Universidad Policial Mcal. Antonio José de Sucre (IITCUP), of the Fuerza Especial de
Lucha Contra el Crimen (FELCC), the Fuerza Especial de Lucha Contra la Violencia (FELCV) or other
police units engaged in criminal fieldwork under current Bolivian law, to reduce data loss and increase
the quality of information generated during processing of the sire where a crime occurred.
Key words: Field forensics, crime scene registration, field notebook.
66 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
DESARROLLO
La criminalística como disciplina Científica auxi-
liar del derecho penal se encarga del descubri-
miento y verificación científica del delito y del
delincuente, se divide en dos grandes áreas: la
Criminalística de Campo y la Criminalística de
laboratorio.
Dentro del trabajo de campo que realiza la crimi-
nalística se encuentra el Registro del lugar del
hecho, estipulado en el artículo 174 del Código de
Procedimiento Penal (CPP) Boliviano y tiene por
objeto material la protección, búsqueda, fijación y
colección de los indicios que puedan encontrarse
en la escena del crimen y que presumiblemente
guarden relación con el hecho que se investiga
con la finalidad de: reconstruir el mecanismo del
hecho, identificar a autores y víctimas, aportar
con material probatorio para el esclarecimiento
del hecho delictivo. Siendo de vital importancia,
ya que al ser el primer paso de toda investigación
criminalística, marcara el éxito o fracaso de la
misma, motivo por el cual se expone los conteni-
dos mínimos que deben recabarse de la escena del
crimen.
INFORMACIÓN SOBRE EL HECHO/DELITO.
Naturaleza del hecho/delito: Donde se anotará el
tipo de hecho que se investiga (ej. muerte de per-
sona) y si al momento del recibimiento de la noti-
tia criminis logramos encuadrar en algún tipo
penal de acuerdo al Código Penal (ej. suicidio,
homicidio, asesinato).
Lugar del hecho: Se anotará la ubicación del lugar
donde se cometió el hecho. Ciudad, zona, aveni-
da, calle, pasaje, edificio, número, piso.
Fecha del hecho: Se anotará la fecha en la que
sucedió el hecho. Día, mes, año.
Horas aprox.: Se anotará la hora aproximada en la
que suscito el hecho.
INFORMACIÓN DE FISCAL, INVESTIGADORES
Y PARTES EN LA INVESTIGACIÓN.
Denunciante/querellante: Se anotarán los nom-
bres de los denunciantes/querellantes y en su de-
fecto De oficio.
Denunciado/Imputado/Sindicado: Se anotarán
los nombres de los denuncia-
dos/imputados/sindicados o en su defecto “Con-
tra los autores”.
Fiscal: Se anotará el nombre del Fiscal de turno o
Fiscal asignado al caso según su asignación o
turno.
Investigador asignado al caso: Se anotará el
nombre del investigador a cargo del caso.
Investigador especial: Se anotará el nombre del
investigador a cargo de la investigación crimina-
lística.
Personal policial de acción directa: Se anotarán
en su existencia el grado, nombre y apellidos del
funcionario policial que realizo la primera inter-
vención y se hace el relevo del lugar del hecho,
unidad a la que pertenece, turno en el que se en-
cuentra o si se encuentra de descanso, número de
teléfono fijo o celular, fecha y hora de recibimien-
to de la noticia fehaciente o denuncia (hora de
comunicación), hora de llegada al lugar del hecho
y la forma de protección que se realizó del lugar
del hecho.
Personas presentes en la intervención: Se anota-
rán los nombres y apellidos, número de carnet de
identidad de las personas que presencien el regis-
tro del lugar del hecho y su calidad (Fiscal, Asig-
nado al caso, denunciante, sindicado, testigos,
curiosos), en el caso que no cuenten con cédula de
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 67
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
identidad se anotará el número de pasaporte,
DNI, libreta de servicio militar u otro documento
de identificación.
BREVE RESEÑA DE LA ACTUACIÓN
PREPARACIÓN, ORGANIZACIÓN Y REGISTRO.
Datos, fecha y hora de comunicación: Se anotará
la fecha y la hora en que se recibió la noticia del
hecho, tipo de comunicación (personal, llamado
telefónico, requerimiento fiscal); identificación del
comunicante, y los datos suministrados de situa-
ción exacta del lugar, descripción de lo visto, hora
de hallazgo, cantidad de víctimas y circunstancias
que califican el hecho. En caso de existencia de
requerimiento fiscal deberá anotarse el punto de
pericia. En casos especiales de riesgo N.R.B.Q.
(nuclear, radiológico, bacteriológico y químico)
tomar en cuenta sintomatología de víctimas, con-
diciones medioambientales del lugar del hecho.
Para valorar correctamente la actuación, los me-
dios empleados y necesidad de unidades especia-
lizadas.
Fecha y hora de llegada: Se anotará la fecha y
hora de llegada al lugar del hecho y finalización
del registro del lugar del hecho.
Personal encargado del registro del lugar del
hecho y sus funciones: Se anotarán el grado,
nombres, apellidos y las funciones asignadas al
personal que realizará el registro del lugar del
hecho (fotógrafo, planimetrista, personal de bús-
queda y colección, personal de registro y respon-
sable de la cadena de custodia, peritos especialis-
tas, etc.).
Material utilizado: Se anotará un listado adminis-
trativo del material que se utilizó para llevar a
cabo el registro del lugar del hecho.
Protección y preservación del lugar: Relevado el
lugar del hecho con el personal policial de acción
directa o haciéndose cargo del mismo, se deter-
minará ampliar o reducir el perímetro inicial. To-
mando en cuenta evitar posibles fuentes de riesgo
o peligro inminente que puedan destruir, conta-
minar, alterar o deteriorar los indicios en el lugar
del hecho (ej. Incendio, tránsito de vehículos o
personas, inundación, etc.)
Se anotará la forma de protección: Clausura (luga-
res cerrados) aislamiento (lugares abiertos, esta-
bleciendo un círculo de protección mínimo de
unos 25 a 50 metros desde el epicentro del lugar
del hecho), coordinación con personal policial
para resguardo (investigador asignado al caso y
unidades que concurren al lugar del hecho), utili-
zación de cintas perimétricas amarillas y rojas en
habilitación de perímetros internos y externos.
Establecimiento de pasillos de acceso al foco prin-
cipal.
Información preliminar: Se anotará la informa-
ción relativa al suceso desde el momento que se
tiene conocimiento del mismo, aportes de los tes-
tigos, víctimas e incluso autores y detenidos. Con
ello se pretende saber cómo han podido suceder
los hechos y de esta forma orientar la Inspección y
los medios humanos y técnicos a emplear.
Narrativa descriptiva: La narrativa es una des-
cripción general de la condición del lugar de los
hechos. Se debe presentar una descripción de lo
general a lo específico. Anotar los hallazgos que
llamen la atención (ventanas abiertas, desorden en
una cama, hendiduras en las puertas, manchas
rojizas en las paredes o piso, etc.) y aquellos que
probablemente tengan relación con el hecho que
se investiga.
INFORMACIÓN SOBRE EL LUGAR DEL HECHO
(al momento de la intervención).
Tipo de lugar: Abierto, cerrado, mixto.
68 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Condiciones en las que se encontró: Preservado
o No preservado.
Condiciones de iluminación: Buena, regular,
mala.
Tipo de privacidad del lugar: Lugar privado (ca-
sa, departamento, habitación, etc.), público (ave-
nida/calle, pasaje/callejón, plaza/parque) o ex-
puesto al público (Bar/restaurante, local de ven-
tas, oficina, deposito).
PROCESAMIENTO DEL LUGAR DEL HECHO
Método de búsqueda aplicado: Se anotará cual
método de búsqueda de indicios será aplicado
dependiendo de la naturaleza del hecho, tipo del
lugar del hecho, extensión del lugar y cantidad de
personal; a fin de realizar la búsqueda metódica
en todo el lugar, incluyendo piso, paredes y obje-
tos que se encuentren en el lugar del hecho.
Indicios encontrados en el lugar del hecho: Se
realizará un listado de los indicios encontrados,
describiendo: la cantidad, naturaleza, estado, co-
lor, tamaño, particularidades, lugar de hallazgo y
en lo posible una interpretación de los mismos
(tomar en cuenta si se justifica el estado, la ubica-
ción y probable mecanismo de producción). Se
tomará en cuenta el uso de luces forenses y equi-
po especial para poder reconocer los indicios.
El encargado del registro y cadena de custodia
elaborará las actas de colección y cadena de cus-
todia de los indicios colectados en el lugar del
hecho, consignando en la parte inferior del mismo
las firmas, grado, nombres, apellidos y función de
los intervinientes en el lugar del hecho, así como
los nombres completos firmas y números de car-
net de los testigos presentes.
Listado fotográfico: Se anotarán las especificacio-
nes técnicas del equipo fotográfico utilizado
(Marca de cámara, modelo, digital o analógica,
tipos de objetivos, flash, memoria, rollo, trípode,
“close-ups”, filtros y accesorios varios), personal
encargado de la fotografía, tomando en cuenta
comenzar desde cero en la memoria de la cámara
la toma de fotografías y no borrar ninguna foto-
grafía tomada.
Se realizará un listado fotográfico que consigne:
número de toma, Vista, ángulo, descripción de la
toma, observaciones, utilización de accesorios,
testigos métricos, etc. Siendo la secuencia fotográ-
fica de lo general a lo específico.
Croquis planimétrico: Se anotarán los materiales
utilizados para levantar el croquis (dibujo a mano
alzada) planimétrico del lugar del hecho y la lista
del personal encargado de la planimetría.
Se anotará en un extremo del croquis el norte
magnético, utilizando para el dibujo como míni-
mo tres colores. Negro para: estructuras, paredes,
puertas, ventanas, objetos, etc. Rojo para: indicios
y símbolos. Azul para: medidas tomadas en cotas.
En la parte inferior del croquis se anotarán las
leyendas y símbolos utilizados.
LIBERACIÓN DEL LUGAR DEL HECHO
Disposición del lugar: Realizado un repaso críti-
co de todos los aspectos del registro y verificación
de la documentación así como de los indicios, se
anotará la hora, fecha y la función, grado nombres
y apellidos de la persona a quien se entrega el
lugar del hecho, finalizado su procesamiento para
su disposición final (Fiscal, investigador asignado
al caso o autoridad competente), tomando en
cuenta la posibilidad del precintado para futuras
pericias o trabajos técnicos que puedan o queden
pendientes realizarse en el lugar del hecho.
Fecha y hora de salida: Se anotará la fecha y hora
de llegada al lugar del hecho y finalización del
registro del lugar del hecho.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 69
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Entrega de los indicios/cadena de custodia: Se
anotará la fecha, hora y nombre de la persona
encargada de la Div. Custodia de indicios o evi-
dencias de la unidad criminalista, a quien se en-
tregan los indicios consignando las condiciones
de los indicios, tipo y condiciones de embalaje, así
como el número de registro de la entrega.
CONCLUSIONES
Se han consignado los elementos de información
útil que pueden recabarse del lugar de los hechos
incrementando la eficacia de la labor de los peri-
tos en criminalística de campo e investigadores de
escena del crimen de las unidades de la policía
Boliviana.
El presente cuaderno de campo se lo realizó en
base a la experiencia operativa en labores de cri-
minalística de campo de la Fuerza Especial de
Lucha Contra el Crimen y el Instituto de Investi-
gaciones Técnico Científicas de la Universidad
Policial fundamentado en los manuales de buenas
prácticas en la escena del crimen del Grupo Ibe-
roamericano de trabajo en la escena del crimen
(GITEC) parte de la Academia Iberoamericana de
Criminalística y Estudios Forenses (AICEF) del
cual el IITCUP de la Policía Boliviana forma parte,
así como de procedimientos de administración y
manejo del lugar de los hechos del Federal Bureau
of Investigation (FBI).
RECOMENDACIONES
El presente trabajo de investigación se pone en
conocimiento de las Unidades policiales que rea-
lizan labores criminalistas de campo en el lugar
de los hechos a nivel nacional, para que puedan
implementar cuadernos de campo y sea instru-
mento bibliográfico y formativo para personal
que trabaje en el lugar de los hechos o escena del
crimen.
REFERENCIAS
Academia Iberoamericana de Criminalística y
Estudios Forenses (AICEF). 2010. Manual
de buenas prácticas en la escena del cri-
men.
Bernal, A.. 2013. Aplicación de un informe de
registro del lugar del hecho para casos de
muerte de persona en la Fuerza Especial
de Lucha Contra el Crimen. Tesis de
maestría Universidad Policial Mcal. Anto-
nio José de Sucre, La Paz, Bolivia.
Federal Bureau of Investigation (FBI). 2012. Ad-
ministración y manejo del lugar de los
hechos. Recolección y preservación de la
evidencia.
Instituto Nacional de Ciencias Penales
(INACIPE). 2013. Protocolos de cadena de
custodia. Dos grandes etapas, preserva-
ción y procesamiento. Segunda edición.
México, D.F.
70 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
NOTA TÉCNICA - GENÉTICA
PROTOCOLO DE PURIFICACIÓN DE ADN DE HOJAS DE
Theobroma cacao L. PARA ESTUDIOS DE GENÉTICA
POBLACIONAL CON MICROSATÉLITES (STR)
Eva Chávez C.1, Daniela Arteaga V.2 & Marinés Giraldo C.
1 Unidad Académica Campesina Tiahuanaco (UAC-T), Universidad Católica “San Pablo”, La Paz, Bolivia.
2 Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial, Policía Boliviana.
INTRODUCCIÓN
Las muestras obtenidas a partir de plantas están
entre las más complejas para lograr una adecuada
purificación de material genético de alta calidad,
el cual es necesario para los subsecuentes análisis
poblacionales o filogenéticos, como estudios de
microsatélites o de secuencias. Además, en la ma-
yoría de los casos, esto involucra el uso de nitró-
geno líquido en el tejido, para luego molerlo utili-
zando un mortero; nitrógeno líquido que es difícil
y riesgoso de manipular, incluso en laboratorio.
Por esta razón, a continuación se presenta un pro-
tocolo simple para la obtención de ADN a partir
de tejido foliar previamente desecado, en la con-
sideración de que el ADN debe ser purificado
previniendo su degradación y asegurando dife-
rentes usos.
MATERIALES Y MÉTODOS
Colecta de muestras
Se colectaron muestras de hojas frescas y sanas de
262 plantas adultas de T. cacao L. (cacao Nacional
Boliviano) a partir de 8 poblaciones de cacao cul-
tivadas y 12 comunidades de cacao silvestre loca-
lizadas en el Norte del Departamento de la Paz
(Bolivia): comunidades silvestres ubicadas en el
cauce del Río Beni, el cauce del Río Madidi y el
noroeste de La Paz, municipio de Guanay. Asi-
mismo, también se analizaron muestras previa-
mente desecadas y conservadas en sílica gel du-
rante un periodo de tres años proporcionadas por
Wildlife Conservation Society (WCS). Finalmente,
se incluyeron en la muestra hojas desecadas que
presentan contaminación por hongos.
Extracción de ADN
Las muestras de hojas previamente colectadas
fueron desecadas en sílica gel de la siguiente ma-
nera: una hoja de T. cacao L. colocada en papel
absorbente introducida en una bolsa de cierre
hermético (ziploc) con 10 g de sílica gel, en consi-
deración de que por la alta humedad del ambiente
de la zona de colecta, se realizaron al menos tres
reemplazos de la sílica gel presente en las bolsas
para asegurar el secado completo de las hojas.
Una vez que las hojas se encontraban completa-
mente desecadas, se procedió a pulverizarlas en
mortero con el fin de producir la lisis celular hasta
obtener al menos 100 mg de un fino polvo, al que
se añadieron 700 µl de buffer CTAB al 2% (20 g
de CTAB, 10 g de PVP, 100 ml de 1M Tris-Cl pH
8,0; 40 ml de 0,5 M EDTA pH 8,0, 280 ml de 5 M
NaCl para un volumen final de 1000 ml) precalen-
tado a 65 C, de acuerdo al método propuesto por
Borsch et al. (2003). Los tubos se incubaron a 65 C
durante 30 minutos realizando vórtex ocasional-
mente, centrifugando posteriormente a 10.000
rpm durante 10 minutos, prosiguiendo una se-
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 71
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
gunda y tercera extracción con buffer CTAB des-
pués de la que se realiza una centrifugación a
10.000 rpm durante 10 minutos recuperando el
sobrenadante, al que se le añaden 700 µl de la
mezcla cloroformo y alcohol isoamílico (24:1).
Después de mezclar vigorosamente, se incuba a
4C durante 20 minutos, centrifugando a 12.000
rpm durante 10 minutos, de esta manera se obtie-
ne tres fases: una superior acuosa, una intermedia
con flóculos y proteínas, y otra inferior de cloro-
formo. Trnasferir cuidadosamente la fase superior
a un tubo de 1,5 ml, añadiendo 1 volumen de clo-
roformo y alcohol isoamílico (24:1). Una vez reali-
zada la centrifugación, transferir cuidadosamente
la fase superior a un nuevo tubo de 1,5 ml, al que
se le añaden 0,08 volúmenes de acetato de amonio
7,5 M frío y dos volúmenes de etanol al 95%, in-
cubando después de una vigorosa mezcla a –20 C
durante 1 hora. Centrifugar a 12.000 rpm durante
20 minutos a 4C. Descartar cuidadosamente el
sobrenadante evitando la pérdida del precipitado.
Realizar un lavado con 500 µl de etanol al 70%,
centrifugando a 12.000 rpm durante 10 minutos,
descartando el sobrenadante y retirando el exceso
de etanol con un papel absorbente. Secar el preci-
pitado de ADN y re-suspender en 50 µl de agua
ultra pura. Añadir 25 µl de acetato de sodio 3M
pH 5,5 y precipitar lavando con dos volúmenes de
etanol absoluto. Mezclar vigorosamente e incubar
a – 20C durante 30 minutos (la incubación tam-
bién puede ser O.N.). Centrifugar a 12.000 rpm
durante 20 minutos a 4C, descartar cuidadosa-
mente el sobrenadante para no perder el precipi-
tado y dejar secar por 15 minutos a 65 C. Re-
suspender con 100 µl de agua ultra pura.
La calidad del ADN extraído se verificó en gel de
agarosa al 1% teñido con bromuro de etidio y se
cuantificó en espectrofotómetro UV/visible a 260,
280 y 320 nm, determinándose el grado de dilu-
ción adecuado para cada muestra hasta alcanzar
una concentración final de 0,8ng/µL para poste-
riormente realizar el análisis de los extractos con
tres marcadores microsatélites: CIR-33, CIR-37 y
CIR-12 de acuerdo al protocolo propuesto por
Lambert et al. (2008).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
De las 262 muestras procesadas se obtuvo ADN
apto para PCR de 248 hojas (94,66%). Cabe men-
cionar que los extractos obtenidos varían signifi-
cativamente en cuanto a calidad y cantidad, en-
contrándose entre 17 y 260 ng/µl (Figura 1), ob-
servándose bandas relativamente intensas con
poca degradación, lo que indica que el protocolo
permite obtener ADN genómico intacto de mues-
tras de tejido foliar, incluyendo muestras conser-
vadas por un periodo de tres años. Por otro lado,
de 15 de las 17 muestras que presentaban mala
conservación, incluyendo la presencia de hongos,
no se obtuvo material genético analizable, visuali-
zándose óptimos resultados únicamente en dos
muestras cuyo grado de contaminación era signi-
ficativamente bajo.
Figura 1. Electroforesis en gel de a agarosa al 1%, mos-
trando productos de extracción de ADN de
Theobroma cacao L.
Así, de acuerdo a lo establecido en otros estudios,
en que las concentraciones de ADN de tejido ve-
getal varían entre 30 y 1802 ng/µl con un prome-
dio de 248 ng/µl, el protocolo propuesto recupera
concentraciones de ADN que se acercan al pro-
medio, aunque es claro que en muestras dañadas
esta concentración puede ser menor (Chia, 2009;
72 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
Rosero, 2013), pero suficiente para realizar análi-
sis de microsatélites (Figura 2). Por otro lado, el
protocolo propuesto no se ve afectado por la alta
tendencia a la fenolización del tejido foliar de ca-
cao.
Por otro lado, la evaluación de los extractos de
ADN obtenidos con los 3 marcadores microsatéli-
tes resultó en tres bandas de buena calidad y can-
tidad, separadas en función a su peso molecular
(Figura 2).
Figura 2. Electroforesis de los productos de amplificación de
PCR multiplex para tres marcadores microsatélites: CIR-33,
CIR-37 y CIR-12.
CONCLUSIÓN
El protocolo de extracción de ADN de tejido foliar
de Theobroma cacao L., “CTAB modificado” a par-
tir del protocolo propuesto por Borsch et al.
(2003), proporcionó un resultado favorable en
cuanto a cantidad y calidad de ADN, el cual fue
suficiente para llevar a cabo la amplificación de
marcadores microsatélites mediante la técnica de
la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
AGRADECIMIENTOS
A Wildlife Conservation Society (WCS) por el
trabajo desarrollado en la colecta de las muestras
de tejido foliar y a Helvetas Swiss Coorporation
por haber financiado la presente investigación.
REFERENCIAS
Borsch, T.; Hilv, K.; Quandt, D.; Wilde, V., Nein-
huis, C. & Barthlott, W. 2003. Non-coding
plastid trnT-trnF sequences reveal a well
supported phylogeny of basal angio-
sperms. Journal of Evolutionary Biology,
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Chia, J. 2009. Caracterización molecular median-
te marcadores ISSR de una colección de
50 árboles clónales e híbridos de cacao
(Theobroma cacao L.) de la UNAS-Tingo
Maria. (Tesis de Maestria). UNAS, Tingo
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Increasing Accuracy and Throughput in
Large-Scale Microsatellite Fingerprinting
of Cacao Field Germplasm Collections.
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IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 73
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
NOTA TÉCNICA - GENÉTICA
EXTRACCIÓN DE ADN EUCARIOTA A PARTIR DE HISOPADOS
ORALES DE AVES SILVESTRES EMPLEANDO PARTÍCULAS DE
SILICA (DIÓXIDO DE SILICIO)
Suarez G. Fabiola
Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial, Policía Boliviana.
Recibido Julio 2014 – Aceptado Octubre 2014
INTRODUCCIÓN
Una suficiente cantidad y pureza de ADN, obte-
nida mediante técnicas de bajo costo y sin mucho
trabajo, son las premisas más importantes para
cualquier investigador el momento de aplicar
protocolos de extracción de ADN (Osorio-
Cadavid et al., 2009). La extracción de ADN es un
proceso clave para el éxito de las posteriores téc-
nicas de PCR (Velasco, 2004) y la obtención de
ADN a partir de muestras orales es especialmente
crítico (Tsung-Hsing et al., 2010), debido a factores
como la presencia de bacterias, hongos o rema-
nentes alimenticios en la cavidad oral que pueden
contaminar la muestra e inhibir el proceso de PCR
(Sun & Reichenberg, 2014).
Los hisopados orales se han constituido en una
interesante alternativa no invasiva para la colecta
de material genético en humanos y animales. En
comparación con la obtención de ADN a partir de
muestras de sangre, la extracción de ácidos nu-
cleicos a partir de hisopos orales ha demostrado
ser menos costosa, no requiere de personal médi-
co capacitado para obtención de sangre periférica
y es una técnica mejor tolerada en niños (Nedel et
al., 2009). La practicidad de esta técnica la ha con-
vertido en una de las más utilizadas para la colec-
ta de material genético en especies de animales
pequeños como ratones, murciélagos y aves pe-
queñas (Meldgaard et al., 2004; Brookes et al.,
2005, Stone et al., 2005).
El ADN aislado de los hisopos orales puede ser
usado para aplicaciones forenses, pruebas de pa-
ternidad y detección de patógenos o enfermeda-
des hereditarias (McMichael et al., 2009).
En aves, principalmente en especies silvestres, el
ADN celular obtenido es un elemento muy im-
portante para ser empleado en varias pruebas
moleculares a fin de determinar el sexo en espe-
cies sin dimorfismo sexual (Moreno, et al., 2011),
estudiar la dinámica poblacional con fines citoge-
néticos (Ansón, 2011) o de conservación (Cam-
pagna, 2012), análisis filogenéticos (López-López,
2010) entre otros.
La colecta de muestras es una de las fases de la
investigación que demanda mayor costo y tiem-
po, así como el almacenamiento y transporte de
las muestras colectadas (Sun & Reichenberger,
2014). Existen ciertas circunstancias donde la co-
lecta de buenas cantidades de material biológico
de alta pureza es difícil de conseguir, como por
ejemplo en animales pequeños o neonatos. Por
esto, el propósito de este estudio fue contar con
una técnica de extracción rápida y sencilla a partir
de hisopos orales de aves silvestres, para obtener
cantidades suficientes de ADN eucariota que
permitan realizar pruebas de PCR.
74 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
MATERIALES Y MÉTODOS
Para este estudio se emplearon 6 hisopos orales
de aves psitacidas decomisadas al tráfico ilegal de
fauna silvestre en Bolivia y/o entregadas a Cen-
tros de Custodia de Fauna Silvestre entre los años
2010 y 2011. Las muestras fueron colectadas pre-
via inmovilización física de las aves, empleando
hisopos orales pediátricos de poliéster con mango
metálico; los manejadores de las aves contaban
con el respectivo equipo de bioseguridad (barbijo,
gafas protectoras, bata y guantes de nitrilo). La
colecta se realizó introduciendo el hisopo a la ca-
vidad oral del ave y raspando la mucosa oral en la
región de los carrillos, lengua y paladar superior.
Debido a la dificultad que representa la sujeción
física de las aves y el riesgo de estrés por manipu-
lación, el raspado de la mucosa oral con el hisopo
no tomaba más de 10 segundos y no se recomen-
dó el ayuno en las aves para no incrementar el
estrés, debido que estas habían sido recién deco-
misadas.
Una vez colectadas las muestras, estas fueron al-
macenadas en buffer de transporte a base de tio-
cianato de guanidina e introducidas inmediata-
mente en termos con nitrógeno líquido para su
traslado a laboratorio y almacenamiento final en
freezer de ultra baja temperatura (-80°C) hasta su
procesamiento.
Extracción de ADN y cuantificación
La extracción de ADN de todas las muestras se
realizó empleando el protocolo de Boom et al.
(1990). A la muestra (hisopo y buffer de lisis de
transporte) se añadió 900 µl de buffer L6 (descrito
en Boom et al., 1990) e inmediatamente vortexea-
do (5 segundos aproximadamente). La muestra
con este buffer fue incubada a 65ºC por 30 minu-
tos, vortexeando por 5 segundos cada 15 minutos.
Pasado el tiempo de incubación, se exprimió y
desechó el hisopo y centrifugó a 14000 r.p.m por
4 minutos. Se colectaron 500µl del sobrenadante a
un tubo nuevo y se añadió 40µl de silica (descrito
en Boom et al. 1990), después de un vórtex corto
se dejó reposar 10 minutos a temperatura ambien-
te. Pasado el tiempo, se centrifugó por un minuto
a 14000 r.p.m., empleando una micropipeta se
desechó todo el sobrenadante y se añadió 1 ml de
buffer L2 (descrito en Boom et al., 1990), poste-
riormente se realizó un vórtex por un minuto o
hasta que se disuelva el pellet. El tubo nuevamen-
te se centrifugó por un minuto a 14000 r.p.m y
empleando una micropipeta se desechó el sobre-
nadante. Se repitió el lavado con buffer L2. El la-
vado del pellet con etanol se realizó dos veces con
1 ml de etanol 70% a temperatura ambiente, vór-
tex por un minuto o hasta que se disuelva el pe-
llet, se centrifugó por 1 minuto a 14000 rpm y se
desechó el sobrenadante empleando una micropi-
peta. Finalmente, se añadió 1 ml de acetona, y
después de un vórtex por un minuto o hasta que
se disuelva el pellet, se centrifugó por 1 minuto a
14000 rpm y se eliminó el sobrenadante emplean-
do una micropipeta. El pellet fue secado a 65ºC en
estufa por 10 minutos con la tapa del tubo abierta
para permitir que se evapore toda la acetona. Se
añadieron 50µl de agua libre de DNAsas y RNasa
y se incubó por 15 minutos a 65ºC. Una vez con-
cluido el tiempo de incubación, se mezcló por
vórtex durante un minuto. Para la obtención de
los ácidos nucleicos, se centrifugó a 12000 rpm
por 2 minutos y empleando una micropipeta, se
colectó el sobrenadante a un tubo nuevo.
La cuantificación de DNA se realizó mediante
espectofotometría a UV260 nm empleando espec-
tofotómetro marca Perkin Elmer a una dilución de
1/35 de muestra para obtener un volumen final de
360µl.
A fin de verificar el éxito de la técnica de extrac-
ción, se realizó la prueba de PCR para amplificar
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 75
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
la región 18S presente en células eucariotas em-
pleando el protocolo de Messmer et al. (1997).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los resultados muestran que el protocolo em-
pleando partículas de sílica permiten extraer y
purificar exitosamente ácidos nucleicos a partir de
muestras de hisopados orales de aves silvestres.
Una media de ADN obtenido con este método fue
de 21 µg/ml (Figura 1.).
A pesar que las muestras fueron colectadas em-
pleando pequeños hisopos pediátricos, la ausen-
cia de glándulas salivares en la cavidad oral de las
aves, el hecho de que muchas de ellas se hayan
alimentado antes de la toma de muestra y que el
proceso de colecta en sí duro menos de 10 segun-
dos, se obtuvo una buena cantidad de ADN en la
cuantificación por espectofotometría (21 µg/ml).
Un estudio comparativo realizado por Satia-
Abouta et al. (2002) con hisopados orales de mues-
tras humanas para identificar si factores como el
número de raspados de la mucosa, la hora de co-
lecta (en la mañana y en ayunas o a cualquier ho-
ra del día) y la forma de colecta (presionando con-
tra la mucosa o realizando un raspado con el hi-
sopo), podrían afectar la cantidad de ADN recu-
perado, no encontró ninguna diferencia estadísti-
ca entre las muestras colectadas una vez en la
mejilla derecha, una vez en la izquierda o dos
veces en la mejilla derecha. Asimismo, no hubo
diferencia entre las muestras colectadas en la ma-
ñana antes de comer y aquellas colectadas a cual-
quier hora del día. Tampoco se registraron dife-
rencias entre las muestras colectadas solo presio-
nando el hisopo contra la mucosa con aquellas
obtenidas raspando la mucosa. Vale la pena men-
cionar que en ese estudio el raspado de la mucosa
fue de 30 segundos, logrando obtener con este
procedimiento una media de 12,1µg/ml de ADN,
por el contrario el protocolo aquí presentado
cuantificó más ADN en las aves muestreadas
(21µg/ml), con raspados de la mucosa oral de me-
nos de 10 segundos de duración. Aunque la can-
tidad de ADN obtenido se encuentra en el rango
mínimo de los valores de ADN obtenidos a partir
de muestras de sangre- entre 22,6 y 119,2µg por
ml de sangre (Hansen et al., 2007), la obtención de
ADN a partir de hisopos orales de aves silvestres
empleando sílica constituye una buena alternativa
para ser aplicada en muestras con pocas posibili-
dades de aislar material genético como es la colec-
ta de hisopos orales en animales pequeños.
REFERENCIAS
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perdiz roja (Alctoris rufa I.) y su aplica-
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ie, J.S.Pritchard, P.A. Racey, N.P. Moore &
-20
0
20
40
60
80
Ave 1 Ave 2 Ave 3 Ave 4 Ave 5 Ave 6Can
tid
ad d
e A
DN
µg/
ml
Muestra
Figura 1. Cuantificación de ADN a partir de hisopos orales empleando método de
extracción a base de silicon dioxide
76 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
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IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 77
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
NOTA TÉCNICA – GENÉTICA
GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR DE Helicobacter pylori
POR PCR ANIDADO Y MULTIPLEX
Poquechoque B., Georgia & Salazar Ch., Karina.
1 Centro de Investigación Genética, Instituto de Investigaciones Técnico Científicas de la Universidad Policial “Mcal. Antonio
José de Sucre”. Policía Boliviana. La Paz, Bolivia. [email protected]
RESUMEN
El empleo de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permite genotipificar a Helicobacter pylori,
bacteria gram negativa de difícil cultivo in vitro, coloniza la parte superior del tracto gastrointestinal y
cuya detección es de suma importancia porque su presencia por largos periodos está asociado con gastri-
tis crónicas, úlceras pépticas y carcinomas gástricos. En el presente trabajo se estandarizó las condiciones
de la PCR anidada y multiplex con la cepa ATCC 43504, caracterizando un fragmento de 446 pb para la
detección de la región 16S de H. Pylori y de un fragmento de 567/642 y 259/286 pb para los genes VAG y
de 350 pb para el gen CAG, relacionados a su virulencia.
PALABRAS CLAVE: PCR-anidado, PCR-Mutipex, Helicobacter pylori.
ABSTRACT
The use of the Polymerase chain reaction (PCR) allows genotyping of Helicobacter pylori, a gram negative
bacterium of difficult crop in vitro which colonize the upper gastrointestinal tract and whose detection is
critical because their presence is associated of long periods of with chronic gastritis, peptic ulcers and
gastric carcinomas. In the present work conditions of a multiplex-nested-PCR with the ATCC43504 strain
were standardized, amplifying a fragment of 446 bp for the detection of the H. pylori 16S ribosomal re-
gion and other of 567/642 and 259/286 bp respectively from the VAG and 350 bp for the CAG genes, all of
them related to its virulence.
KEY WORDS: Nested-PCR, multiplex-PCR, Helicobacter pylori.
78 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
INTRODUCCIÓN
H. pylori ha sido identificada como la causa de
gastritis aguda y crónica activa, enfermedad ulce-
ro péptica y gastritis atrófica. Igualmente se corre-
laciona en la génesis del adenocarcinoma gástrico
y linfoma de MALT. En junio de 1994, la Agencia
Internacional para la Investigación sobre el Cán-
cer, perteneciente a la Organización Mundial de la
Salud, declara que la bacteria H. pylori es un car-
cinógeno de primera clase en los seres humanos,
lo que lo sitúa entre los agentes tumorigénicos
más peligrosos (Anselmi et al., 2007, Serrano et al.,
2009).
La respuesta inmune ante la infección por H. pylo-
ri es particularmente diversa, y está relacionada
con las variantes alélicas de los factores de viru-
lencia que presentan las cepas de Helicobacter pylo-
ri para desarrollar cáncer gástrico. Entre los prin-
cipales factores de virulencia los genes más estu-
diados son Cag A y Vac A. Existen evidencias de
que las citotoxinas y enzimas codificadas por es-
tos genes son responsables del daño directo a la
mucosa epitelial.
La detección de H. Pylori a través de métodos
convencionales como el test de ureasa, el examen
histopatológico y la prueba del aliento, suelen
presentar problemas en su detección debido a la
escasa cantidad de bacterias presentes en la mues-
tra, a la distribución discontinua de la bacteria
ocasionado por la administración de medicamen-
tos antisecretorios, antibióticos o sales de bismuto,
asimismo, el cultivo de estos microorganismos
resulta difícil y laborioso.
El empleo de técnicas moleculares, como la reac-
ción en cadena de la polimerasa (PCR) y sus va-
riantes han permitido el diagnóstico de microor-
ganismos de difícil cultivo, como es el caso de H.
pylori, por lo que ofrece un diagnóstico confiable,
más rápido y menos laborioso que los cultivos
normales de estos microorganismos (Premoli et
al., 2004)
Otra de las ventajas de la PCR radica en que la
secuencia específica de interés no necesita estar
aislada del resto de su genoma y la cantidad de
material genético que hace falta para el inicio de
la reacción es muy pequeña, siendo únicamente
necesaria la cantidad de ADN contenida en una
sola célula, esto le ofrece una alta sensibilidad a la
prueba, además de que aporta una ayuda consi-
derable no sólo en el campo del diagnóstico de la
infección como lo hacen los métodos convencio-
nales, sino también en la tipificación bacteriana,
en la detección de los factores genéticos responsa-
bles de la virulencia a partir de diversas muestras
como biopsias gástricas, placa dental, saliva, etc..
Por lo expuesto, la incorporación de técnicas mo-
leculares para el diagnóstico de H. pylori garanti-
zará la detección de este microorganismo a partir
de diversas muestras biológicas donde se sospe-
che su presencia mínima, empleando la técnica
PCR-anidado diseñada para aumentar la sensibi-
lidad de la reacción del ensayo que consta de dos
grupos de cebadores dirigidos contra la misma
diana. El primer grupo de cebadores amplifica
una región de interés mientras que el segundo
grupo de cebadores amplifica la región interna o
anidado con respecto al primer grupo (Koneman.,
2008). Este procedimiento amplifica la región de
interés del ADN dos veces con una gran especifi-
cidad.
Además, la aplicación de la PCR-Multiplex permi-
tirá caracterizar los diferentes genotipos de la bac-
teria permitiendo el estudio de cepas comensales
y virulentas relacionadas con problemas gástricos
y de cáncer gástrico a través de la amplificación
simultánea de secuencias específicas de los genes
Vac A y Cag A, relacionados con su virulencia.
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 79
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
MATERIALES Y MÉTODOS
Extracción de ADN
La extracción de ADN se realizó a partir de culti-
vos de la cepa ATCC 43504 utilizando el método
de extracción QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen),
basado en lisis y tratamiento de las muestras con
proteinasa K (10 mg/ml) y purificación con co-
lumnas en presencia de una alta concentración de
sales. Los extractos de ADN a partir de cultivos
control se obtuvieron empleando el método modi-
ficado de Wizard (Promega).
PCR Anidado
Se amplificó la región 16S del genoma bacteriano,
que corresponde a una secuencia conservada a lo
largo de la evolución bacteriana con poca frecuen-
cia de mutación, lo que permite el diseño de ce-
badores comunes para detectar cualquier bacteria,
esta región es específica de bacterias y no existen
en hongos, virus o ADN humano. Se empleó el
par de cebadores FD1
(5'AGAGTTTGATCCTGGCTCAG3') y RP2
(5'ACGGCTACCTTGTTACGACTT3') de la región
16S (Marchesi et al., 1998) obteniendo un fragmen-
to de 1500 pb. Luego se realizó una reacción PCR-
anidado sobre este fragmento con los cebadores
específicos 16S1
(5'CTGGAGAGACTAAGCCCTCC3') y 16S2
(5'AGGATGAAGGTTTAAGGATT3') descritos
por Mapstone et al., 1993 para caracterizar un
fragmento de 446 pb correspondiente a H. pylori.
PCR Múltiplex
Para realizar la genotipificación de los genes Vac
A y Cag A se utilizó 3 juegos de cebadores, VAI-F
(5'ATGGAAATACAACAAACACAC3') y VAI-R
(5'CTGCTTGAATGCGCCAAAC3'), VAG-F
(5'CAATCTGTCCAATCAAGCGAG3') y VAG-
R(5'GCGTCAAAATAATTCCAAGG3'), cag5c-
F(5'GTTGATAACGCTGTCGCTTC3') y cag3c-
R(5'GGGTTGTATGATATTTTCCATAA 3') descri-
tos por Paniagua et al., (2007) realizando modifi-
caciones al protocolo establecido por los mismos.
Corrida Electroforética
Los fragmentos esperados se visualizaron en geles
de agarosa al 1, 1.8 y 2% empleando un transilu-
minador UV.
RESULTADOS
La Figura 1, muestra la amplificación del frag-
mento universal 16S rRNA de 1500 pb del geno-
ma de distintos microorganismos a partir de una
PCR convencional.
Figura 2. Amplificación por PCR-anidado de la
región 16S rRNA de H. pylori. Carril 1, cepa ATCC
43504 (H. pylori); carril 2, Proteus spp.; carril 3, control
negativo (agua); carril 4 y 5, E. coli; carril 6, marcador
de peso molecular de 100 pb
446 pb
(16S
rRNA Hp.
pylori)
Figura 1. Amplificación por PCR de la región
16S rRNA universal. Carril 1, cepa ATCC 43504
(H. pylori); carril 2, Proteus spp.; carril 3, control
negativo (agua); carril 4, E. coli
1500 pb (16S rRNA universal)
80 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
La Figura 2, muestra la reacción de la PCR-
anidada realizada sobre el 16S rRNA del genoma
universal de los procariotas amplificando especí-
ficamente el fragmento 16S rRNA de 446 pb del
genoma de H. pylori a partir de la cepa ATCC
43504.
La Figura 3, muestra la genotipificación de la cepa
ATCC 43504 empleando la PCR-Multiplex lo-
grando caracterizar fragmentos de los genes Vac y
Cag.
CONCLUSIÓN
La aplicación de técnicas moleculares en la detec-
ción de H. pylori permitirá realizar un diagnóstico
específico y sensible de esta bacteria en nuestro
medio considerando que la prevalencia de pacien-
tes que tienen úlcera ocasionada por ésta, consti-
tuye un riesgo para la población a desarrollar en-
fermedades crónicas con etiologías relacionadas a
H. pylori. De esta manera es necesario aplicar estas
técnicas en diferentes muestras como biopsias,
heces fecales, saliva y placa dental por su alta sen-
sibilidad y especificidad.
REFERENCIAS
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Vag 567/642 pb
Cag 350 pb
Vai 259/286 pb
Figura 3. Amplificación por PCR-Multiplex de la
región 16S rRNA de H. pylori. Carril 1, marcador de
peso molecular de 100pb; carril 2, cepa ATCC43504
(H. pylori) mostrando los genotipos Vag y su variante
Vai y el genotipo Cag; carril 3, control negativo
(agua).
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 81
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
A LOS AUTORES
Desarrollar herramientas para generar políticas y estrate-
gias institucionales que permitan mejorar la seguridad ciu-
dadana y prever o apoyar la lucha contra el crimen, el nar-
cotráfico y el contrabando, requiere con urgencia de inves-
tigación científica básica, pura y/o aplicada de nuestra
realidad, para construir con solidez la base que permita la
toma de decisiones y la creación u optimización de tecnolo-
gía diseñada específicamente para alcanzar estos objetivos,
que son de eminente interés nacional.
La responsabilidad de la Institución Policial abarca y requiere de la participación de todas las áreas del
conocimiento humano, pues los retos y desafíos que enfrenta surgen de un amplio y denso espectro de
presión social, cultural, ética y humana que se alimenta de las aspiraciones, la historia y el tiempo vivi-
dos, inexorables e impertérritos en su avance y evolución. He aquí la razón de condensar en un solo títu-
lo el abanico de temas, líneas de investigación y ramas del conocimiento al que puede y debe llegar la
sociedad para superarse a sí misma.
IITCUP CIENCIA está dedicada a la publicación y divulgación de trabajos de investigación científica y
tecnológica principalmente proyectados, desarrollados o realizados en el territorio boliviano, con énfasis
en aquellos trabajos cuyo objetivo sea proporcionar conocimiento para el desarrollo de tecnología propia
adaptada a la realidad nacional, que persigan mejorar la calidad de vida de nuestra sociedad, que conci-
ban proyectar un futuro visionario y ambicioso de desarrollo técnico científico boliviano y provean solu-
ciones a los problemas y desafíos que enfrenta la institución policial y la sociedad en su conjunto.
Áreas temáticas sugeridas:
- ARQUITECTURA - ECOLOGÍA Y MEDIO AMBIENTE
- ARTES - ELECTRÓNICA
- BALÍSTICA - ENTOMOLOGÍA
- BIOLOGÍA - GENÉTICA
- BIOQUÍMICA - HUELLOGRAFÍA
- BOTÁNICA - MECÁNICA
- CIENCIAS DE LA SALUD - MEDICINA FORENSE
- CIENCIAS POLICIALES - QUÍMICA
- DERECHO - TOXICOLOGÍA
- DOCUMENTOLOGÍA - OTRAS CIENCIAS Y DISCIPLINAS CTF.
IITCUP CIENCIA recibe y publica artículos de divulgación o investigación científica y tecnológica, revi-
siones (monografías), estudios de caso, sinopsis de tesis y notas técnicas, prioritaria pero no exclusiva-
mente de interés o relevancia policial. El formato y contenido de los textos se describe a continuación
según tipo:
A) ARTÍCULOS DE DIVULGACIÓN O INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA Y TECNOLÓGICA: Docu-
mento en formato WORD tamaño carta (21,59 x 27,94 cm), tipo de letra “Arial 12”, márgenes de 1
IITCUP
CIENCIA® PUBLICACIÓN CIENTÍFICA DE LA POLICÍA BOLIVIANA
82 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
cm y contenido estándar siguiente: TÍTULO, AUTORES, RESUMEN (español), ABSTRACT (in-
glés), JUCH’URIMANCHANA (aymara), PALABRAS CLAVE, INTRODUCCIÓN, MATERIALES
Y MÉTODOS, RESULTADOS, DISCUSIÓN, CONCLUSIONES, AGRADECIMIENTOS Y
REFERENCIAS.
B) REVISIONES O MONOGRAFÍAS: Documento en formato WORD tamaño carta (21,59 x 27,94
cm), tipo de letra “Arial 12”, márgenes de 1 cm y el contenido a discreción del autor, aunque se
sugiere el siguiente: TÍTULO, AUTORES, RESUMEN (español), ABSTRACT (inglés),
JUCH’URIMANCHANA (aymara o quechua), INTRODUCCIÓN, DESARROLLO (a discreción),
CONCLUSIONES, RECOMENDACIONES, AGRADECIMIENTOS Y REFERENCIAS.
C) ESTUDIO DE CASO: Documento en formato WORD tamaño carta (21,59 x 27,94 cm), tipo de letra
“Arial 12”, márgenes de 1 cm y el contenido a discreción del autor, aunque se sugiere el siguiente:
TÍTULO, AUTORES, RESUMEN (español), ABSTRACT (inglés), JUCH’URIMANCHANA (ayma-
ra o quechua), INTRODUCCIÓN, DESARROLLO (a discreción), CONCLUSIONES,
RECOMENDACIONES, AGRADECIMIENTOS Y REFERENCIAS.
D) NOTAS TÉCNICAS: Documento en formato WORD tamaño carta (21,59 x 27,94 cm), tipo de letra
“Arial 12”, márgenes de 1 cm y contenido estándar siguiente: TÍTULO, AUTORES, RESUMEN
(español), ABSTRACT (inglés), JUCH’URIMANCHANA (aymara o quechua), PALABRAS
CLAVE, INTRODUCCIÓN, MATERIALES Y MÉTODOS, RESULTADOS, AGRADECIMIENTOS
Y REFERENCIAS.
Las tablas, figuras, gráficas y esquemas se presentarán insertos en el documento WORD. Las fotogra-
fías digitales se adjuntarán adicionalmente como archivos JPG de alta resolución. Las citas y
REFERENCIAS se presentarán en el formato más reciente de la American Psychological Association
(APA).
Los autores podrán enviar sus documentos al correo electrónico:
o enviarlos en CD etiquetado y sobre cerrado a:
IITCUP – UNIPOL
Av. Hugo Ernst 7404
Bajo Seguencoma
La Paz - Bolivia
TelFax: 2-2786977
IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 83
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)
CONTENIDO
PRESENTACIÓN 4
LA COOPERACIÓN INTERNACIONAL EN LA EDUCACIÓN POLICIAL 5
LA CRIMINALIDAD EN LA VÍA 7
DESARROLLO TECNOLÓGICO EN ANAPOL ¿ES POSIBLE? 10
EFICIENCIA DEL ENSAYO DE QUIMIOLUMINISCENCIA (LUMINOL) ENTRE DIFERENTES
SOPORTES Y TRATAMIENTOS 11
COMPARACIÓN DE LA TÉCNICA DEL “ÁRBOL DE NAVIDAD” ENTRE MUESTRAS FRESCAS Y
SECAS DE SEMEN HUMANO 18
ESTRÉS LABORAL Y ESTRATEGIAS DE AFRONTAMIENTO EN LA FUERZA ESPECIAL DE
LUCHA CONTRA LA VIOLENCIA CASO: POLICÍAS FEMENINAS 22
VELOCIDAD INICIAL DE PROYECTILES 9 MM DE CARTUCHOS ENSAMBLADOS EN FÁBRICA
VS. RECARGADOS ARTESANALMENTE 34
SATURACIÓN DE TRÁFICO EN LA AVENIDA 6 DE MARZO, EL ALTO, BOLIVI 43
IDENTIFICACION DE RESTOS HUMANOS SEMI-CALCINADOS MEDIANTE ADN NUCLEAR Y
MITOCONDRIAL 49
DISEÑO Y DESARROLLO DE UN SISTEMA TECNOLÓGICO PARA LA CAPTURA DIGITAL DE
IMPRESIONES DACTILARES 63
CUADERNO DE CAMPO PARA REGISTRO DEL LUGAR DEL HECHO 67
PROTOCOLO DE PURIFICACIÓN DE ADN DE HOJAS DE THEOBROMA CACAO L. PARA
ESTUDIOS DE GENÉTICA POBLACIONAL CON MICROSATÉLITES (STR) 72
EXTRACCIÓN DE ADN EUCARIOTA A PARTIR DE HISOPADOS ORALES DE AVES SILVESTRES
EMPLEANDO PARTÍCULAS DE SILICA (DIÓXIDO DE SILICIO) 75
GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR DE HELICOBACTER PYLORI POR PCR ANIDADO Y
MULTIPLEX 79
A LOS AUTORES 83