Date post: | 14-Aug-2015 |
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Lisis celular asociada a la pared y membranas celulares
LA PARED BACTERIANA
Las cubiertas que rodean la célula se han identificado por medio de técnicas de tinción y técnicas de aislamiento y caracterización bioquímica de los componentes celulares.
Las principales cubiertas son: cápsulas y limos la pared celular de las bacterias Gram-positivas la pared celular de las bacterias Gram-negativas la membrana plasmática los mesosomas (invaginación de la membrana
plasmática)
La relación topográfica entre la pared celular y la membrana plasmática se observa en esta micrografía electrónica.
A. Microfotografía electrónica de la bacteria Gram positiva Micrococcus lysodeikticus mostrando la gruesa capa de peptidoglicano que conforma la pared celular (cw), por debajo de ella la membrana plasmática (cm), un mesosoma(m), y el nucleoide (n).B. Célula bacteriana procesada mostrando la línea de fractura entre la membrana citoplasmática (m.i.) y la pared celular (m.e.). Barra = 1 µm.
Dos grupos de bacterias carecen de pared celular: los Mycoplasma que poseen solamente membrana
celular las formas L derivadas de bacterias que perdieron su
habilidad de sintetizar su pared celular
--Gram +--Gram -
Pared celular de peptidoglicanos
-Forma característica
-Provee protección mecánica
LISIS
El mecanismo de lisis es el siguiente:
La destrucción de la pared celular deja al protoplasma de las bacterias rodeado únicamente por la membrana celular ("protoplasto"), lo cual convierte a la bacteria en un organismo extraordinariamente sensible a las variaciones de tonicidad del medio, esta es la base del fenómeno de aclaración que tiene lugar luego de la acción de la lisozima, cuando la solución es hipotónica.
INTERÉS BIOTECNOLÓGICO
• Extracelulares
• Intracelulares
Tipo de metabolito
• La lisis celular
Operación untaría • Selección de
lisis
Tipos de lisis
Cuando son intracelulares
Métodos de lisis
Mecánicos
Molinos de perlas Homogenización
Químicos
Choque osmóticoEnzimasTratamiento alcalinoDisolución lipídica
Digestión enzimática
• Fundamento: Digestión de la pared celular• Ejemplo:
• Sin embargo las bacterias Gram – son mas sensibles a otros métodos de lisis como los molinos de perlas por su membrana externa.
Lisozima Rompen enlaces
Ácido- acetimurámico y N-acetil glucosamina
Choque osmótico
• Ruptura de la membrana
Disolución lipídica
Que es?
• Método químico por el cual se desestabiliza la pared celular por solventes orgánicos.
Fundamento
• El solvente es absorbido por los lípidos de la pared celular , lo que produce la expansión y la ruptura de esta.
Técnica
• El volumen de solvente que sea agrega es aproximadamente igual al 10% de la biomasa .
METODOS MECANICOS
MOLINOS DE PERLAS
MOLIDO EN MOLINO DE PERLAS
Fundamento
Las células son prensadas entre perlas de vidrio
En donde se aplica
Tratamiento de suspensiones celulares a gran escala
Homogenizador
Fundamentos para
selección de lisis
Sistemas celulares de
secreción
Métodos de rompimiento
celular
permeabilización
Estructura de pared celular