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PRÁCTICA 5Sesión 1
Observación de cromosomas humanos
Curso 2007 - 2008
GENÈTICA MENDELIANAPráctica 5: ObjetivosPráctica 5: Objetivos
Observar cromosomas metafásicos con tinción diferencial (Cromosomas arlequines).
Observar preparaciones de linfocitos de sangre periférica humana - Cariotipo humano.
Observar cambios estructurales de los cromosomas.
GENÈTICA MENDELIANAPráctica 5: ObjetivosPráctica 5: Objetivos
Observar cromosomas metafásicos con tinción diferencial (Cromosomas arlequines).
GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCE – Sister Chromatid Exchange testSCE – Sister Chromatid Exchange test
Ensayo para detectar lesiones en el DNA.
Detecta intercambio de material entre las 2 cromátidas de un cromosoma que se puede visualizar mediante tinción diferencial.
Producirse rotura en la doble cadena del DNA y el posterior intercambio y unión del DNA.
En la fase SInducción por mutágenos y carcinógenos (aductos, interferencia con la replicación DNA...)
GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCESCE
Base molecular ¿?
SCE no son letales para la célula.
SCE biomarcador de exposición.
Ensayo sensible a la acción de agentes genotóxicos.Evaluación de riesgo
Nivel basal SCE: 6-10 SCE / célula.
Factor confusión: edad, sexo, estilo de vida
Fuerte relación entre fumar y SCE.Frecuencia
Significado
biológico
GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCE SCE
24 h0 h 48 h 72 h
Fitohemaglutinina 5-Bromo-2-deoxiuridina Colcemid
-KCl
-Carnoy
HoestchIrradiación con UV (350 nm)
Tinción Giemsa
Linfocitos (G0)M1 M2
SCESCE - Incorporación de la BrdU - Incorporación de la BrdU
1 cs
Fase S
BromodeoxiUridina (análogo Timidina)
METAFASE- M1
División
M2
Fase S División
Fase S M3
GENÈTICA MENDELIANAIntercambio de Cromátidas HermanasIntercambio de Cromátidas HermanasSCESCE
SCE
+BrdUrd
G1 S
Metafase 1
G2
1r ciclo 2n ciclo
G1
S
G2
M 2
GENÈTICA MENDELIANASíndrome de BloomSíndrome de Bloom
SCE SCE
SCE en un individuo normal SCE individuo con Síndrome de Bloom.
PRÁCTICA 5Sesión 1
Observación de cromosomas humanos
Curso 2007-2008