Date post: | 14-Nov-2015 |
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PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUMICA METABLICA
1. ACTIVIDAD URESICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLGICO
2.
CAPACIDAD AMORTIGUADORA Y POTENCIAL AMORTIGUADOR (P DE MUESTRAS BIOLGICAS
3. DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE), EN FORRAJES, POR EL MTODO DE FENOL-CIDO SULFRICO
ERNESTO CARLOS MARTELO DIAZCODIGO: 7.920.500
CCAV: Simn Bolvar
MARIA GABRIELA ROMERO
ESCUELA ECAPMAMAYO DE 2014
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD
LABORATORIO 1
INTRODUCCINLa ureasa (EC 3.5.1.5) es una enzima que cataliza la hidrlisis de urea a dixido de carbono y amonaco. La reaccin ocurre de la siguiente manera:(NH2)2CO + H2O CO2 + 2NH3.
Se encuentra principalmente en semillas, microrganismos e invertebrados. La ureasa es esencial en el ciclo del nitrgeno ya que la mayora de las plantas solo pueden utilizar el nitrgeno en forma de nitrato y amonio
MAPA CONCEPTUAL
MENTEFACTO
MATERIALES Y MTODOS.
CUADRO I: LISTA DE EQUIPOS UTILIZADOSMateriales y equipos requeridos
MATERIA / EQUIPO
CARACTERSTICA
Tubo de ensayoPyrex mediano
GradillasMetlica
PinzasPara bureta
Erlemeyer125 ml
Pipetas graduadas5 a 10 ml
Matraz aforado100 ml
Bao termostatadoTemperatura 37 C
Beaker400 ml
Vareta25 ml
Soporte UniversalMetlico
MuestrasSuelo, forraje, harina
CUADRO II: LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOSReactivos a utilizar
REACTIVOSFORMULACONCENTRACION
Clorur de mercurioHgCl21%
cido ClorhdricoHCI0,1N
Clorur de SodioNaCl1%
UreaH2NCONH0,25M
UreasaEn Buffer0,5%
PROCEDIMIENTO: Extraccin y solubiliza ion de ureasas en harina suelos o forraje (mtodo salting out): peso de la muestra +/- 1g, 10ml de NaCl 1 % en un tubo de centrifuga, agitar por 5 minutos, centrifugar a 3500 mpr por 5 minutos, el precipitado se descarta, tomar el sobrenadante y medir Vf = VS, rotular tubos de ensayo: EHAU (extracto de harina para actividad ureasica), ESAU ( extracto de suelo para actividad ureasica, EFAU( extracto de forraje para actividad Ureasica). CUANTIFICACIN DE LA AU: mezclar los reactivos como indica la tabla de la gua en la pgina 5. TITULACIN: tara y alistar montaje y enrazar la ureta con HCl 0.1 N, tomar 3 ml de B en Erlenmeyer con 3 gota de indicador tashiro, color azul verdoso prueba positiva para ion NH4. Titular B hasta color rosado violaceo (prueba positiva para ion NH4, registrar en tabla de datos ml de HCl gastados, repetir procedicmiento anterior con ST y las muestras.EN LABORATORIO Peso muestras: Wm; Extraccin con NaCl 1%; Centrifugacin; Filtracin; medida sobrenadante: Vs; Titulacin con HCl; Registro de mL gastados: VHCl; Tabla de datos
Muestras/TubosIndicadores
Wm(g)Vf(mL)V HCI(mL)
Suelo
Harina
Forraje
Standar
Blanco
Tipo de muestras analizadasOrigen, ubicacin, geografa, regin,
RESULTADOS ESPERADOS: La actividad de la enzima ser mayor en el suelo, intermedia en forrajes y menor en la harina, igualmente con la cantidad de HCl 0.1 N gastado.
GLOSARIO:
RBE: Reaccin Bioqumica Enzimtica, sigue cinemateca Michaelliana AU: Actividad ureasica: velocidad con que la ureasa hidroliza la urea, hasta convertirla en Amonio y gas carbnico NNP: Nitrgeno No proteico: Nitrgeno presente en molculas orgnicas como la urea e inorgnicas como Amonio y el Nitrato (NO3-) Urea
LABORATORIO 2
Ttulo de la prctica: Carbono orgnico, materia orgnica y capacidad amortiguadora de suelos
INTRODUCCION
El suelo es un mezcla heterognea y contiene componentes orgnicos e inorgnicos, con capacidad amortiguadora, que es el potencial qumico que tienen los sistemas edficos para regular y controlar su pH, cuando son sometidos a procesos de acidificacin y alcalinizacin; esta regulacin se da por la presencia de sistemas amortiguadores biolgicos, de la materia orgnica e inorgnica del suelo.
MATERIALES Y MTODOS.
Materiales & equipos requeridos
Material / Equipo Caractersticas Material / Equipo Caractersticas
Erlenmeyer De 125mL Erlenmeyer De 125mL
Pipetas graduadas De 10mL Pipetas graduadas De 10mL
Esptula metlica Esptula metlica
Probeta graduada De 100mL Probeta graduada De 100mL
Bureta De 25mL Bureta De 25mL
Soporte universal Metlico, con pinza para bureta. Soporte universal Metlico, con pinza para bureta.
Beaker De 250mL Beaker De 250mL
Potencimetro Resistor cuyo valor de resistencia es Variable. De esta manera, se puede controlar la intensidad de corriente que fluye.
Equipo de titulacin Bureta y un matraz Erlenmeyer. Equipo de titulacin Bureta y un matraz Erlenmeyer.
Balanza analtica Balanza analtica
EspectrofotmetroSirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra
Celdas espectrofotomtricas
EmbudosEl embudo es un material empleado para canalizar lquidos y materiales gaseosos granulares en recipientes con bocas angostas.
Papel filtroPapel que se corta en forma circular y se introduce en un embudo de filtracin, con el fin de ser filtro para las impurezas insolubles y permitir el paso a la solucin a travs de sus poros
Muestras de sueloFraccin de suelo
REACTIVOS A UTILIZAR
REACTIVOFROMULACONCENTRACION
cido sulfricoH2SO4Concentrado
Dicromato de potacio, 1NK2Cr2O7 1N
cido fosoforicoH3PO4
DifelinaminaC12H11N
Hidroxido de Sodio 0, 1NNaOH 0 1N
cido Clorhidrico 0, 1NHCL 0 1N
FenolftaleinaC20H14O4
Agua destiladaH2O
Solucion Bufer fosfato
PROCEDIMIENTO
En Campo Se deben muestrear 500 g de suelo
En laboratorio Carbono Orgnico (CO), Mtodo de titulacin volumtrica Carbono Orgnico (CO), Mtodo Espectrofotomtrico Capacidad amortiguadora , Mtodo Potenciomtrico
DIAGRAMA DE FLUJO
Datos para determinacin de carbono orgnico, mtodos volumtricos y espectrofotomtricos
Muestras Peso (Wm) VFeSO4 Absorbancia (A)
M1
M2
Blanco (B)
Datos pontenciomtricos para capacidad amortiguadora de suelos
MuestrasPeso (Wm)Volumen(mL)pH1pH2
Suelo 1
Suelo 2
Agua Destilada
Solucin Buffer
RESULTADOS ESPERADOS:
Hallar los valores de carbono orgnico, materia orgnica y Nitrgeno total en las muestras estudiadas. Hallar los valores de capacidad y potencial amortiguador de las muestras analizadas
LABORATORIO 3
Ttulo de la prctica: Determinacin de carbohidratos no estructurales, en forrajes, por el mtodo de fenol-cido sulfrico INTRODUCCIN
La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos, y cataliza la reaccin de descomposicin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno. En esta prctica, la actividad de catalasa se determinar por el mtodo permanganomtrico, en el cual se titula el perxido residual, es decir, el que no particip en la RBE, con una solucin de permanganato de potasio (KMnO4) de concentracin conocida MENTEFACTO DIAGRAMA CONCEPTUAL
MATERIALES Y EQUIPOS
MATERIA / EQUIPO
CARACTERSTICA
Soporte universalMetlico con pinzas para bureta
Pipeta GraduadaDe 5 y 10 ml
Probeta GraduadaDe 100 ml
BeakerDe 400 ml
Tubos de ensayoCon gradilla
ErlemeyerDe 125 ml
BuretaDe 25 ml
REACTIVOS A UTILIZAR
REACTIVOFROMULACONCENTRACION
Buffer fosfatoH2O20,03 M
cido sulfricoH2SO42N
Permanganato de fosfatoKMnO40,01 M
PROCEDEMIENTO
EN CAMPO:
Se toman frutas, verduras y suelos concentrados en muestras picadas o pulverizada (2g) para determinar los extractos de las mismas para la catalasa.
EN LABORATORIO:
Wm, centrifugacin, filtracin, Vf, agitacin, rotulacin y determinacin de extracto para catalasa.
ESQUEMA
Muestras /tubos Indicadores Wm (g) Vf (mL) VKMnO4 (mL)
Suelo
Harina
Forraje
Verdura
Blanco
Tipo de muestras Analizadas
Origen, ubicacin geogrfica, regin, agro climatologa
RESULTADOS ESPERADOS: Determina la cantidad de carbohidratos totales No estructurales, basndose en su contenido de almidones hidrolizables y azcares solubles.
GLOSARIO
ESPECTROFOTMETRO: Instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra.
TRANSMITENCIA: Es una magnitud que expresa la cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en la unidad de tiempo (potencia).
ABSORBENCIA: Es la cantidad de intensidad de luz que absorbe la muestra.
BIBLIOGRAFIA
Granados, J.,(2010),Modulo Bioqumica Metablica, Unidad 2,cap 2; ECAPMA; UNAD Granados, J.,(2010),Protocolo prcticas de laboratorio, Paginas 3-8; ECAPMA; UNAD Granados., J; Garca, J.,(2000),Fsico-Qumica Aplicada; Cap 11, Ed Antropos, Bogot, Colombia
http://amortiguadoresbiologicos.blogspot.com/ es.wikipedia.org/wiki/Compuesto_orgnico www.wordreference.com/definicin/heterogneo
http://es.wikipedia.org/wiki/Absorbancia
http://es.wikipedia.org/wiki/transmitencia
ERNESTO CARLOS MARTELO DIAZ CCAV: SIMON BOLIVAR, [email protected]