Date post: | 14-Apr-2018 |
Category: |
Documents |
Upload: | marite-saad |
View: | 236 times |
Download: | 0 times |
of 49
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
1/49
SENSIBILIDAD A LOSANTIMICROBIANOS EN LAS
BACTERIAS ANAEROBIAS
Liliana Fernndez Canigia
San Luis- Agosto 2013
[email protected]/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
2/49
Infecciones por bacterias anaerobias:
Resistencia a los antimicrobianos La penetracin del antibitico en el
lugar de infeccin, la eficacia de los
antibiticos frente a los mo aerobios. Dificultades en determinar la
correlacin entre resistencia y evolucin
clnica, por falta de identificacin ypruebas de sensibilidad
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
3/49
Por qu hacer pruebas desensibilidad para anaerobios?
Redondo et al: Bacteriemia porB. fragilisfue un predictor independiente demortalidad en pacientes sometidos a
ciruga intra-abdominal (RR: 4.9; 95%CI: 3.7-6.0; P = .009). Estudio controlado(Clin. Infect Dis , 1995)
Nguyen et al. han demostrado. en un
estudio prospectivo de bacteriemias porBgf, relacin entre resistencia altratamiento recibido y mayor mortalidady persistencia microbiolgica (45% vs16% p=0,03)(Clin. Infect Dis 2000)
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
4/49
Por qu hacer pruebas desensibilidad para anaerobios? Se ha reportado resistencia a
antibiticos considerados activosfrente a bacterias anaerobias: Metronidazol (Lancet 1978, Anaerobe
1995)
Imipenem (Bandoh, 1993, Subanaerobios 2011)
beta-lactamicos+inhibidores (Sub.anaerobios, 2002, 2010)
multirresistencia (Wareham, D. CID,
2005) 9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
5/49
JAC, 2003
CID, 2005
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
6/49
Cundo hacer pruebas desensibilidad para anaerobios? Fines Clnicos
En situaciones de infecciones severas:bacteriemias refractarias a tratamiento,osteomielitis, SNC, focos endovasculares, etc.
Frente a los microorganismos con resistenciaconocida y/o reconocida patogenicidad(Bacteroides grupo fragilis, Prevotella spp.,Clostridium spp., Fusobacterium spp).
Aislamientos de microorganismos infrecuentes
con perfiles de sensibilidad desconocidos. Fines epidemiolgicos (vigilancia local y
nuevos antimicrobianos)Primer consenso argentino para pruebas de sensibilidad en bacterias anaerobias-
RAM, 2011- 43:51-669/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
7/49
Antimicrobianos tradicionalmenteactivos frente a bacterias anaerobias
- lactamicos: Penicilinas
-lactmicos+ inhibidores de -lac. Cefoxitina Carbapenemes
Cloranfenicol Metronidazol Clindamicina
Tetraciclinas 9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
8/49
Nuevos antimicrobianos conactividad frente a bacterias
anaerobias Nuevas quinolonas fluoradas:
gatifloxacina, moxifloxacina (97,1%actividad, Edmiston C, et al, AAC 2004,65,5% Snydman et al AAC 2007)
Ertapenem (99,1% actividad, Aldridge K,et al, D. Microb. Infect Dis. 2002)
Tigeciclina(90% actividad, Bgf; Betriu C,
JAC, 2005, 96%,Snydman et al AAC 2007,Subc. 100% actividad, 2012)
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
9/49
Caracterizacin de -lactamasasen el grupo Bacteroidesfragilis
Clase A de Ambler- grupo 2e:cefalosporinasa cromosmica, inhibiblepor c. clavulnico cepA: 1993- Rogers, MB. - B. fragilis no
activas frente a cefamicinas ycarbapenemes. Prevalencia :70 a 90% de losaislamientos
cfxA: 1993- Parker, AC y Smith, J.- B.
vulgatus- Hidroliza lentamente cefoxitina Asociada al Tn4555 movilizable - cblA: 1994- Parker, AC and Smith, J.- B.
uniformis- similar a cepA- 3,7% de los
aislamientos L. Fernndez Canigia9/08/2013
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
10/49
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
11/49
-lactmicos: Mecanismos deresistencia
-lactamasas Otros gneros Fusobacterium (
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
12/49
-lactmicos: Mecanismos deresistencia: Carbapenemasas
Clase B de Ambler - grupo funcional 3 de Karen Busch:metalocarbapenemasa, inhibible por EDTA Noinhibible por c. clavulnico. Descripta en Bacteroidesfragilis Hidrolizan carbapenemes y todos los otros -lactamicos
incluyendo cefamicianas Descriptas en Bf (Cuchural et al, 1986) cfiA: 1990- Rasmussen, BA. et al: B. fragilis -Esta enzima
puede estar silente. La expresin depende de secuenciasde insercin. 3% de los aislamientos
Expresin: debido a SI que actan como promotores de laEz: Transferible- Infrecuente (Snydman et al, 2011, 1,1%-2,5%-n 1957;
Betriu et al 2005, 0,7% -n 400, 4% Argentiina, 2010(n=363)(AAC, 2012).
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
13/49
-lactmicos: Mecanismos deresistencia Infrecuentes Bombas de eflujo: sobre
expresin:bmeB- (multidroga):resistencia a cefoxitina (JAC 2006)
PLP de baja afinidad Resistencia a cefoxitina y otras
cefalosporinas en Bgf R en cocos gram-positivos anaerobios
Impermeabilidad Recientemente estudiado en Bgf,
Pophyromonas y fusobacterias. Deficiencias de OMP: R a cefoxitina
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
14/49
Metronidazol: Propiedades yMecanismo de accin
Difunde a lo tejidos incluyendo SNC
El ATB con mejor actividad bactericida
frente a anaerobios. No activo frente a bacilos gram-positivos
NO esporulados:Actinomyces spp. ,Propionibacterium spp. (< 25% de
actividad) Pobre actividad frente a cocos
anaerobios (70% de actividad)
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
15/49
Metronidazol: Mecanismo deaccin
Metronidazol
Piruvato ferrodoxin
oxido-reductasa
(POR)
Metronidazol activo
reduccin grupo NO-2
Compuestos
intermediarios y
radicales libres
DNA
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
16/49
Metronidazol: Mecanismos deresistencia Siete genes cromosomales o
plasmdicos: nim A-G 5-nitroimidazol reductasa: Reduce
nitroimidazol a aminoimidazolAsociados a elementos mviles
CIM 2 - >32 g/ml (pueden deberse a IS)
Infrecuente (
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
17/49
Mecanismos de resistencia aATB no -lactmicos Clindamicina (50S) (erm f) y
tetraciclinas (30S): alteracin de lossitios de ataque ribosomales
Quinolonas:Alteracin del sitio blanco: Mutaciones en
gyrA (DNA girasa)- R alto nivel-
Transferible Bombas de eflujo: > 1 bomba de eflujo.
Quinolonas fluoradas y no fluoradas.(bmeB), (JAC 2006).
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
18/49
Mecanismos de resistencia aATB no -lactmicos
Cloranfenicol: Inactivacin de la droga(nitrorreduccin o acetilacin)
Aminoglucosidos: No puede ingresara la clula- Carece del sistema de
transporte.
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
19/49
Anaerobe Survillance Team: Bottiglieri, M (Crdoba, Crdoba), Rocchi M(Crdoba, Crdoba),Marquez, MI (Resistencia, Chaco), Machain M (Junn, Bs As), Mauro MC (San Genaro, Santa Fe),Nuez MR (Neuqun, Neuqun), Ballester D (CABA).
AAC, 2012, 56(3): 1309-14 Epub 2012, Jan 9
First National Survey of Antibiotic Susceptibility of the
Bacteroides fragilis Group: Emerging Resistance toCarbapenems in Argentina
Fernndez Canigia, L. Litterio M, Legaria M.C., Castello L, Predari SC, Di Martino A,
Rossetti A, Rollet R, Carloni C., Bianchini H., Cejas D., Radice M, Gutkind G, and th
Anaerobe Surveillance TeamSubcomisin de Bacterias Anaerobias- SADEBAC, AAM
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
20/49
Objetivo Determinar el patrn de sensibilidad a 10
antibiticos (ATB) de las especies deBacteroides grupo fragilis (Bgf) aisladas demuestras clnicas de centros hospitalarios de
Argentina.
Materiales y mtodosCepas: se incluyeron 363 aislamientos nicos y
consecutivos de Bgf procedentes de 17 centros dela Repblica Argentina, correspondientes alperodo 2006-2009: Bacteroides fragilis (198),Bacteroides thetaiotaomicron/ovatus (69),Bacteroides caccae (30), Bacteroides vulgatus(27) y otros Bgf (39).
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
21/49
Materiales y mtodos: Puntos decorte (CLSI, 2007)
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
22/49
RESULTADOS
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
23/49
Porcentaje de sensibilidad de
aislamientos de Bacteroidesgrupo
f ragi l isfrente a 10 antibiticos
Microorganismo
s (n)
% de sensibilidad
AMS TAZ CXT ERT IMI DOR CLI MET MOX TIG
B. fragilis (198)97 99 83 96 99 97 75 100 90 99
B. thetaiotaomicron
/ovatus (69)87 99 49 90 99 97 42 100 90 100
B. caccae (30) 90 100 63 95 100 96 63 100 87 97
B. vulgatus (27) 74 96 81 100 100 100 67 100 81 100
Otros B. grupo
fragilis(39)87 97 62 97 100 100 51 100 79 95
AMS: ampicilina/sulbactama, TAZ: piperacilina/tazobactam, CXT: cefoxitina, ERT: ertapenem; IMI: imipenem;
DOR: doripenem; CLI: clindamicina; MET: metronidazol; MOX: moxifloxacina; TIG: tigeciclina
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
Microorganismos (n) % S
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
24/49
-lactmicos+inhibidores
Porcentaje
CIM (ug/ml)
Ampicilina/sulbactama
Porc
entaje
CIM (ug/ml)
Piperacilina/tazobactama
Microorganismos (n) % S
AMS TAZ
B. fragilis (198) 97 99
B. thetaiotaomicron /ovatus
(69)87 99
B. caccae (30) 90 100
B. vulgatus (27) 74 96
Otros B. grupofragilis(39) 87 97
La lnea sobre los grficos indica el punto de corte de sensibilidad
%S total: 92%
%S total: 99%
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
25/49
9/08/2013
Frecuencia de distribucin de la CIM de
Ampicilina-sulbactama
en Bacteroidesgrupo fragilisen diferentes aos
Bianchini, Anaerobe (1999) 5, 417-420
0,1 0,25 0,5 1 2 4 8 16
010
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Porcentaje
de
cepas
CIM (ug/mL)
1986/87
1988/89
1990/92
1993/95
1997
N:86N:51N:73
N:51N:69
L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
26/49
Porce
ntaje
CIM (ug/ml)
Ertapenem
Porcentaj
e
CIM (ug/ml)
Imipenem
Porc
entaje
CIM (ug/ml)
Doripenem
Distribucin de las CIM de los tres
carbapenemes de todas las especiesMicroorganismo
s (n)
% Sensibilidad
ERT IMI DOR
B. fragilis (198) 96 99 97
B. thetaiotaomicron/ovatus (69)
90 99 97
B. caccae (30) 95 100 96
B. vulgatus (27) 100 100 100
Otros B. grupo
fragilis(39)97 100 100
%S total: 99%
%S total: 98%%S total: 96%
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
27/49
**Hospitales :1: Hospital de Pediatra Dr J. Garrahan, CABA , 2: Hospital Nacional de Clinicas, Crdoba, Cordoba 3: Hospital E. Torn,
CABA, 4: Hospital Alemn, CABA; 5: HIGA Dr. A Piero, Junn, Buenos Aires. IMI: imipenem, ERT: ertapenem, DOR: doripenem
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
28/49
0
10
20
30
40
50
60
70
1ro. 2do. 3ro. 4to
Perodos
%R
esis
tencia
BfBfnf
Cefoxitina
0
10
20
30
40
50
60
1ro. 2do. 3ro. 4to
%
Resistencia
Perodos
Bf
Bfnf
Clindamicina
Cefoxitina yClindamicina:variacin de la resistenciaa travs de los aos
Perodos
1ro.: 1989-1991- Nro. cepas: 53*
2do.: 1996-1998- Nro. cepas: 82*
3ro.: 1999-2000 - Nro. cepas: 65*
4to: 2006-2009- Nro cepas 363
*Susceptibility trends ofBacteroides fragilis group isolates from Buenos Aires, Argentina Subcomisin de
Anaerobios, RAM(2007), 39:156-160. ISSN 0325-7541- Bf:B. fragilis; Bfnf:Bacteroides grupofragilis nofragilis 9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
29/49
Moxifloxacina: distribucin de laCIM y % sensibilidad por especie
Porcentaje
CIM (ug/ml)
Moxifloxacina
Microorganismos (n) %S
B. fragil is(198) 90B. thetaiotaom icron
/o vatus(69)
90
B. caccae(30) 87B. vulgatus(27) 81
Otros B. grupo
fragi l is(39)
79
%S total: 91%
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
M id l Ti i li
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
30/49
Metronidazol y Tigeciclina:
distribucin de las CIM y porcentaje desensibilidad global
Porcentaje
CIM (ug/ml)
Tigeciclina
Porcentaje
CIM (ug/ml)
Metronidazol
100% S100 % S
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
31/49
Discusin y conclusiones
En este relevamiento se detectaron los primeros 4aislamientos resistentes a los carbapenemes IMI,ERT y DOR (CIM: 16->64 g/ml) descriptos ennuestro pas, 3 de la CABA y 1 de Crdoba. En tresaislamientos se observ inhibicin por el EDTA 0,4mM, fenotipo que sugiere la presencia de una metalo--lactamasa Clase B, grupo 3 de K. Bush, mecanismodescripto para estas especies (cfiA). Los tresaislamientos fueron resistentes a AMS y dos resistentesa TAZ. El cuarto aislamiento correspondi a B.theta iotaomicron/ovatus
que no presentinhibicin, indicando probablemente otro tipo demecanismo.
IMI fue el carbapenem ms activo.
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
32/49
DISCUSIN YCONCLUSIONES
TAZ mantuvo buena actividad, aunque es la primera vezque se observa resistencia a esta combinacin -lactmico-inhibidor de -lactamasa en nuestro medio.
AMS mostr la mayor actividad frente a la especie B.fragilis; B. vulgatus es la especie que mostr la mayorresistencia.
MET y TIG fueron los ATB no -lactmicos ms activos.Todos los aislamientos resultaron sensibles a ambos
ATB La actividad de MOX vari segn la especie.
FOX y CLI fueron los antibiticos menos activos comofue observado en estudios previos.
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
33/49
CONCLUSIONES
El hallazgo de aislamientos de Bgfresistentes, particularmente a IMI, TAZ yAMS, determina la necesidad derelevamientos peridicos para guiar los
tratamientos empricos.
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
34/49
ACTIVIDAD IN VITRO DE 10
ANTIMICROBIANOS FRENTE A BACTERIAS
ANAEROBIAS ESTUDIO MULTICENTRICO,
1999-2002Litterio M, Bianchini H, Carloni G, Castello L,
Di Martino A, Fernndez Canigia L, Greco G,Legaria C, Rollet R, Rossetti A y Predari S.
Subcomisin de Bacterias Anaerobias. SADEBAC-AAM. Buenos
Aires. Argentina
Rev. Argentina de Microbiologa (2004) 36:130-1359/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
35/49
Especies Antibioticos(% I + R)
AMP AMS CXT CRO IMP PIP TAZ AZI CLI MTZ
Pre (21) 52 0 0 0 0 0 0 18 5 0
Por (10) 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0Fu (26) 12 0 4 0 0 0 0 52 4 0
C spp (12) 25 0 0 8 0 0 0 73 25 0
CGP (22) 14 4 0 0 0 0 0 59 4 0
Resistencia de 166 cepas de bacterias frente a 10 ATBSubcomisin de Bacterias Anaerobias, SADEBAC-AAM
Rev. Argentina de Microbiologa (2004) 36:130-135
Pre: Prevotella spp.; Por: Porphyromonas spp.; Fu: Fusobacterium spp.; Cd: Clostridium difficile; Cspp:Clostridium spp.; CGP: cocos gram-positivos. AMP: ampicilina, AMS: ampicilina sulbactama, CXT:cefoxitina; CRO: ceftriaxona; IMI: imipenem; PIP: piperacilina; TAZ: piperacilina-tazobactama; AZI:
Azitromicina; CLI: clindamicina; MTZ: metronidazol.
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
36/49
EspeciesAntibioticos
(% I + R)
AMP AMS CXT CRO IMP PIP TAZ AZI CLI MTZ
Pre (21) 52 0 0 0 0 0 0 18 5 0
Por (10) 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0Fu (26) 12 0 4 0 0 0 0 52 4 0
C spp (12) 25 0 0 8 0 0 0 73 25 0
CGP (22) 14 4 0 0 0 0 0 59 4 0
Resistencia de 166 cepas de bacterias frente a 10 ATBSubcomisin de Bacterias Anaerobias, SADEBAC-AAM
Rev. Argentina de Microbiologa (2004) 36:130-135
Pre: Prevotella spp.; Por: Porphyromonas spp.; Fu: Fusobacterium spp.; Cd: Clostridium difficile; Cspp:Clostridium spp.; CGP: cocos gram-positivos. AMP: ampicilina, AMS: ampicilina sulbactama, CXT:cefoxitina; CRO: ceftriaxona; IMI: imipenem; PIP: piperacilina; TAZ: piperacilina-tazobactama; AZI:
Azitromicina; CLI: clindamicina; MTZ: metronidazol.
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
37/49
Especies
Antibioticos
(% I + R)
AMP AMS CXT CRO IMP PIP TAZ AZI CLI MTZ
Cd (10) 100 0 90 90 50 0 0 90 70 0
C spp (12) 25 0 0 8 0 0 0 73 25 0
CGP (22) 14 4 0 0 0 0 0 59 4 0
Resistencia de 166 cepas de bacterias frente a 10 ATB:
Gram-positivos
Subcomisin de Bacterias Anaerobias, SADEBAC-AAM
Rev. Argentina de Microbiologa (2004) 36:130-135
Cd: Clostridium difficile; Cspp: Clostridium spp.; CGP: cocos gram-positivos. AMP: ampicilina, AMS:ampicilina sulbactama, CXT: cefoxitina; CRO: ceftriaxona; IMI: imipenem; PIP: piperacilina; TAZ:piperacilina-tazobactama; AZI: Azitromicina; CLI: clindamicina; MTZ: metronidazol.
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
38/49
Conclusiones: Anaerobios
El conocimiento del genero y/o la especiepermite predecir la sensibilidad de un
aislamiento de una muestra clinica.Evaluar la necesidad de realizar pruebas de
sensibilidad en aislamientos clnicos
individuales
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
Bacterias Anaerobias
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
39/49
Mtodos de sensibilidad
Elucin encaldo condisco
Microdilucinen caldo
Dilucinenagar
E-test
Bacterias Anaerobias
Deteccin de -lactamasa
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
40/49
9/08/2013
Dilucin en agar
Mtodo de referencia NCCLS2001/CLSI 2007
Da valor de CIMCrecen TODOS los microorganismosSe prueban muchas cepas por vez
LaboriosoDifcil lectura
L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
41/49
MEDIOagar Brucella5 g/ml hemina1 g/ml vitamina K15% sangre ovina lacada
INOCULO FINAL 105 UFC/ml
INCUBACION anaerobiosis 37C x 48 horas
PUNTO FINAL
completa inhibicin o
la ms significativa reduccindel crecimiento con respecto al control
Dilucin en agar
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
42/49
Dilucin en
agar: Lectura
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
43/49
Microdilucin en caldo
Mtodo alternativo NCCLS 2001/CLSI 2007
Caldo Brucellasuplementado + sangre
lisada de caballo
+ diluciones de ATB
Da valor de CIM
Varios ATB por vez
Sensibilidad aislamientosclinicos
Difcil lectura
SOLO para B. grupo
fragilis9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
44/49
MEDIOcaldo Brucella5 g/ml hemina1 g/ml vitamina K15% sangre lisada de caballo
INOCULO 106 UFC/ml 105 UFC/pocillo
INCUBACION anaerobiosis 37C x 48 horas
PUNTO FINALcompleta inhibicin ola ms significativa reduccindel crecimiento con respecto al control
Microdilucin en caldo
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
45/49
Microdilucinen caldo:Lectura
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
46/49
E- test
Medio: Agar Brucella suplementadoInculo: Tubo 1 Mc Farland
Fcil
Crecen TODOS losmicroorganismos
Sensibilidad aislamientosclnicos
Elevado costo
Difcil lectura
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
47/49
9/08/2013
Elucin en caldo con disco
Fcil, econmico y rpido
No da valor de CIM
No lo recomienda el CLSI
Subcomision anaerobios:
100 cepas de anaerobios
98,5% de concordancia con
el mtodo patrn.
Discrepancias totales 1,5%
Errores very mayor: 0,5%
Mtodo screeningL. Fernndez Canigia
caldo BHI
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
48/49
MEDIO
caldo BHI5 g/ml hemina1 g/ml vitamina K10,5% extr. levadura
INOCULO
INCUBACION
LECTURA S, tubo lmpidoR, cualquier grado de turbidez
discos de antimicrobianos en 5 ml de medioconcentracin = punto de corte
CONTROLESde crecimientode esterilidadde contaminacin con aerobios
0,1 ml suspensin0,5 McFarland
anaerobiosis37C x 48 horas
Eluci
n
en
caldocond
isco
9/08/2013 L. Fernndez Canigia
Metodologa recomendada por el
7/30/2019 Sensibilidad Bacterias Anaerobias 2013 Para Dejar
49/49
Metodologa recomendada por elCLSI (exNCCLS) 2001- M11-
A5/CLSI 2007- Dilucin en agar: mtodo de
referencia
Microdilucin en caldo: paraBacteroides grupo fragilis
Deteccin -lactamasa (nitrocefn): en
microorganismos anaerobicos NOpertenecientes a B. grupo fragilis E-test: sugerido