UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLAS PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE

COMPONENTE PRCTICO

ELABORADO POR:

LEIDY DANIELA GOMEZ BERMUDEZ

CODIGO: 1.110.178.126

PRESENTADO A:

ZULMA LORENA DURAN

TUTOR

GRUPO: 358027_7

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD

TOXICOLOGIA AMBIENTAL

IBAGUE TOLIMA

2014

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ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLAS PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE

INTRODUCCION

El bioensayo de toxicidad con semillas de lechuga (Lactuca sativa) es una prueba esttica de

toxicidad aguda (120 horas de exposicin) en el que se pueden evaluar los efectos fitotxicos

de compuestos puros o de mezclas complejas en el proceso de germinacin de las semillas y

en el desarrollo de las plntulas durante los primeros das de crecimiento. Como puntos finales

para la evaluacin de los efectos fitotxicos, se determina la inhibicin en la germinacin y la

inhibicin en la elongacin de la radcula y del hipocotleo. Es importante destacar que durante

el perodo de germinacin y los primeros das de desarrollo de la plntula ocurren numerosos

procesos fisiolgicos en los que la presencia de una sustancia txica puede interferir alterando

la supervivencia y el desarrollo normal de la planta, siendo por lo tanto una etapa de gran

sensibilidad frente a factores externos adversos.

Si bien L. sativa no es una especie representativa de ecosistemas acuticos, la informacin

generada a partir de esta prueba de toxicidad proporciona datos acerca del posible efecto de

los contaminantes en las comunidades vegetales cercanas a las mrgenes de cuerpos de agua

contaminados, siendo tambin una especie interesante de considerar por su importancia desde

el punto de vista hortcola. Por otra parte, es de fcil y rpida germinacin por lo que es posible

desarrollar la prueba en pocos das.

Este bioensayo de toxicidad ha sido recomendado y aplicado por diferentes organismos de

proteccin ambiental para la evaluacin ecotoxicolgica de muestras ambientales y compuestos

puros, adems de la evaluacin del efecto fitotxico de plaguicidas sobre especies no blanco,

necesarios para el registro de estos compuestos (OECD, 1984; Wang, 1987; USEPA, 1989).

En la incorporacin de esta prueba en una batera de bioensayos es importante considerar el

compromiso entre la sensibilidad de la especie L. sativa, el reducido tiempo de exposicin de la

prueba con semillas, los bajos costos asociados y que no requiere equipamiento sofisticado, en

particular en la aplicacin a muestras ambientales o en el monitoreo de procesos de

detoxificacin, saneamiento, control de efluentes o reso de bioslidos.

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DIAGRAMA DE FLUJO DEL LABORATORIO ELABORADO

PREPARACIN DE SOLUCIN

MADRE DE NaCl

Aadir 11 gramos de sal a

recipiente de 1.5 L

Cerrar la tapa y agitar bien Aadir otros 100 ml de agua

sin gas al recipiente de

1.5L

Aadir 1 L de agua sin gas al

recipiente

Etiquetar

PREPARACION DE SOLUCION

CONTROL POSITIVO

Aadir 250 ml de solucin

madre de NaCl a recipiente

de 500 ml

Diluir con agua destilada

Aadir 1 L de agua sin gas al

recipiente

Cerrar la tapa y agitar bien Etiquetar

Colocar cuidadosamente 20

semillas

PREPARACION SOLUCION

CONTROL NEGATIVO

Ejecucin de las observaciones y mediciones

Muestra de agua sin gas y sin

saborizante, alistar mnimo

500mL para el bioensayo.

MONTAJE DEL BIOENSAYO Colocar en cada caja Petri un

disco de papel filtro

Marcar correctamente cada

caja de Petri con la dilucin

Colocar 4mL de cada

solucin en la caja de petri

correspondiente, saturar el

papel filtro

Colocar cuidadosamente 20

semillas

Tapar las cpsulas Repetir el procedimiento

pero utilizando el agua

embotellada (control

negativo) y la solucin de

NaCl como control positivo

Marcar con cinta de

enmascarar cada caja de

Petri envuelta con papel

aluminio

Colocar las placas en un

lugar seguro, a temperatura

ambiente por cinco das

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DESCRIPCIN DE LA MUESTRA LLEVADA AL BIOENSAYO Se obtuvieron las muestras de agua, proveniente de un rio contaminado, todas las aguas residuales provenientes de las casas, de los negocios o de cualquier actividad humana van a parar directamente al rio y que provocan contaminacin de este recurso llamado agua. Se tom una la muestra de agua, previamente identificada (recolectada en un rio donde con la ayuda de un tarro se procedi a recoger el agua, recolectndola en tarros, una vez tomado las muestras se cerraron y se rotularon las muestras. Para el montaje del bioensayo se tomaron las siguientes muestras:

Para el control negativo, se tom una muestra de agua sin gas y sin saborizante

Para el control positivo, Las soluciones de control positivo estn diseadas para obtener resultados similares de los que se obtendran con agua contaminada. Se prepara una serie de soluciones de agua salada, utilizando sal comn (NaCl). Estas soluciones permiten observar cmo reaccionan las semillas al agua contaminada.

Para la solucin madre: En esta solucin se aaden 11 gramos (2 cucharaditas a ras) de sal (NaCl) en agua envasada no carbonatada

Las muestras se obtuvieron del rio Ortega ubicado en el municipio de Ortega.

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RESULTADOS

semilla Elongacin de radcula (cm o mm) Elongacin Hipocotleo (cm o mm)

control +

control -

Muestra R1

Muestra R-2

Muestra R-3

control +

control -

Muestra R1

Muestra R-2

Muestra R-3

1 2 cm 1 cm 3 cm 2,5cm 3 cm 2 cm

3,5cm

3 cm 3 cm 3 cm

2 0,5 cm

1,9cm 3 cm 2, cm 1 cm 1 cm 4 cm 3,5 cm 3,5 cm 2 cm

3 2 cm 1,5 cm

3 cm 2,5 cm 2 cm 2 cm 4 cm 2,5 cm 2,5 cm 3 cm

4 1,5 cm

1 cm 2,5 cm

3,8 cm 2,5 cm 2,5 cm

4,5 cm

4 cm 3,5 cm 2 cm

5 2 cm 1,8cm 1,8 cm

1,7 cm 2 cm 2 cm 4 cm 2,5 cm 2,5 cm 2 cm

6 1 cm 1 cm 3,5 cm

3 cm 2 cm 2,5 cm

4 cm 3 cm 3 cm 3 cm

7 2 cm 3 cm 3 cm 4 cm 3 cm 2 cm 4,5 cm

3 cm 2,5Cm 3,5 cm

8 2 cm 2 cm 3 cm 1,5 cm 2 cm 2 cm 3,5 cm

3 cm 3 cm 2,5 cm

9 0,2 cm

4 cm 2 cm 3,8 cm 2,5 cm 0, 3 cm

1 cm 2,5m 2,5 cm 2 cm

10 3,5 cm

3,5 cm

3 cm 2,5 cm 2cm 2,5 cm 2 2 cm

11 0,5 cm

1,8 cm

2 cm 3 cm 4 cm 2 cm 0,5 cm 3 cm

12 2 cm 2 cm 2 cm 4 cm 2 cm 2 cm 2 cm

13 1,5 cm

2,5 cm 2 cm 4 cm 4 cm 3,5 cm 2,5 cm

14 3 cm 2 cm 2 cm 4,5 cm

4 cm 3 cm 3,5 cm

15 2,8 4 cm 3 cm 2 cm 3 cm 2 cm 2,5 cm

Germinacin control positivo

control negativo

muestra R-1

muestra R-2

Muestra R-3

9 11 18 19 17

efecto de germinacin

buena radcula

mala radcula

control positivo 7 2

control negativo 10 1

muestra R-1 18 0

muestra R-2 19 0

Muestra R-3 17 0

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cm

16 2 cm 2,5 cm 2 cm 4 cm 3,5 cm 3,5 cm 3 cm

17 1,5 cm

3 cm 2 cm 2,5 cm 2 cm 2,5 cm

18 2 cm 0,5 cm 4 cm 3 cm

19 3 cm

20

PROMEDIO

1,47 1,93

2,49

49,3

2,26

2,00

3,59

3,03

2,64

2,59

DESVIACION ESTANDAR

0,722

84161

1,128

79662

0,667

27913

0,9234

4385

0,5337

8504

0,46

291

1,020

1103

0,6745

85324

0,7632

2758

0,5372

1778

PORCENTAJE DE INHIBICION EN LA DEL CRECIMIENTO DE LA RADCULA Y DEL HIPOCOTILO

%Inhibicin radcula

R1 12942,9%

R2 134,6%

R3 117,5%

%Inhibicin hipocotleo

R1 84,3%

R2 73,4%

R3 72,02%

PROMEDIO DE INHIBICIN EN LA GERMINACIN

MUESTRA CONTAMINADA

VARIABLE M-R1 M-R2 M-R3 CONTROL NEGATIVO CONTROL POSITIVO

NUMEROS DE SEMILLAS GERMINADAS

18 19 17 11 9

PROMEDIO SG 18 10

PORCENTAJE DE INHIBICION DE LA GERMINACION

% Inhibicin germinacin

M-R1 163,6363636

M-R2 172,7272727

M-R3 154,5454545

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ANALISIS DE RESULTADOS Observando los resultados podemos ver que el porcentaje de germinacin para el control positivo fue de un 45%, para el control negativo fue de un 55%, para la muestra R1 es de un 90%, para la R2 es de un 95% y para la R3 es de un 85% con un promedio de germinacin del 74%, lo que permite evaluar la fitotoxicidad existente en el control positivo por la presencia de la sal, las muestras que se escogieron se dio ms la germinacin de la semilla de la lechuga. A pesar que el agua que se escogi para el estudio aunque no es apta para el consumo humano puede que haya gran presencia de micronutrientes por lo que se produce una gran germinacin mucho mejor que en el control negativo.

CONCLUSIONES

Se reconoci los tipos de bioensayo y bioindicadores

Se observ que a pesar que el agua que se escogi para el estudio aunque no es apta para el consumo humano puede que haya gran presencia de micronutrientes por lo que se produce una gran germinacin mucho mejor que en el control negativo

Se observ la fitotoxicidad existente en el control positivo por la presencia de la sal.

BIBLIOGRAFIA

Camelo, E. (2011). Mdulo de toxicologa ambiental. Bogot. Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente ECAPMA, Universidad Nacional Abierta y a Distancia.

Ramrez, P. y Mendoza, A. (Compiladoras). (2008). Ensayo de toxicidad aguda con semillas de lechuga Lactuca sativa L. Ensayos toxicolgicos para la evaluacin de sustancias qumicas en agua y suelo La experiencia en Mxico. 17 57. Instituto Nacional de Ecologa. Mxico.

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ANEXO

TOMA DE LA MUESTRA

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