UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BAJA CALIFORNIA SUR
ÁREA DE CONOCIMIENTO EN CIENCIAS DEL MAR
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE BIOLOGÍA MARINA
TESIS
CARACTERIZACIÓN DEL CICLO DIARIO DE OOCITOS EN LA SARDINA
MONTERREY (SARDINOPS SAGAX) EN BAHÍA MAGDALENA B.C.S.,
MÉXICO.
QUE COMO REQUISITO PARA OBTENER EL TÍTULO DE:
BIÓLOGO MARINO
PRESENTA:
CE ACATL ARCE PEINADO
DIRECTOR(A):
DR. ROSA ISABEL OCHOA BÁEZ
LA PAZ, BAJA CALIFORNIA SUR, MÉXICO. JUNIO, 2012
DEDICATORIA
A mi mamá Ana Isabel Peinado Nieto por estar conmigo en todo momento,
gracias por todo tu amor y apoyo incondicional. Siempre he contado con tu apoyo,
este trabajo es fruto de todos los sacrificios a lo largo de muchos años. Por
preocuparse incluso más que yo por que terminara este trabajo.
Al pedacito que me dio la motivación e inspiración para terminar y que nos
cuida desde un mejor lugar.
AGRADECIMIENTOS
A mí directora de tesis: Dra. Rosa Isabel Ochoa Báez por aclarar las dudas
que fueron surgiendo durante la elaboración de este trabajo con su asesoramiento
científico y estimulo para seguir creciendo intelectualmente.
A las empresas del sistema producto Pelágicos Menores de B.C.S A.C.;
Sardinera Bahía Magdalena S.A. de C.V., Productos Pesqueros De Matancitas
S.A de C.V., Pesquera México, S.A de C.V., Naviera y Pesquera del Pacífico S.A.
de C.V., Pesquera Casreal S. de R.L. de C.V., Del Mar Industrial S. A. de C. V., y
Conservera San Carlos S.A de C.V. por la facilitación en la obtención de muestras
y al Centro Interdisciplinario de Ciencias del Mar (CICIMAR-IPN), por el
procesamiento de las muestras que se realizó a través de los proyectos que se
desarrollaron durante estos años en el Laboratorio de Morfofisiología y que
estuvieron a cargo del Dr. Julián René Torres Villegas y la Dra. Rosa Isabel Ochoa
Báez:
• “Sistema de seguimiento de las existencias de biomasa desovante de la
sardina monterrey (Sardinops sagax) en la costa occidental de Baja California,
empleando el método de producción diaria de huevos” Registro SIP: 20070991
• “Estatus reproductivo de las poblaciones de sardina monterrey (Sardinops
sagax) en la pesquería de sardina de Bahía Magdalena, B.C.S.” Registro
asignado por la SIP: 20082524.
Quiero agradecer a todas las personas que me brindaron su apoyo moral.
Gracias a toda mi familia y amigos que insistieron constantemente preguntando
¿Para cuándo terminas la tesis? ¿Cuánto te falta?
Gracias……. ¡Totales!
Ce Acatl Arce Peinado Índice
I
ÍNDICE
Lista de figuras II
Lista de tablas IV
Glosario V
Resumen IX
Introducción 1
Antecedentes 8
Justificación 13
Objetivos 15
Hipótesis 16
Área de estudio 17
Material y métodos 19
Resultados 26
Discusión 53
Conclusiones 66
Recomendaciones 67
Bibliografía 68
Ce Acatl Arce Peinado Lista de figuras
II
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Mapa de la ubicación geográfica de Bahía Magdalena, B.C.S. 18 Figura 2. Microfotografía de oocitos en estadio I (inmadurez). 27 Fi gura 3. Microfotografía de oocitos con alvéolos corticales. 28 Figura 4. Microfotografía de oocitos en estadio II (madures intermedia). 29 Figura 5. Microfotografía de oocitos en vitelogénesis inicial. 30 Figura 6. Microfotografía de oocito en estadio III (madurez avanzada). 31 Figura 7. Microfotografía de oocito con células columnares en la capa
granuolsa 32
Figura 8. Microfotografía de detalle de oocitos con núcleo migratorio. 33 Figura 9. Microfotografía de oocito en hidratación final. 34 Figura 10. Microfotografía de oocitos en estadio IV (desove). 36 Figura 11. Microfotografía de comparación de oocito en vitelogénesis final y
atresia alfa. 37
Figura 12. Microfotografía de oocitos en estadio V (reabsorción). 38 Figura 13. Relación de la talla de la hembra con el estadio ovárico. 41 Figura 14. Variaciones del IGS, la media, DS, valores máximo y mínimo, en
el ciclo diario de S. sagax. 42
Figura 15. Frecuencia de indicadores de crecimiento de los oocitos en el
estadio ovárico de inmadurez. 45
Ce Acatl Arce Peinado Lista de figuras
III
Figura 16. Frecuencia de indicadores de crecimiento de los oocitos en el estadio ovárico de vitelogénesis inicial.
47
Figura 17. Frecuencia de indicadores de crecimiento de los oocitos en el
estadio ovárico de vitelogénesis avanzada. 47
Figura 18. Frecuencia de folículos postovulatorios. 48 Figura 19. Frecuencia de estadios de reabsorción (atresia) de los oocitos de
S. sagax. 49
Figura 20. Desarrollo del oocito desde la etapa inicial hasta la
reorganización. 50
Ce Acatl Arce Peinado Lista de tablas
IV
LISTA DE TABLAS
Tabla I. Frecuencia de pescas por hora (GMT). 21 Tabla II. Descripción histológica de los diferentes estadios ováricos (EO)
de S. sagax.
23 Tabla III. Descripción general de los lances que se utilizaron en el
estudio.
40 Tabla IV. Comparaciones múltiples por pares para los valores del IGS en
el transcurso del ciclo diario. 43
Tabla V. Comparaciones múltiples por pares para los valores del IGS en
el transcurso del ciclo diario para cada estadio
44 Tabla VI. Comparaciones múltiples por pares para los valores del IGS en
los diferentes estadios ováricos
44 Tabla VII. Frecuencia de los estadios de crecimiento de los oocitos de S.
sagax durante el ciclo de 24 horas.
46 Tabla VIII. Frecuencia de hembras desovantes por noche de S. sagax en el
pico reproductivo (febrero-marzo) en Bahía Magdalena, B.C.S.
51 Tabla IX. Comparación de la frecuencia de puesta de S. sagax con otros
peces Clupeiformes.
52
Ce Acatl Arce Peinado Glosario
V
GLOSARIO
Acidófilo: Afinidad de los compuestos de un tejido para captar colorantes ácidos.
En la tinción Hematoxilina-Eosina son afines a la eosina, por lo que también se les
conoce como eosinófilos. Adquieren una coloración de rosa a rojo (Ham, 1975).
Alvéolo cortical: Primeras estructuras que se distinguen en el citoplasma del
oocito, que aparecen en la fase de crecimiento inicial. Estas estructuras contienen
glicoproteínas y enzimas que promueven el endurecimiento en la membrana
vitelina para evitar la poliespermia al momento de la fertilización (Tyler y Sumpter,
1996).
Atresia: Proceso paulatino de reabsorción del oocito que se lleva a cabo por los
elementos especializados del tejido conjuntivo en el ovario (Perezgomez, 2008).
Biomasa Desovante: Fracción de la población que participa en el desove (Parker,
1980).
Basófilo: Afinidad de los compuestos de un tejido para captar colorantes básicos.
En la tinción Hematoxilina-Eosina son afines a la hematoxilina y adquieren una
coloración azul o purpura (Ham, 1975).
Desovador asincrónico: Organismo en el cual los huevos son reclutados de una
población heterogénea de oocitos en desarrollo y son desovados
subsecuentemente durante cada temporada de desove (Tyler y Sumpter, 1996).
Ce Acatl Arce Peinado Glosario
VI
Fecundidad: Número total de oocitos que potencialmente pueden ser producidos
por una hembra. Es una estimación del potencial reproductivo de una hembra
(Crim y Glebe, 1990).
Folículo: Tejido somático que rodea al oocito, compuesto principalmente por
células de la granulosa y de la teca (Tyler y Sumpter, 1996).
Folículo postovulatorio: Cicatriz de la ovulación constituida por las capas
epiteliales colapsadas que formaron el folículo, la granulosa y la teca externa. El
tiempo transcurrido entre la puesta y el muestreo se estima por la reabsorción de
estas estructuras (Hunter et al., 1985).
Frecuencia de puesta: Medida relativa del grupo de hembras que participan en la
puesta por desove parcial. Estas hembras se identifican por la presencia en sus
ovarios de folículos postovulatorios (Hunter y Goldberg, 1980).
Gónada: órgano sexual primario en el cual se producen las células germinales
(Webster y Webster, 1974).
Granulosa, células de la: Células de origen mesenquimal o epitelial, con posible
función esteroidogénica (Nagahama, 1983).
Inclusiones lipídicas: Cuerpos de lípidos que a menudo aparecen en los oocitos
durante el estadio de alvéolo cortical y continúa su producción y acumulación
durante todo el crecimiento del oocito (Tyler y Sumpter, 1996).
Iterópara: Estrategia reproductiva en donde se agrupa a las especies que se
reproducen repetidamente durante su ciclo de vida (Munro, 1990).
Ce Acatl Arce Peinado Glosario
VII
Núcleo migratorio: Etapa del estadio de madurez final del oocito caracterizada
por la posición descentrada del núcleo del oocito, lo cual indica la traslación de
esta estructura hacia el polo animal. A lo largo de este camino el núcleo pierde la
membrana nuclear, con lo que se le conoce como vesícula germinal (Tyler y
Sumpter, 1996).
Oocitos hidratados: Última etapa de la madurez final del oocito caracterizada por
un rápido incremento en el diámetro del oocito (0.95 a 1.2 mm), la disolución de
los glóbulos de vitelo los cuales enmascaran prácticamente todas las estructuras
celulares y el estiramiento de las capas epiteliales que constituyen el folículo
(Wallace y Selman, 1981).
Ooplasma: Matriz citoplasmática en la cual se encuentran todas las inclusiones
que se desarrollan durante el proceso de maduración del oocito (Balinski, 1978).
Oogenésis: Proliferación de células germinales femeninas a partir de la división
mitótica de las oogonias (Nagahama, 1983).
Perinucleolar: Etapa del estadio de crecimiento del oocito caracterizado por ser
células pequeñas con afinidad tintorial basófila intensa en el citoplasma y de
menor intensidad en el núcleo. En la etapa inicial se observan nucléolos esféricos
en el núcleo; al avanzar el desarrollo los nucléolos disminuyen su tamaño y se
disponen cerca de la membrana nuclear (Wallace y Selman, 1981).
Previtelogénicos: Oocitos con esferas en la periferia del ooplasma en donde se
inicia la acumulación de vitelo, dando inicio el proceso de crecimiento del oocito, a
Ce Acatl Arce Peinado Glosario
VIII
través de la secuenciación de vitelogenina proveniente de un precursor hepático
(Wallace y Selman, 1981).
Proteólisis: Etapa del estadio de madurez final del oocito caracterizado por la lisis
de los glóbulos de vitelo proteico, paso previo a la hidratación (Wallace y Selman,
1981).
Vitelogénesis: Periodo en el desarrollo del ovario, en el que las proteínas
extraováricas son aisladas, procesadas y empacadas dentro de los oocitos en
forma de esferas o glóbulos. Principal evento, responsable del crecimiento de los
oocitos en muchos teleósteos (Tyler y Sumpter, 1996).
Zona radiata: Membrana del oocito de apariencia estriada, compuesta de una
capa interna y externa, y que se forma cuando las primeras inclusiones lipídicas
aparecen en el citoplasma (Matsuyama et al., 1991).
Ce Acatl Arce Peinado Resumen
IX
CARACTERIZACIÓN DEL CICLO DIARIO DE PRODUCCIÓN DE OOCITOS EN LA SARDINA MONTERREY (SARDINOPS SAGAX) EN BAHÍA MAGDALENA
B.C.S., MÉXICO.
RESUMEN Especies como Sardinops sagax son explotadas y tienen planes de manejo establecidos. Para el manejo sustentable es necesario seguir el ciclo reproductivo y los cambios en el ambiente durante la temporada de reproducción. El patrón reproductivo puede tener grandes variaciones, incluso para una misma especie distribuida en distintas latitudes como en el caso de la sardina. Por lo cual es necesario observar los eventos celulares en el folículo ovárico y en el oocito durante el ciclo diario de producción ovárica. Para este estudio se realizó un muestreo biológico de sardinas hembras en flota sardinera de Bahía Magdalena, B.C.S. Se hizo el análisis histológico y citológico en los folículos y oocitos de 890 hembras; determinándose la frecuencia de hembras activas con relación a la hora del día. Por indicadores microscópicos se determinó el estadio de crecimiento de los oocitos, clasificándose en cinco clases de maduración con características diferenciales. El estadio de inmadurez se presento durante todas las horas del ciclo diario, caracterizándose por la presencia de oocitos en crecimiento primario, perinucleolares y algunos alvéolos corticales. La maduración intermedia por oocitos en crecimiento secundario, alvéolos corticales, inclusiones lipídicas y escasos gránulos de vitelo, tuvo un pico de abundancia en la mañana. La madurez avanzada presentó abundantes gránulos de vitelo, proteólisis de gránulos y vitelo liquido en el oocito, con dos picos, uno en la mañana y otro por la noche. El estadio de puesta o desove muestra células foliculares residuales, núcleos picnóticos en cariólisis y vacuolas, con un pico en la noche. El estadio de reabsorción se caracterizó por presentar signos de muerte celular donde los folículos se encontraron retraídos y la forma celular está francamente modificada; este estadio es un proceso constante en la producción de oocitos con un pico antes de que el desove de inicio. Palabras clave: Sardinops sagax, ciclo diario, estadio ovárico, oocito.
Ce Acatl Arce Peinado Introducción
1
INTRODUCCIÓN
La reproducción es un proceso biológico sumamente complejo en todas las
especies, sin embargo en los peces teleósteos el proceso reproductivo ha sido
estudiado para algunas especies, ya que de las aproximadamente 20 mil especies
de peces descritas, los estudios se han centrado sólo en algunas especies, la
mayoría de las cuales representan un interés económico (Zanuy y Carrillo, 1991).
Estos estudios han demostrado la existencia de una gran variabilidad en
cuanto a los mecanismos reproductivos en los peces; algunos maduran sus
gametos de forma asincrónica o sincrónica, con desoves totales o parciales a lo
largo de la temporada reproductiva en ciclos anuales o estacionales, e incluso
especies que desovan una sola vez durante su ciclo de vida (Ocampo, 2002).
Las sardinas son peces pelágicos que habitan aguas costeras templadas y
subtropicales, pertenecen a dos géneros monotípicos relacionados, Sardina y
Sardinops. Sardina sp. existe como un grupo de poblaciones en el Atlántico
oriental y el Mediterráneo, y Sardinops sp. abarca cinco poblaciones regionales
aisladas geográficamente: (1) Sudáfrica-Namibia, (2) Australia-Nueva Zelanda, (3)
Chile-Perú, (4) Japón-Rusia y (5) México-EUA-Canadá (Grant y Leslie, 1996).
Dos de las características más significativas de las sardinas son su extensa
distribución anti-tropical y su asociación a los sistemas de corrientes de mayor
productividad de los océanos. Cuando su tamaño poblacional es alto, dominan por
completo la zona nerítica de dichos sistemas de corriente (Parrish et al., 1989).
Ce Acatl Arce Peinado Introducción
2
En el sistema de la Corriente de California, la sardina monterrey, sostuvo la
pesquería más grande de Norteamérica durante 1930 hasta 1945. Esta pesquería
se inició en la parte central de California a finales de 1800 y se desarrollo en
respuesta a la demanda de alimento durante la primera guerra mundial,
alcanzando una captura máxima de 790,000 t en la temporada de 1936-37 y un
promedio de 600,000 t por temporada. La pesquería empezó a colapsarse a
finales de los años 40’s y posteriormente las capturas disminuyeron hasta menos
de 100 t por año en la década de los 70’s (Wolf, 1992).
La pesca de la sardina en aguas mexicanas inició en 1929 frente a las
costas de Ensenada, con capturas de 2,600 t anuales. El colapso de la pesquería
en California a partir de la década de 1950, incluyó también la región de
Ensenada, y determinó el desplazamiento hacia el Sur de la pesquería mexicana
hacia nuevas áreas como Isla Cedros y posteriormente hasta Bahía Magdalena
(Felix-Uraga, 1986).
La Sardina Monterrey (Sardinops sagax, Jenyns, 1842), es un clupeido de
amplia distribución en la costa oriental del Océano Pacífico, desde el Sur de
Alaska hasta Cabo San Lucas, B.C.S., México y Golfo de California (Hernández,
2003). Esta especie se caracteriza por formar grandes cardúmenes y migraciones
al momento del desove; así como también para su alimentación (Sokolov y Wong,
1974; Quiñónez-Velazquez et al., 2002); esta se basa principalmente de
zooplancton (casi 50%) y fitoplancton (diatomeas 12%) (Fischer et al., 1995). De
acuerdo con la densidad y tamaño de las presas, su alimentación puede ser por
Ce Acatl Arce Peinado Introducción
3
filtración o devorando a las presas enteras. La reproducción de S. sagax se ha
registrado desde las aguas de la región de Vancouver en Canadá, hasta el área
de Bahía Magdalena en B.C.S. y en el interior del Golfo de California (López-
Martínez, 1991).
En México la sardina es una de las pesquerías más importantes en
volumen, alcanzando hasta 199,873 t para consumo humano directo y 557,208 t
para consumo humano indirecto (CONAPESCA, 2010).
El estudio de la biología reproductiva de las especies es uno de los
aspectos de mayor importancia para profundizar en el conocimiento de la dinámica
poblacional, sobre todo de aquellas especies que sostienen importantes
pesquerías, como la de la sardina monterrey. El esfuerzo reproductivo es una
variable de gran importancia debido a la dependencia demostrada del
reclutamiento (el volumen de biomasa integrante del stock, susceptible a las artes
de pesca) y el stock desovante, sobre todo en poblaciones que presentan
importantes fluctuaciones en su abundancia. En este sentido el seguimiento de
parámetros como la fecundidad, temporalidad del desove, frecuencia de puesta, la
edad o la talla de primera madurez, son variables empleadas en los modelos de
evaluación directa de la población desovante (Perezgómez, 2008).
Para medir la condición reproductiva en organismos marinos se utilizan
diferentes métodos como: la observación morfocromática directa de las gónadas,
el análisis histológico de los ovarios, la medición del diámetro del oocito en el caso
Ce Acatl Arce Peinado Introducción
4
de las hembras y la determinación de la fecundidad, entre otros. Los más
utilizados son los índices gonádicos, empleados en varios grupos de animales ya
sean vertebrados o invertebrados (Giese y Pearse, 1974; Crim y Glebe, 1990). Los
índices gonádicos se calculan por diferentes vías, usualmente se utiliza la
proporción del peso de la gónada (o volumen) con el peso total (o volumen) del
organismo, expresado como porcentaje (Chavira, 2005).
El método preciso para conocer la condición estructural microscópica de la
gónada es el análisis histológico, el cual proporciona información directa sobre el
estado de maduración tanto de los ovarios como de los testículos. En el caso de
las hembras, se evidencian a nivel del estroma ovárico y celular otras estructuras
como los folículos postovulatorios y los folículos atrésicos. Los primeros son
indicadores inequívocos del desove, y lo segundo demuestra una etapa de
reabsorción de sus gametos (Chavira, 2005); con estos análisis se obtienen
resultados precisos en los estudios de ciclos reproductivos y maduración ovárica y
la puesta (Ochoa-Báez, 1998).
La sardina presenta un estilo de reproducción asincrónico con desoves
parciales y mezcla de clases anuales. En un mismo período se observan en la
población, tanto ejemplares reproduciéndose como otros en inactividad
reproductiva y por lo general predomina un estado de madurez determinado
(Martínez et al., 1990). En este caso la época reproductiva ha sido descrita por
Torres-Villegas et al. (1995), quienes mencionan la existencia de dos picos
reproductivos, uno que es entre diciembre y abril y el segundo entre junio y julio.
Ce Acatl Arce Peinado Introducción
5
En diciembre-abril la frecuencia de hembras activas está entre 90 y 100%,
mientras que, en el segundo pico la intensidad disminuye a un rango de entre 15 y
50%. Este dato no significa que durante la época reproductiva, se detenga la
producción de nuevos oocitos, se ha documentado para la temporada reproductiva
de la sardina, y de otras especies de peces, que el epitelio germinativo continua
activo, lo cual indica una producción de nuevas células sexuales (Grier, 2000).
Este tipo de reproducción se lleva a cabo con un ciclo anual que abarca toda la
temporada y otro ciclo de periodicidad diaria, que marca la maduración de grupos
sucesivos de oocitos en periodo de reproducción. En el primero se suceden los
eventos de una temporada de puesta a la siguiente, desde el reclutamiento
reproductivo, la maduración, el desove, la reabsorción, o inactividad hasta la
siguiente temporada de puesta. El ciclo diario de producción de oocitos durante la
temporada de reproducción, tiene una duración de unos días, de tal manera que
los oocitos se diferencian, crecen, maduran y se desovan en tiempos muy cortos.
Este proceso continuo se conoce como reorganización del ovario y asegura la
puesta a lo largo de la temporada reproductiva (Torres-Villegas, 1997;
Perezgómez-Alvarez, 2004).
En la búsqueda de elementos para estimar el tamaño de la población de
adultos reproductores, Saville (1964) planteó la posibilidad de estimar el tamaño
de la población desovante a partir de la proporción entre las tasas instantáneas de
producción de huevos; estimada en el área de reproducción. Y la producción
Ce Acatl Arce Peinado Introducción
6
potencial de huevos de una hembra a partir de medidas de las tasas de
producción de huevos,
Actualmente la fracción de la población de hembras en puesta se estima a
partir de la presencia de los folículos postovulatorios (POF’s). En distintas
especies se han empleado los criterios morfológicos para estimar la frecuencia de
puesta. Hunter y Goldberg (1980) lo describieron para la anchoveta norteña (E.
mordax) en condiciones de cultivo; Hunter y Macewicz (1980) utilizaron los
criterios anteriores y lo aplicaron en poblaciones naturales. Estudios de este tipo
realizados por Alarcón et al. (1984) describieron las fases de reabsorción de los
POF´s en la sardina de Perú a partir de muestreos de las poblaciones silvestres.
Torres-Villegas (1986) siguió la reabsorción de las fases postovulatorias en
condiciones naturales en S. caeruleus en la costa occidental de Baja California
Sur. Motos (1996) realizó observaciones en E. encrasicolus en el Cantábrico,
conservando cardúmenes en tanques de carnada viva en barcos atuneros.
La mayoría de estos trabajos hacen referencia únicamente a las fases
postovulatorias, evidentemente orientados a la evaluación de la biomasa
desovante, de manera que las fases preovulatorias no se mencionan en las
descripciones. Con ello se pierde una parte importante de la información sobre las
etapas del crecimiento del oocito, y su relación con las fases postovulatorias.
La importancia de la caracterización del ciclo diario de producción de
oocitos es la futura aplicación de la clasificación histológica que se describirá
Ce Acatl Arce Peinado Introducción
7
como parte de los resultados, en estudios de procesos reproductivos en
poblaciones de peces con desoves múltiples. Los datos obtenidos en éste estudio
darán información detallada del ciclo reproductivo de la sardina, en futuros análisis
será sencillo buscar hembras en determinado estadio ovárico ya que por medio de
las frecuencias de abundancia de estos en los diferentes horarios lo facilitará. De
esta forma el estado reproductivo y su duración aproximada pueden ser
relacionados con el estado fisiológico de la hembra (edad, talla, contenido de
grasas, composición bioquímica, edad y crecimiento basándose en los otolitos o
proporción de ARN/ADN y condiciones ambientales), así como también los
factores que controlan las variaciones de fecundidad, frecuencias de desove,
duración de la temporada de desove y lo más importante la regulación energética
entre reproducción y crecimiento (Hunter y Macewicz, 1985).
Ce Acatl Arce Peinado Antecedentes
8
ANTECEDENTES
Varios estudios sobre el crecimiento de las células sexuales se han
centrado principalmente en la oogénesis de especies de importancia comercial,
específicamente en salmónidos, ciprínidos y cíclidos (Billard, 1992; Coward y
Bromage, 1998), identificándose las principales estructuras que conforman y
rodean al oocito, y su participación en el crecimiento del mismo.
Wallace y Selman (1981) establecieron una escala que permite comparar el
desarrollo de los oocitos en diferentes especies, hicieron una revisión en la cual
tratan de establecer criterios comunes al proceso de desarrollo del oocito en los
teleósteos. Reconocieron diferentes estadios de crecimiento, con base en los
cambios morfológicos y composición bioquímica del oocito durante su desarrollo.
En la fase de crecimiento primario se reconocen el estadio de cromatina núcleolar,
en el cual el oocito tiene un citoplasma escaso y un núcleo central con un único
nucléolo, y el oocito ya se encuentra rodeado por las células foliculares. El estadio
denominado perinúcleolar, se caracteriza por el crecimiento del núcleo y la
aparición de múltiples nucléolos, los cuales pueden variar en morfología entre
especies, pero que son omnipresentes en todas las especies. La segunda fase de
crecimiento la denominaron de alvéolo cortical o de formación de vesículas
erróneamente asociadas con el vitelo; si bien, estas vesículas son precursoras de
los alvéolos corticales.
Ce Acatl Arce Peinado Antecedentes
9
Los alvéolos corticales, aunque se consideran análogos a los gránulos
corticales de los oocitos de otras especies de invertebrados y vertebrados, son
estructuras precursoras que promueven el endurecimiento en la membrana vitelina
y evitan la poliespermia al momento de la fertilización (Tyler y Sumpter, 1996)
La tercera fase de crecimiento corresponde a la vitelogénesis, donde se
formarán las reservas de vitelo proteico en el oocito por acumulación de las
vitelogeninas producidas por el hígado, en respuesta a la producción de
estrógenos. La última fase del crecimiento del oocito se debe a la hidratación, que
es, una rápida acumulación de líquidos en el interior del oocito (Wallace y
Selman, 1981).
Tyler y Sumpter (1996) retoman estos trabajos y modifican el esquema
establecido de la descripción del crecimiento del oocito. Consideran que los
eventos más notables pueden ser clasificados en seis fases o periodos:
oogénesis, crecimiento primario, estadio de alvéolo cortical, vitelogénesis,
maduración y ovulación. También hacen una descripción más detallada de los
cambios sucedidos durante el crecimiento del oocito y mencionan que los alvéolos
corticales, presentes desde el crecimiento secundario, son las primeras
estructuras citoplasmáticas observables con el microscopio compuesto, a
diferencia de las vesículas de vitelo. Los alvéolos corticales están compuestos por
polisialoglicoproteinas, mientras que las vesículas de vitelo están formadas por
fosfoglicolipoproteinas (Greeley et al., 1986). Incluyen dentro de la segunda fase
de crecimiento a las inclusiones lipídicas, que son consideradas como otro
Ce Acatl Arce Peinado Antecedentes
10
indicador del desarrollo del oocito. Finalmente, consideran a la vitelogénesis como
el principal evento del crecimiento del oocito, debido a la acumulación de reservas.
Mencionan que en los peces marinos que liberan huevos pelágicos, la
vitelogénesis produce un incremento en el tamaño del oocito, aunque es
notablemente mayor el incremento del folículo por la hidratación.
En cuanto a la actividad reproductiva de los peces, se han desarrollado
diversas técnicas que evalúan la madurez gonádica. En este sentido, también se
observaron algunas dificultades al establecer escalas que de alguna forma
trataran de describir el grado de madurez de las gónadas. Estas escalas, no
podían ser aplicadas a otras especies de manera directa, debido a la ambigüedad
que implica el uso de una escala numérica y la apreciación relativa que cada
persona podría dar a sus observaciones. Nikolsky en 1963 propuso una escala de
6 estadios de madurez los cuales son definidos por el aspecto morfocromático de
las gónadas. Rodríguez-Gutiérrez (1992) cita también las escalas empíricas de
otros autores que de igual manera se basan en la forma y color de la gónada, y
que varían entre 7 y 8 estadios de madurez, y aunque en algunos casos coinciden,
son solo apreciaciones hechas a simple vista, por lo que son imprecisas.
Los índices gonádicos son métodos que estiman la madurez gonádica en
los peces. El más utilizado de estos métodos es el índice gonadosomático o IGS,
en el cual se establece una relación entre el peso de la gónada respecto al peso
total del cuerpo del pez. Aunque ha sido sumamente empleado en la valoración de
la madurez de las hembras, el uso de éste método ha sido ampliamente discutido
Ce Acatl Arce Peinado Antecedentes
11
por diferentes autores (de Vlaming et a.l; 1982, Erickson et al., 1985, Crim y
Glebe, 1990). En las especies existe una relación directa entre el peso del pez y el
crecimiento de las gónadas, en estas últimas generalmente es alométrico. Desde
hace varias décadas se ha empleado un índice de peso de órganos para estimar
el avance en el crecimiento o volumen de algún órgano discreto como el hígado y
las gónadas, con respecto al tamaño o al peso total del individuo (González y
Oyarzún, 2002). El índice gonadosomático es ampliamente utilizado para las
gónadas de los peces (Anderson y Gutreuter, 1983; Crim y Glebe, 1990).
Numerosos estudios han aplicado el IGS para el seguimiento de los ciclos
estacionales (Delahunty y de Vlaming, 1980; Melo, 1994). Relaciones entre el
peso de la gónada, el tamaño de los huevos y la edad se aplicó a Ciprinus carpio
(Hulata et al., 1974). El seguimiento del ciclo reproductivo en el tiempo fue
registrado mediante la evolución mensual del IGS en la anchoa europea (Giraldez
y Abad, 1995). El método histológico es uno de los más precisos para estimar la
maduración gonádica en los peces, puesto que permite observar a escala
microscópica los cambios morfológicos definiéndose así cada uno de los estadios
de desarrollo ovárico y de los indicadores celulares en la estructura del folículo y el
propio oocito en maduración. Una desventaja del método histológico radica en el
costo y el tiempo necesario para el procesamiento de una cantidad numerosa de
muestras. No obstante, es el más utilizado para estudios de fecundidad y es parte
fundamental de las técnicas estereométricas aplicadas a la maduración gonádica
en peces (Goodall et al., 1987; Emerson et al., 1990; Christiansen et al., 1973).
Ce Acatl Arce Peinado Antecedentes
12
Comúnmente las estimaciones de frecuencia de desove diario de los peces
desovantes parciales se hacen en base a la cantidad de hembras con folículos
postovulatorios presentes en el estroma ovárico, en el día 1, después de la
ovulación. Existen métodos alternativos basados en observaciones microscópicas
de las gónadas, los cuales suponen que el IGS es un buen estimador de la
frecuencia de desove de Sardinops sagax, Engraulis ringens y Strangomera
bentinck (Claramunt y Herrera, 1994; Claramunt y Roa, 2001; y Claramunt et al.,
2003).
Los criterios para estimar la fracción de hembras desovantes por noche
fueron establecidos por Hunter y Goldberg (1980) a partir de los POF’s, para E.
mordax, en cultivo. Hunter y Macewicz (1980) usaron los criterios anteriores y
obtuvieron la primera estimación de la frecuencia de hembras desovantes en una
población en el medio natural. Con los criterios morfológicos establecidos en estos
dos trabajos, es posible hacer un seguimiento de la reabsorción de los POF’s, e
identificar con certidumbre el tiempo transcurrido entre el desove y algún estadio
de absorción de los POF’s.
Chavira (2005) estableció una escala de IGS para la sardina monterrey con
ejemplares procedentes de Bahía Magdalena. Mostró que entre valores de 3 y 5
las hembras se encontraban en plena madurez gonádica, sin embargo dentro de
este intervalo suelen estar presentes hembras con atresia folicular. Torres-Villegas
(1997) menciona un rango de IGS entre 4 y 13. En ambos casos las escalas de
IGS fueron validadas mediante análisis histológico de los ovarios.
Ce Acatl Arce Peinado Justificación
13
JUSTIFICACIÓN
La pesquería de sardina es una de las actividades económicas más
relevantes del Estado de Baja California Sur. A pesar de lo anterior, especies
como Sardinops sagax, no cuentan con un plan de manejo establecido
formalmente, solo se toman en cuenta aspectos como por ejemplo, tamaño
mínimo de captura y las temporadas en que se suspende la pesca.
Para sustentar los planes de manejo pesquero, es necesario considerar
cómo responde el ciclo reproductivo a los cambios en el ambiente en la temporada
de reproducción. Al mismo tiempo, para la regulación y control de las pesquerías
es importante conocer los parámetros de la actividad reproductiva de los peces
(Hunter et al., 1992), entre ellos los más relevantes, como frecuencia de puesta y
fecundidad, relacionados directamente con el ciclo ovárico.
La estimación de la frecuencia de puesta y fecundidad son necesarias para
la aplicación de los modelos de producción diaria de huevos, y fundamentales
para evaluar la biomasa desovante de una especie. El potencial reproductivo de
una población, estimado a partir de estos parámetros y de la estructura de la
fracción desovante, es una variable crítica que puede explicar en parte los
cambios observados en el reclutamiento de una especie (Macchi et al., 2006).
El patrón reproductivo de las sardinas puede tener grandes variaciones,
incluso para la misma especie distribuida en distintas latitudes como en el caso de
la sardina monterrey. Por ello, se considera indispensable evaluar las
Ce Acatl Arce Peinado Justificación
14
características histológicas de las distintas fases del ciclo diario de producción de
oocitos (West, 1990). Así, las determinaciones de la frecuencia de puesta pueden
realizarse con criterios normalizados basados en las características biológicas
propias de cada especie. El conocimiento científico obtenido en este estudio
contribuye con información valiosa para la Biología Pesquera de esta especie en
Bahía Magdalena, B.C.S.
Ce Acatl Arce Peinado Objetivos
15
OBJETIVOS
Objetivo especifico.
- Describir las modificaciones tisulares y celulares en el folículo ovárico y el oocito,
durante el ciclo diario de producción ovárica, en el máximo de la temporada
reproductiva de la sardina monterrey (Sardinops sagax).
Objetivos particulares.
- Obtener las frecuencias de estadios del crecimiento de las cohortes de oocitos
en la temporada de desove, con énfasis en cada hora durante el ciclo de 24 horas.
- Estimar el porcentaje de hembras desovantes por noche de la sardina monterrey
Sardinops sagax.
- Analizar la participación de los individuos de acuerdo a su clase de tallas en la
producción diaria de oocitos de la sardina.
- Inferir la duración de las etapas de la maduración del oocito a partir de sus
frecuencias relativas en el ciclo circadiano de desove.
- Determinar la periodicidad del desove según la frecuencia de hembras con
oocitos hidratados y de hembras con folículos postovulatorios tempranos.
Ce Acatl Arce Peinado Hipótesis
16
HIPÓTESIS
La dinámica de desove en el ciclo diario de puesta y la producción de
oocitos por día, en la temporada de reproducción de S. sagax, son
cualitativamente similares a los descritos para otras especies de peces
Clupeiformes desovantes parciales iteróparos como, la anchoveta norteña y la
anchoa europea.
Ce Acatl Arce Peinado Área de estudios
17
ÁREA DE ESTUDIO
Bahía Magdalena es un cuerpo lagunar costero que se encuentra en la
costa Occidental del estado de Baja California Sur (Fig. 1), entre los 24º 15’ y 25º
20’ Latitud Norte y los 111º 30’ y 112º 12’ Longitud Oeste (Álvarez et al., 1975).
Esta región es posible dividirla en tres zonas bien diferenciadas:
Canales: Localizada al noroeste del sistema lagunar, comprende parte del
Canal de Santo Domingo, desde la Boca de la Soledad en su extremo
Norte, hasta Punta Edie, al Sur. Está integrada principalmente por esteros y
canales con una profundidad promedio de 3.5 m. y un área total de 137.12
km2 (Vera, 1993).
Bahía Magdalena: Es la parte central del sistema, comprende lo que es
Bahía Magdalena propiamente, entre Punta Edie al Norte y el Canal de la
Gaviota al Sur; tiene comunicación con el Océano Pacífico mediante un
canal de unos 38 m de profundidad que permite la navegación, y una
superficie de 882.74 km2 (Vera, 1993).
Bahía Almejas: Es la porción del sistema lagunar localizada al Sureste,
entre el Canal de la Gaviota hasta Puerto Chale; también está comunicada
con el océano mediante una boca somera. Esta zona comprende un área
de 369.97 km2 (Vera, 1993).
Ce Acatl Arce Peinado Área de estudios
18
Figura 1.- Área de estudio, Bahía Magdalena, B.C.S., México entre los 24º 15’ y 25º 20’ Latitud Norte y los 111º 30’ y 112º 12’ Longitud Oeste.
-114 -112 -110 -108
24
26
28
Océano Pacífico
México
Golfo de California
-112.5 -112 -111.5
24.5
25
25.5
Comondú
Bahía Magdalena
Isla Margarita
Ce Acatl Arce Peinado Material y métodos
19
MATERIAL Y MÉTODOS
Las sardinas se recolectan a bordo de las embarcaciones de pesca
comercial que operan en Bahía Magdalena. Se obtuvieron al azar de 70-100
individuos por cada lance de pesca, se les realizó un corte ventral en el cuerpo
desde la región anal, hasta la región gular, con el fin de favorecer la entrada del
formol neutralizado en la cavidad abdominal y asegurar la fijación de las gónadas.
Los ejemplares completos se introdujeron en una solución de formaldehido al 10%
con sales de fosfato dentro de una cubeta de 18 litros con tapa hermética. En
estas condiciones fueron trasladadas al laboratorio de Morfofisiología del Centro
Interdisciplinario de Ciencias Marinas del IPN.
En el laboratorio, se obtuvieron los datos morfométricos de cada individuo:
Longitud patrón (mm), con un ictiómetro; peso total (g) y peso de la gónada (g),
registrado con una balanza electrónica (0.01g). Se determino el sexo de manera
preliminar por las características morfológicas externas e internas de las gónadas,
las cuales se extrajeron y se fijaron en formol 10% durante 48 horas.
De cada ovario, se obtuvo una submuestra de aproximadamente 1 cm3 de
la parte media. Las submuestras de cada individuo se procesaron con la técnica
histológica de inclusión en parafina. Cada pieza se colocó con su respectiva clave
de identificación, dentro de bolsitas de tul. Se lavaron con agua corriente por
varios cambios para eliminar el exceso de fijador y se colocaron en alcohol al 70%.
Ce Acatl Arce Peinado Material y métodos
20
Posteriormente se procedió a la deshidratación, la cual se realizó en un
procesador de tejidos automático.
Se realizó la inclusión definitiva en un bloque de parafina de 58°C de P.F.
Las inclusiones fueron cortadas con un micrótomo marca Microm modelo HM
355s, en el que obtuvieron cortes de 5 µm de grosor. Para la coloración de los
cortes se utilizaron de forma indistinta: la técnica de Hematoxilina-eosina y la
técnica Tricrómica de Mallory.
Las muestras fueron ordenadas cronológicamente con respecto a los
horarios de pesca, obteniendo un modelo del desarrollo de los oocitos en un
periodo de 24 horas. El ciclo diario de desove fue estudiado y descrito a partir de
muestras biológicas de adultos obtenidas en el pico reproductivo de los de los
meses enero-marzo durante los años 2004-2008. Para la evaluación del ciclo
diario se elaboró una tabla donde se organizan los horarios de los lances de los
meses de enero, febrero y marzo de los años 2004 a 2008 (Tabla I).
El ciclo reproductivo también fue seguido con el IGS, para lo cual se
utilizaron los datos del peso del organismo y el peso de las gónadas (g).El IGS se
calculó mediante la siguiente fórmula:
100*
−=
gt
g
WWW
IGS
Donde: Wg= peso de la gónada. Wt= peso total del organismo.
Ce Acatl Arce Peinado Material y métodos
21
Tabla I.- Frecuencia de pescas por hora (GMT). D/N indica si las pescas fueron en horarios diurnos (D) y nocturnos (N). Horas desove, indica si el horario se considera dentro del periodo de desove (+) ó si se encuentra fuera de este periodo (-).
Hora D/N Horas desove Total de lances 00:00 a 00:59 N + 2 01:00 a 01:59 N + 1 02:00 a 02:59 N + 3 03:00 a 03:59 N + 2 04:00 a 04:59 N - 0 05:00 a 05:59 N - 2 06:00 a 06:59 D - 2 07:00 a 07:59 D - 2 08:00 a 08:59 D - 0 09:00 a 09:59 D - 1 10:00 a 10:59 D - 2 11:00 a 11:59 D - 3 12:00 a 12:59 D - 1 13:00 a 13:59 D - 2 14:00 a 14:59 D - 0 15:00 a 15:59 D - 0 16:00 a 16:59 D - 0 17:00 a 17:59 D - 0 18:00 a 18:59 D - 2 19:00 a 19:59 D - 2 20:00 a 20:59 D - 0 21:00 a 21:59 N + 0 22:00 a 22:59 N + 1 23:00 a 23:59 N + 2
Para estimar las variaciones del IGS durante el crecimiento de los oocitos,
se estimó el promedio del IGS por hora del ciclo diario, desde el inicio del
crecimiento del oocito, su maduración, desove y las etapas de reabsorción de los
folículos postovulatorios. Este índice fue aplicado en todos los lances de pesca
recolectados, obteniéndose los valores promedio, desviación estándar y se hizo
una comparación entre las diferentes horas para determinar si existen diferencias
Ce Acatl Arce Peinado Material y métodos
22
significativas en las variaciones del IGS; así mismo se hizo para cada estadio
ovárico en el ciclo circadiano.
Con la finalidad de seguir los cambios morfológicos durante el crecimiento y
maduración de los oocitos en la fase preovulatoria se utilizaron como indicadores
la presencia de estructuras intracelulares en el ooplasma y en los folículos, en
cada estadio del crecimiento de los oocitos. Los indicadores fueron: núcleos,
nucléolos, ooplasma, alvéolos corticales, inclusiones lipídicas, vitelo primario,
vitelo intermedio, formación de gotas de aceite, proteólisis y la hidratación del
vitelo; descrito en otras especies de teleósteos (Wallace y Selman, 1981; Hunter y
Macewicz, 1985; Tyler y Stumpter, 1996; Ochoa-Báez, 1998). En el caso de los
folículos ováricos se hizo una caracterización por medio del seguimiento desde la
formación de la capa granulosa y la transformación de células granulosas
columnares (Torres-Villegas, 1997).
Durante el crecimiento del oocito se distinguen cinco etapas progresivas:
estadio de inmadurez, estadio de maduración intermedia, estadio madurez
avanzada, estadio de puesta ó desove y estadio de reabsorción ó atresia (Wallace
y Selman, 1981; Hunter y Macewicz, 1985; Tyler y Stumpter, 1996; Ochoa-Báez,
1998; Torres-Villegas, 1997); las características de cada una de estas etapas o
estadios se describen en la tabla II.
Ce Acatl Arce Peinado Material y métodos
23
Tabla II.- Descripción histológica de los diferentes estadios ováricos (EO) de S. sagax.
Estadio ovárico
Característica diferencial
Descripción histológica
EO-1 Inmadurez Oocitos en crecimiento primario, perinúcleolares y algunos alvéolos corticales
EO-2 Maduración intermedia
Oocitos en crecimiento secundario, presencia de alvéolos corticales, inclusiones lipídicas y escasos gránulos de vitelo
EO-3 Madurez avanzada
Oocitos con abundantes gránulos opacos de vitelo proteico, núcleo migratorio, proteólisis de gránulos, y vitelo licuado totalmente en el oocito hidratado
EO-4 Desove Células foliculares residuales, núcleos picnóticos, en cariolisis, vacuolas, destrucción intracitoplásmica generalizada; no se distingue la separación entre las células foliculares.
EO-5 Atresia Signos de muerte celular. Escasos oocitos presentan un desarrollo normal.
También se consideró dentro del análisis histológico, la atresia folicular,
como un indicador de la suspensión o inhibición del crecimiento y desarrollo
normal de la actividad reproductiva de los organismos; la presencia de atresia en
el ovario de la sardina monterrey también fue registrada y asociada con el resto de
los indicadores morfofisiológicos analizados. De igual manera se registro la
presencia de los folículos postovulatorios como evidencia de haber sucedido el
desove.
Las estimaciones de la frecuencia de puesta se hicieron basados en
modelos estadísticos utilizados por Santander et al. (1984) y Torres-Villegas
(1986), que obtuvieron la proporción del promedio entre las frecuencias de los
Ce Acatl Arce Peinado Material y métodos
24
nm
m yi∑=
aiiii
yi mmmmmm ++++
= 21211
2
folículos postovulatorios de cada día en el ciclo diario. En este caso se hicieron
dos estimaciones, una para el periodo inicial (enero) y otra para el pico
reproductivo (febrero-marzo).
Se trabajó basándose en la siguiente expresión:
∑∑ +
=yi
ii
mmm
S2
)( 21
Donde: S = Fracción promedio de hembras desovantes por día.
im1 = Hembras desovantes con FPO’s del día 1 del muestreo i. im2 = Hembras desovantes con FPO’s del día 2 del muestreo i.
yim = Número corregido de hembras maduras del muestreo i.
El introducir en la formula el número de hembras con FPO’s de día 1 y 2
tiene como finalidad evitar un sobremuestreo de hembras hidratadas, en el caso
de haberse producido. Por otro lado, también es común la ausencia de hembras
con oocitos en estado de hidratación, debido al comportamiento del cardumen.
Por otra parte, para obtener la varianza se utilizó la siguiente fórmula:
( ) ( ) ( )∑ −
−
=2
2
ˆ1
1 SSm
mnn
SV iyi
Donde: n = Número de muestras. m = Número promedio corregido de hembras maduras
iS = Fracción corregida de hembras con folículos postovulatorios del muestreo i.
Ce Acatl Arce Peinado Material y métodos
25
aiiiii
ii
mmmmmmS
++++
=
2121
1
2
ˆ
y aiii
ii
iii
mmmmmmm
S+++
+
+=
∑∑
2121
21
22
)(
Donde: aim = Número de hembras no hidratadas y no desovadas del muestreo i. Es decir,
se utilizan las hembras que se encuentran en los estadios de madurez avanzada (células columnares, proteólisis del vitelo, y núcleo migratorio), las cuales participarán en el próximo desove.
Con esta ecuación se realiza una estimación de la frecuencia de hembras
hidratadas, esto se calcula por la falta de hembras en este estadio al momento de
del muestreo o que su presencia esté sesgada por la formación de cardúmenes de
puesta (Alheith et al., 1984).
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
26
RESULTADOS
Con ayuda de los indicadores microscópicos se identificó el estadio de
crecimiento de los oocitos, clasificándose en cinco clases de maduración ovárica
con características diferenciales Caracterizado el crecimiento del oocito desde el
estadio de inmadurez hasta la reorganización del ovario. A lo largo del proceso se
siguieron de manera colateral los cambios de la estructura microscópica de las
capas envolventes del oocito, la zona pelúcida y la capa granulosa:
Estadio I (Inmadurez).
Ovario compuesto por oogonias y oocitos previtelogénicos distribuidos en
septos o trabéculas. Se puede apreciar la actividad del ooplasma y la proliferación
de nucléolos que preceden a la síntesis del vitelo.
-Oocito perinúcleolar inicial.- Capas foliculares integradas por un reducido número
de células epiteliales planas. El núcleo se encuentra al centro del oocito, los
nucléolos son esféricos y abundantes. La célula presenta un carácter basófilo y
muestra una forma poliédrica (Fig. 2).
-Oocito perinúcleolar final.- Nucléolos menos abundantes y de forma alargada o
plana (Fig. 3).
-Oocito con alveolo cortical.- Las capas foliculares se diferencian claramente, el
núcleo permanece en posición central, nucléolos en la periferia del nucleoplasma.
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
27
Se diferencian pequeñas vesículas llamadas alvéolos corticales en la región
periférica cercana a la membrana plasmática. La forma del oocito sigue siendo
poliédrica y de mayor diámetro (Fig. 3).
Figura 2.- Microfotografía de oocitos en estadio de inmadurez a 400 aumentos. Opi:
oocito perinúcleolar inicial. N: núcleo. nu: nucléolo. gv: gránulos de vitelo. ev: envoltura vitelina. zp: zona pelúcida. cg: células de la granulosa. Técnica Hematoxilina-eosina.
Opi
Opi
nuN
cg
zpgv
ev
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
28
Figura 3.- Microfotografía de oocitos en estadio de inmadurez a 400 aumentos. Opi:
oocito perinúcleolar inicial. Opf: oocito perinúcleolar final. ac: alveolo cortical N: núcleo. nu: nucléolo. ec: eritrocito. cg: células de la granulosa. Técnica Hematoxilina-eosina.
Estadio II (Madurez intermedia).
Este estadio representa el reclutamiento a la vitelogénesis. Es el indicador,
en el tiempo y en los individuos que lo presentan de su ingreso a la actividad
vitelogénica. El análisis histológico indicó que este estadio se caracterizó por
presentar un citoplasma de aspecto vacuolado concéntrico.
-Oocito con inclusiones lipídicas.- el oocito presenta una forma esférica. La zona
pelúcida y las células de la granulosa se observan ligeramente engrosadas. En la
misma zona del ooplasma donde aparecieron los alvéolos corticales aparecen
inclusiones lipídicas como espacios esféricos claros, debido a la pérdida de su
Opf
Opi
ec cg
Nnu
N
ac
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
29
contenido por el alcohol usado en el proceso de deshidratación. Hasta esta etapa
se mantiene muy débil el carácter basófilo del ooplasma (Fig. 4).
Figura 4.- Microfotografía de oocitos con inclusiones lipídicas y alveolos corticales a 100
aumentos. Oil: oocito con inclusiones lipídicas. Opi: oocito perinúcleolar inicial. Oac: oocito con alveolos corticales. Opf: oocito perinúcleolar final. Técnica Hematoxilina-eosina.
-Oocito en vitelogénesis inicial.- Esta etapa se caracteriza por la acumulación de
vitelo en el ooplasma y un incremento del volumen celular. Hay un incremento en
el número de las células que envuelven al oocito. La capa granulosa está formada
por epitelio cúbico simple y se mantienen en un proceso de proliferación. La zona
pelúcida es más desarrollada y se observan algunas estrías en ella. En el
ooplasma se presentan gotas de vitelo acumuladas en la periferia del núcleo hacia
la membrana plasmática. Alrededor del núcleo se mantiene la zona perinuclear
OpiOac
Oil
Opf
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
30
basófila. Este mismo carácter aún puede verse entre las gotas de vitelo cerca de
la membrana plasmática. El resto del ooplasma es acidófilo (Fig. 5).
Figura 5.- Microfotografía de un oocito en vitelogénesis inicial a 400 aumentos. Ovi: oocito
en vitelogénesis inicial. N: núcleo. nu: nucléolo. gv: gránulos de vitelo. il: inclusiones lipídicas. zp: zona pelúcida. cg: células de la granulosa. Técnica Hematoxilina-eosina.
Estadio III (Madurez avanzada).
Este estadio representa la madurez franca del ovario, por la presencia en
abundancia de oocitos en vitelogénesis final. Se caracteriza por una población
abundante de oocitos de mayor diámetro, cuyo citoplasma está ocupado por
vacuolas y gránulos de vitelo, la mayoría de los oocitos contienen alvéolos
corticales y numerosas plaquetas de vitelo denso, y el núcleo ha migrado hacia un
extremo, rodeado por una zona clara formando propiamente el polo animal del
Ovi
gv
il
nu
N
cg
zp
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
31
óvulo (Fig. 6). En esta etapa también se agruparon los ovarios con oocitos
hidratados.
Figura 6.- Microfotografía de oocitos en el estadio de madurez avanzada. A) Ovf: oocito
en vitelogénesis final. Ovi: oocito en vitelogénesis inicial. Oil: oocito con inclusiones lipídicas. Oac: oocito con alveolos corticales. Opf: oocito perinúcleolar final. Opi: oocito perinúcleolar inicial. a 25 aumentos B) Detalle de oocitos en vitelogénesis inicial y final, il: inclusiones lipídicas. zp: zona pelúcida. ev: envoltura vitelina, gv: granulos de vitelo, ec: eritrocitos a 400 aumentos. Técnica Hematoxilina-eosina.
-Folículo con células altas.- Las células columnares en la capa granulosa ya
han alcanzado un gran tamaño y sus núcleos se encuentran, en su gran mayoría,
completamente posicionados en la membrana basal. Hay gran cantidad de mucus,
que les da un aspecto hialino. Se observan conglomerados o gotas de lípidos
agrupadas alrededor del núcleo del oocito. El núcleo aún presenta una pequeña
zona basófila y permanece en una posición central con respecto a toda el área del
oocito. La proteólisis del vitelo es inicial. Las gotas de aceite alrededor del núcleo
convergen hacia un lado del núcleo. Se inicia la migración nuclear hacia el polo
animal, con el núcleo ligeramente desplazado del centro del oocito (Fig. 7).
Opi
OvfOvi
OilOvf
Oac
Opf
gv
il
gv
Opi
evil
ec
cg
zp
Ovi
Ovf
A B
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
32
-Ooocitos con núcleo migratorio.- La gota de aceite se ha formado por completo y
se localiza a un lado del núcleo. La proteólisis del vitelo es más generalizada en el
ooplasma. En la etapa más avanzada la gota de aceite es central, y el núcleo, sin
membrana se localiza cerca de la membrana plasmática (Fig. 8).
Figura 7.- Microfotografía de oocitos con células columnares en la capa granulosa. A)
Opl: Oocito en proteólisis. N: núcleo. vl: vesículas lipídicas. cg: células de la granulosa. gv: gránulos de vitelo. lm: lumen. A 100 aumentos. Técnica Hemtoxilina-eosina B) Detalle de oocito con células de la granulosa columnares (Occ). nu: nucléolo. il: inclusiones lipídicas. zp: zona pelúcida. ev: envoltura vitelina. A 400 aumentos. Técnica Tricrómica de Mallory
gv
cg
N
vl
Opl
lm gv
cg
nu
N
zp
ilev
Occ
lm
A B
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
33
Figura 8.- Microfotografía de oocitos con núcleo migratorio A) Detalle de oocito con
núcleo migratorio (Onm), nm: núcleo migratorio. vl: vesículas lipídicas. cg: células de la granulosa Ovf: oocito en vitelogénesis final, a 100 aumentos. Técnica Tricrómica de Mallory. B) Detalle de oocito en hidratación inicial (Ohi), ga: gota de aceite. gv: granulos de vitelo. lm: lumen, a 100 aumentos. Técnica Tricrómica de Mallory.
-Oocitos hidratados.- En este momento el oocito aumenta rápidamente su volumen
debido a la acumulación de líquido. Las células de la teca y la granulosa adoptan
forma aplanada En su imagen histológica se observan profundamente deformados
por el efecto del líquido que los rodea. El ooplasma estuvo ocupado por vesículas
fusionadas de vitelo licuado, incluidas en una matriz basófila finamente granular.
El núcleo está en posición polar, pero es poco evidente (Fig. 9).
Ovf
cg
Onm
vl
nm
cg
lm
gvga
Ohi
A B
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
34
Figura 9.- Microfotografía de oocitos en hidratación final (Ohf) encontrado a las 13:00
horas. A) Ovf: oocito en vitelogénesis final, a 25 aumentos. B) Detalle de Ohf, ga: gota de aceite. cg: células de la granulosa, lm: lumen, a 100 aumentos. Técnica de Tricrómica de Mallory.
Estadio IV (Puesta).
Se caracterizó por la presencia de las diferentes etapas de los folículos
postovulatorios (Fig. 10).
-Folículos postovulatorios de día cero, PO-0.- Muestra muy pocos signos de
degeneración, se identifican las células de la granulosa bien definidas y alineadas.
El folículo postovulatorio contiene notables circunvoluciones compuestas de restos
del epitelio columnar sobre una membrana basal. El núcleo está en una posición
basal, sin evidencia de picnosis.
-Folículos postovulatorios de día uno, PO-1.- Se observó cierta desorganización
del tejido, se reduce el tamaño y forma de las células columnares del folículo y se
inicia una marcada pérdida del arreglo linear. Las células de la capa granulosa
Ohfcg
lm
ga
Ohf
OhfOhf
Ovf
A B
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
35
pierden paulatinamente su individualidad formando poco a poco un sincitio y hacia
el final de esta etapa aparecen núcleos picnóticos Folículos en forma de epitelio
cúbico simple plegado, con células bajas (Fig. 10).
-Folículos postovulatorios de día dos, PO-2.- La degeneración es claramente más
avanzada. Las circunvoluciones se han reducido aunque aún se reconocen. El
lumen colapsa conteniendo núcleos picnóticos irregularmente distribuidos. La teca
y la granulosa aparecen como una estructura entremezclada donde no se
evidencia la individualidad de las células (Fig. 10).
-Folículos postovulatorios de día tres, PO-3.- Caracterizados por una estructura de
menor tamaño a los anteriores, fibrosa y con un sistema vacuolar intenso; por su
composición suele confundirse con los estadios de atresia β sin vitelo (Fig. 10).
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
36
Figura 10.- Microfotografía de gónada desovada de S. sagax a 25 aumentos. A) Ovi:
oocito en vitelogénesis inicial. Opi: oocito perinúcleolar inicial. fpo: folículo postovulatorio. Técnica Tricrómica de Mallory. B) Detalle de folículo postovulatorio 1 (fpo1), n: núcleo. lm: lumen. vc: vacuola. A 400 aumentos. Técnica Hematoxilina-eosina. C) Detalle de folículo postovulatorio 2 (fpo2), np: núcleo pignótico. A 400 aumentos. Técnica Tricrómica de Mallory. D) Detalle de folículo postovulatorio 3 (fpo3). Ovf: oocito en vitelogénesis final. cg: células de la granulosa. zp: zona pelúcida. a 400 aumentos. Técnica Hematoxilin-aeosina.
Estadio V (Reabsorción).
Esta etapa del desarrollo se asignó a los organismos que presentaron una
población celular en atresia evidente, en todos los tipos de oocitos (atresia mayor).
Se observó el claro proceso de atresia alfa, con vitelo escaso o abundante, atresia
Ovi
Opi
fpo
fpofpo1
lm
n
vc
fpo2
np
lm
fpo3
Ovf
Ovf
cg
zp
A B
DC
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
37
beta con vitelo, sin vitelo; Las características microscópicas comunes en las
diferentes formas atrésicas fueron: lisis de ooplasma y la zona pelúcida, pérdida
de la individualidad en las células granulosas, núcleos picnóticos, vacuolización,
residuos de material vitelogénico de diferente aspecto y cuerpos irregulares,
esféricos y substancia amorfa de intensa afinidad acidófila o basófila (Fig. 11).
Figura 11.- Microfotografía de una comparación entre un oocito en vitelogénesis final
(Ovf) y un oocito con vitelo en atresia alfa (Aα). zp: zona pelúcida. gv: gránulos de vitelo. lm: lumen. cg: células de la granulosa. A 400 aumentos. Técnica Hematoxilina-eosina
-Atresia alfa (α).- Se observa una hipertrofia de la granulosa que avanza sobre el
oocito destruyendo esta célula y los gránulos de vitelo entremezclados con las
células epiteliales de la granulosa (Fig. 12).
-Atresia beta (β).- Compuesta de células de la granulosa y de la teca. La mayor
parte del vitelo ha desaparecido, puede verse una cavidad entre las células
gvgv
cg
zp
Ovf
Aα
lm
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
38
epiteliales. Se observa una estructura compacta con vasos sanguíneos que
proliferan en la estructura y pueden verse elementos del tejido conjuntivo
especializados en la reabsorción. En las etapas avanzadas se observa una
pigmentación marrón – amarilla (Fig. 12).
Figura 12.- Microfotografía de oocitos atresicos. A) oocito con vitelo en atresia alfa (Aα) a
100 aumentos. Ovf: oocito en vitelogénesis final. Ovi: oocito en vitelogénesis inicial. Opi: oocito perinúcleolar inicial. cg: células de la granulosa. zp: zona pelúcida. lm: lumen. B) oocito con vitelo en atresia beta (Aβ) a 100 aumentos. vc: vacuola. C) oocito sin vitelo en atresia alfa (Aα) a 400 aumentos. D) oocito sin vitelo en atresia beta (Aβ) a 400 aumentos. Técnica Hematoxilina-eosina.
Ovf
Aα
Ovilm
Opi
zp
cg
Aβ
vc
OvfOpi
cg
lm
Aα
Opi
lmOpi
Opi
Aβ
A B
DC
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
39
Se observó una gran variabilidad en los valores de talla, peso, IGS y
frecuencia de hembras activas, tal y como se puede observar en la tabla III donde
se muestran los promedios de todas las muestras utilizadas en este trabajo.
En cuanto a la composición de las tallas de S. sagax, las hembras en un
estadio de madurez más avanzado como el caso del EO-4 presentaron las
mayores tallas con una media de 159.6 mm, mientras que las hembras con un
menor tamaño están en el EO-1 con una media de 144 mm (Fig. 13). En cuanto a
la distribución de tallas por estadio ovárico, el único que presenta una distribución
normal es el EO-1. Se hizo la prueba de Kruskal-Wallis (k=61.76; p<0.001) para
datos no paramétricos, confirmando así que existen diferencias en cada estadio;
encontrando en la prueba a posteriori de comparaciones múltiples por pares
mediante el procedimiento de Dunn dos grupos, uno formado por EO-1 y EO-2, y
el segundo grupo por EO-3, EO-4 y EO-5.
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
40
Tabla III.- Fecha y horario de captura, longitud estándar modal (SL) (mm), IGS medio por lance, frecuencia relativa de hembras activas (Ha), tamaño de muestra (N) ó número total de individuos por lance de pesca.
Fecha Hora SL modal (mm) IGS Ha Característica ovárica en
frecuencia modal N
19-mar-04 0:01 157 4 100 Hidratación >50% 11
05-mar-08 0:58 165 5 94.28571429 Hidratación >50% 35
19-mar-04 1:45 150 3 88.88888889 Atresia 36
18-feb-04 2:20 157 6 100 PO-2 28
28-feb-06 2:20 161 6 100 Hidratación >50% 42
04-mar-08 2:20 170 4 100 Hidratación >50% 41
18-mar-04 3:30 178 4 100 PO-2 25
27-mar-06 3:45 189 2 47.36842105 Atresia 38
17-feb-05 5:30 130 4 88.88888889 PO-2 9
09-mar-05 5:30 135 4 90.90909091 Atresia 22
15-mar-07 6:00 144 1 31.25 Atresia 32
21-feb-07 6:45 130 4 100 Vitelogénesis final 15
26-ene-07 7:20 168 5 92 Hidratación >50% 25
12-ene-05 7:40 145 2 53.84615385 Núcleo migratorio 26
02-feb-06 9:00 142 6 96 Hidratación >50% 50
22-feb-07 10:10 170 4 93.61702128 Núcleo migratorio 47
09-mar-05 10:30 142 4 85.71428571 Atresia 7
13-mar-07 11:15 163 3 81.81818182 Vitelogénesis final 11
21-feb-07 11:30 175 4 96.875 PO-3 32
02-feb-06 11:40 133 4 84.61538462 Hidratación >50% 39
09-mar-05 12:40 147 5 97.2972973 Hidratación >50% 37
01-feb-06 13:00 137 3 65 Vitelogénesis inicial 40
21-feb-07 13:00 165 4 100 Vitelogénesis final 39
13-mar-07 18:30 159 3 55.55555556 Atresia mayor 9
14-mar-07 18:55 160 4 75 Núcleo migratorio 8
01-feb-06 19:30 127 2 40.38461538 Inclusiones lipídicas 52
14-mar-07 19:35 147 2 35.13513514 Atresia 37
18-mar-04 22:40 157 4 94.11764706 PO-2 17
09-mar-05 23:20 133 4 88.37209302 Atresia 43
04-mar-08 23:50 165 4 97.14285714 Hidratación >50% 35
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
41
Figura 13.- Relación de la talla de la hembra con el estadio ovárico.
El índice gonadosomático (IGS) en el ciclo de 24 horas presentó un valor
medio de 3.8694, una desviación estándar de 2.0858, un coeficiente de variación
(CV) de 53.9%, sobresaliendo dos picos, el primero de las 00:00 AM a 2:00 AM del
día y otro a las 9:00 AM (Fig. 14); se demostró mediante la prueba Kruskal-Wallis
(k=219.51; p< 0.0001) que sí existen diferencias significativas entre los valores del
IGS durante el transcurso del ciclo diario (Tabla IV).
210195180165150135120105
210195180165150135120105
60
45
30
15
0
210195180165150135120105
60
45
30
15
0
1
TALLA (mm)
FREC
UENC
IA2 3
4 5
Mean 144StDev 15.90N 34
EO-1
Mean 145.6StDev 17.17N 108
EO-2
Mean 157.4StDev 17.93N 550
EO-3
Mean 159.6StDev 16.72N 174
EO-4
Mean 159.8StDev 16.30N 22
EO-5
EO-EO-EO-
EO- EO-
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
42
Figura 14.- Variaciones del IGS, la media, DS, valores máximo y mínimo, en el ciclo diario
de S. sagax.
Se compararon los valores del IGS en el trascurso del ciclo diario entre los
diferentes estadios ováricos; dividiendo el EO-3 en dos etapas para un mejor
análisis: EO-3a) oocitos con núcleo migratorio, y EO-3b) oocitos hidratados y en
proteólisis. Se encontraron diferencias significativas con la prueba Kruskal Wallis
para EO-2 (k=40.20; p=0.00), EO-3b (k=68.62; p<0.0001), EO-4 (k=46.84;
p<0.0001) y EO-5 (k=12.83; p=0.025); EO-2 y EO-5 presentaron varianzas muy
grandes por lo cual no se pudieron distinguir grupos mediante el procedimiento de
Dunn (Tabla V). Comparando los estadios ováricos se encontraron diferencias
23222120191817161514131211109876543210
12
10
8
6
4
2
0
HORA
IGS
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
43
significativas (k=376.72; p<0.0001) de acuerdo con los valores de IGS (Tabla VI);
encontrando que un valor de IGS > 5 es un indicador de madurez.
Tabla IV.- Comparaciones múltiples por pares mediante el procedimiento de Dunn para
los valores del IGS en el transcurso del ciclo diario.
Hora IGS µ DS CV Grupos
19 1-8 2.841 1.734 0.610 A 6 0-6 3.710 1.637 0.441 A B 3 0-7 2.255 1.621 0.719 A B C 13 1-6 3.451 1.963 0.569 B C D 7 1-9 3.304 1.244 0.377 B C D 1 1-6 2.270 1.724 0.760 B C D 5 1-8 3.974 1.705 0.429 B C D 22 2-6 4.522 2.447 0.541 B C D 23 1-9 3.417 1.156 0.338 C D 10 2-11 5.640 2.174 0.385 C D 11 1-10 4.130 1.864 0.451 D 18 3-6 4.085 1.772 0.434 D E 0 1-11 4.595 2.047 0.446 D E 12 2-12 4.000 1.118 0.280 D E 2 2-11 3.882 1.453 0.374 E 9 2-10 5.514 2.169 0.394 E
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
44
Tabla V.- Comparaciones múltiples por pares mediante el procedimiento de Dunn para los valores del IGS en el transcurso del ciclo diario para cada estadio.
Estadio ovárico Hora IGS µ DS CV Grupos
EO-3b
6 1-6 3.375 1.500 0.444 A 13 2-6 3.737 1.327 0.355 A 1 2-6 3.760 1.091 0.290 A 3 1-7 3.960 1.791 0.452 A 19 1-8 4.211 1.782 0.423 A B 10 2-9 4.357 1.870 0.429 A B 7 1-9 4.414 1.881 0.426 A B 23 1-9 4.510 1.745 0.387 A B 5 2-8 4.615 1.758 0.381 A B C 11 2-10 4.791 1.922 0.401 A B C 18 3-6 4.714 1.254 0.266 A B C 12 2-12 4.962 2.200 0.443 A B C 0 1-11 5.242 2.359 0.450 A B C 22 3-6 5.333 1.211 0.227 A B C 2 2-10 5.785 2.228 0.385 B C 9 3-10 6.275 1.867 0.298 C
EO-4
0 2-3 2.429 0.535 0.220 A 6 1-4 2.000 1.732 0.236 A 1 2-4 3.000 0.707 0.361 A 22 2-5 3.111 0.928 0.182 A 5 2-5 3.231 1.092 0.338 A 23 2-7 3.455 1.368 0.866 A 12 2-6 3.444 1.333 0 A 3 2-4 3.313 0.602 0.356 A 13 2-6 3.500 0.885 0.554 A 9 2-6 3.571 1.272 0.190 A B 18 3-4 3.500 0.707 0.387 A B 10 3-11 4.364 2.420 0.253 A B 19 3-6 3.889 1.054 0.202 A B 11 3-5 3.941 0.748 0.271 A B 7 4 4.000 0.000 0.298 A B 2 2-11 5.069 1.831 0.396 B
Tabla VI.- Comparaciones múltiples por pares mediante el procedimiento de Dunn para los valores del IGS en los diferentes estadios ováricos.
Estadio ovárico IGS µ DS CV Grupos
EO-1 0-1 0.912 0.379 0.416 A EO-2 1-5 1.509 0.704 0.466 A EO-5 1-4 2.273 0.935 0.412 A EO-3a 1-7 3.559 1.220 0.343 B EO-4 1-11 3.741 1.445 0.386 B EO-3b 1-12 4.836 2.036 0.421 C
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
45
Las frecuencias de los estadios de crecimiento de los oocitos varían
constantemente en el transcurso de las 24 horas (Tabla VII). En EO-1 los
perinúcleolares finales abundan entre las 5:00 y 6:00 AM; en el proceso de
desarrollo empiezan a aparecer lo alvéolos corticales, sus frecuencias más altas
se encontraron a las 3:00 AM y otro pico alrededor de las 7:00 PM (Fig. 15). En el
EO-2 las inclusiones lipídicas tuvieron su frecuencia más alta a temprana hora,
presentando su pico máximo a las 7:00 AM, en este mismo estadio se observó la
vitelogénesis inicial con un máximo a las 7:00 PM (Fig. 16). Para el EO-3 la
vitelogénesis final presenta su pico máximo a la 1:00 PM, los núcleos migratorios a
las 10:00 AM, mientras que los oocitos hidratados presentan su máxima presencia
a la media noche (Fig. 17).
Figura 15.- Frecuencias de estadios del crecimiento de los oocitos en el estadio ovárico
de inmadurez en un periodo de 24 horas, en el máximo de la temporada de puesta de S. sagax. PNF: perinúcleolares finales. AC: alvéolos corticales.
0
2
4
6
8
10
12
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
%
HORA PNF AC
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
46
Tabla VII.- Frecuencias de los estadios de crecimiento de los oocitos de S. sagax durante el ciclo de 24 horas. N: número de muestras. PNF: perinúcleolares finales. AC: alvéolos corticales. IL: inclusiones lipídicas. VI: vitelogénesis inicial. VF: vitelogénesis final. NM: núcleo migratorio. HH>: oocitos hidratados. PO-0: postovulatorio día 0. PO-1: postovulatorio día 1. PO-2: postovulatorio día 2. PO-3: postovulatorio día 3.
Hora N PNF AC IL VI VF NM HH> PO-0 PO-1 PO-2 PO-3 Atresia < Atresia > 0 46 0 0 0 0 6.52 6.52 54.35 0 2.17 2.17 4.35 19.57 4.35 1 36 0 0 5.56 2.78 8.33 22.22 19.44 0 2.78 0 0 38.89 0 2 111 0 0 0 0 2.70 18.02 38.74 0 0 17.12 6.31 17.12 0 3 63 0 7.94 4.76 1.59 3.17 7.94 17.46 0 0 14.29 3.17 31.75 7.94 5 31 3.23 0 0 0 9.68 6.45 16.13 0 16.13 16.13 6.45 22.58 3.23 6 47 10.64 0 2.13 8.51 12.77 17.02 8.51 0 0 0 2.13 29.79 8.51 7 51 0 3.92 7.84 15.69 11.76 21.57 31.37 0 0 0 1.96 5.88 0 9 50 0 0 0 4 2 34 40 0 0 4 6 10 0
10 54 0 0 0 1.85 20.37 29.63 11.11 0 1.85 3.70 5.56 24.07 1.85 11 82 0 0 3.66 2.44 15.85 21.95 21.95 0 0 4.88 12.20 14.63 2.44 12 37 0 0 0 0 2.70 13.51 40.54 0 0 2.70 16.22 18.92 5.41 13 79 0 1.27 6.33 8.86 29.11 12.66 5.06 0 2.53 13.92 10.13 10.13 0 18 17 0 0 0 0 11.76 23.53 0 0 0 0 0 35.29 29.41 19 89 10.11 6.74 23.60 7.87 6.74 6.74 7.87 1.12 0 6.74 2.25 14.61 5.62 22 17 0 0 0 5.88 5.88 17.65 11.76 5.88 17.65 29.41 0 5.88 0 23 78 0 0 0 0 15.38 14.10 28.21 0 1.28 6.41 2.56 28.21 3.85
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
47
Figura 16.- Frecuencias de estadios del crecimiento de los oocitos en el estadio ovárico
de vitelogénesis inicial en el pico reproductivo de S. sagax, con énfasis en un periodo de 24 horas. IL: inclusiones lipídicas. VI: vitelogénesis inicial.
Figura 17.- Frecuencias de estadios del crecimiento de los oocitos en el estadio ovárico
de vitelogénesis avanzada en el pico reproductivo de S. sagax, con énfasis en un periodo de 24 horas. VF: vitelogénesis final. N: núcleo migratorio. HH>: oocito hidratado >50%.
0
5
10
15
20
25
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
%
HORA IL VI
0
10
20
30
40
50
60
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
%
HORA VF NM HH>
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
48
La aparición de los PO-0 se da unas pocas horas después de la frecuencia
máxima de oocitos hidratados, esto se puede tomar como un indicador de que el
desove está a punto de suceder. Para el caso de los PO-1 se observan dos picos
uno a las 5:00 AM y otro a la 7:00 PM, son la evidencia de los desoves parciales,
característica de esta especie; tal es el caso para los PO-2 que también muestra
estos dos picos, en el caso de los PO-3, es diferente, solo se observa un solo
máximo (Fig. 18), pero al ser un estadio más avanzado este es más difícil de
observar ya que la estructura tiende a destruirse conforme avanza el proceso, en
ocasiones se confunde con los estadio de atresia β sin vitelo (Hunter y Macewics
1985); ver en la figura 10-D y 12-D.
Figura 18.- Frecuencias de folículos postovulatorios del EO-4 de desove en el máximo de
reproducción de S. sagax, con énfasis en un periodo de 24 horas. PO-0: postovulatorio de tipo 0. PO-1: postovulatorio de tipo 1. PO-2: postovulatorio de tipo 2. PO-3: postovulatorio de tipo 3.
0
5
10
15
20
25
30
35
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
%
HORA PO-0 PO-1 PO-2 PO-3
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
49
En EO-5, el proceso de atresia menor no presentó grandes variaciones en
el día, este oscila de un 20 a un 40%, es un proceso normal en el desarrollo de los
oocitos, aunque la atresia mayor (presente en el 50% de los oocitos) muestra un
aumento en su frecuencia alrededor de la hora en que esta especie desova, esto
se puede observar en la figura 19. En cuanto al porcentaje de atresia mayo
durante el pico reproductivo mostró variaciones con respecto a los meses, enero
presentó 5.88% mientras que en el punto máximo del pico que corresponde a los
meses de febrero-marzo el porcentaje aumentó al 23.89%.
Figura 19.- Frecuencias de estadios de reabsorción (atresia) de los oocitos en el pico
reproductivo de S. sagax, con énfasis en un periodo de 24 horas.
El crecimiento del oocito descrito en la figura 20, permite demostrar que
transcurren 7 días desde un estado de inmadurez, hasta el estadio de hidratación
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
%
HORA Atresia Atresia mayor
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
50
> 50% como el indicador principal del desove y 5 días más a partir de la
hidratación de estos, se completa la reorganización del oocito.
Figura 20.- Desarrollo del oocito desde la etapa inicial hasta la reorganización. En el eje
de las X se muestran las horas acumuladas, y en Y, el porcentaje.
Se estimó la frecuencia de puesta de S. sagax basados en los criterios
anteriormente mencionados, dividiéndose la temporada de puesta de diciembre a
abril en dos; una parte con datos del inicio de la temporada (enero) y otra en el
pico reproductivo (febrero-marzo). Aunque en el mes de enero no se pudo calcular
la frecuencia, debido a que no se encontraron folículos PO-1 y PO-2, y estos son
necesarios para la estimación; en cambio, sí se observaron folículos PO-3 que son
indicadores de haber sucedido el desove, es una fracción mínima de hembras; en
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
51
cambio para los meses de febrero-marzo se tiene un promedio de 14% de
hembras desovantes por día, (Tabla VIII).
Tabla VIII.- Frecuencia de hembras desovantes por noche de S. sagax en el pico
reproductivo (febrero-marzo) en Bahía Magdalena.
Simbología Valores Número de muestras 𝑛 28 Hembras desovantes con FPO’s del día 1 𝑚1𝑖 14 Hembras desovantes con FPO’s del día 2 𝑚2𝑖 70 Número corregido de hembras maduras 𝑚𝑦𝑖 304
Número de hembras que no están hidratadas y que no han desovado
𝑚𝑎𝑖 178
Número promedio corregido de hembras maduras 𝑚� 10.9 Fracción corregida de hembras con folículos postovulatorios
��𝑖 0.05
Fracción promedio de hembras desovantes por día 𝑆 0.14 Varianza 𝑉(𝑆) 0.007
Estas variaciones de las frecuencias de puesta de la sardina monterrey en
la temporada de reproducción dan como resultado un ciclo de puesta, el cual
cambia de velocidad continuamente tanto en el ciclo anual como en el ciclo diario.
La comparación de los valores de las frecuencias de puesta obtenidos se
presenta en la tabla IX, donde se describen de manera general algunas
características reproductivas obtenidas para estas especies en distintas
localidades y fechas. Se observa que los valores obtenidos en este trabajo son
similares a las encontradas en estudios realizados por diferentes autores para la
misma especie en diferentes zonas y en otras especies.
Ce Acatl Arce Peinado Resultados
52
Tabla IX.- Comparación de las frecuencias de puesta de S. sagax con otros peces Clupeiformes.
Especie Área geográfica
Estación de puesta
Horario de puesta
Frecuencia de puesta Fuente o autor
E. mordax California Abril - Septiembre
22:00 a 02:00
0.142 0 ± 0.120 (1980)
Hunter y Macewicz,1980
E. encrasicolus
Bahía de Vizcaya
Abril - Septiembre
22:30 a 06:30
18 a 33 % Motos, 1996
E. ringens Perú Agosto - Septiembre
18:00 a 02:00
16.04 % ± 0.0001
Alheit et al., 1983
Sardina pilchardus pilchardus
Portugal Marzo 19:00 0.126 Cunha et al., 1992*
España Abril - Mayo 19:00 0.210 García et al., 1992*
Marzo 19:00 0.180 Lago de Lanzós et al., 1998*
Sardina pilchardus sardina
Grecia Noviembre - Diciembre
21:00 0.093 (1999) Ganias et al., 2003
Diciembre 21:00 0.095 (2000) Ganias et al., 2003
Enero - Febrero
21:00 0.087 Somarakis et al., 2001*
Sardinops melanostictus
Japón Enero - Marzo 00:00 0.117 (1991) Aoki y Murayama,
1993* S. neopilchardus
Australia Enero - Marzo 02:00 0.140 (1998) Ward et al., 2001
Enero - Marzo 04:00 0.180 (1999) Ward et al., 2001
S. sagax California Abril - Mayo 21:00 0.121 (1994) Macewicz et al., 1996
S. sagax Chile Agosto - Diciembre
0.152 (1988) Claramunt y Herrera 1994
Agosto 0.153 (1989) Claramunt y Herrera 1994
S. sagax México Enero - Marzo 19:00 a 22:00
0.14 ± 0.007 Este estudio
*Datos extraídos de Ganias et al., 2003.
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
53
DISCUSIÓN
Sardinops sagax se caracteriza por tener una fecundidad indeterminada con
producción continua de oocitos y desoves parciales a lo largo de la temporada de
puesta. El número de oocitos al iniciar la temporada de reproducción no se
encuentra determinado (Hunter y Goldberg, 1980; Hunter y Macewicz, 1980). La
misma situación se presenta en la producción gametogénica durante toda su vida
reproductiva. Si bien se ha caracterizado la temporada reproductiva de la sardina
durante periodos anuales en forma periódica, ésta ha sido descrita a través de
métodos macroscópicos como el IGS por diversos investigadores, identificando de
manera gruesa un pico reproductivo principal (invierno). Los estudios de Torres-
Villegas (1986) y Torres-Villegas et al. (1995) han demostrado con análisis
histológicos en series largas de tiempo con precisión la extensión de la temporada
de desove en el invierno de enero a marzo y se ha encontrado eventualmente otro
periodo secundario de menor magnitud (verano).
Las actividades de muestreo biológico de la sardina están fuertemente
sesgadas hacia escalas de tiempo y espacio favorables para la pesca comercial,
esto implica, un esquema de muestreo ubicado lo más cerca posible del máximo
de puesta principal, con el fin de evitar en lo posible la alta variabilidad que
caracteriza los periodos iniciales y finales de la temporada de puesta, en un
balance con las facilidades para el muestreo (Smith, 1978; Stauffer y Piquelle,
1980). Si se considera que la temporada de pesca de sardina se extiende de
diciembre a abril, en este estudio solo se tomaron en cuenta las muestras de
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
54
enero a marzo por incluir a los meses de mayor actividad ovárica; aun así, se
observaron diferencias entre los meses de reproducción, evidenciándose los
valores más altos de las frecuencias de puesta en febrero-marzo. Aunado al pico
reproductivo, para este tipo de estudios lo ideal sería obtener las muestras de un
solo cardumen, de tal manera se puede seguir la evolución de los estadios pre y
postovulatorios en una secuencia continua, en la misma fracción de la población.
Es claro que no existe la seguridad absoluta de que los distintos lances realizados
por un barco, pertenezcan al mismo cardumen del lance anterior. En este caso,
considerando una misma temporada y una misma zona de captura, se resolvió
reunir muestras recolectadas en distintos años, durante el periodo máximo de
puesta, todas de la misma zona de estudio.
El patrón de desarrollo o crecimiento de los oocitos de S. sagax se siguió
con las frecuencias de los estadios durante el ciclo de 24 horas. La maduración
del oocito en el ciclo diario de puesta, reúne los procesos generales presentes en
los vertebrados. Sin embargo, existen características particulares para cada
especie entre los teleósteos; durante cada estadio de desarrollo se presentaron
cambios morfológicos, que fueron particulares a cada estadio y corresponden a
eventos fisiológicos específicos. Durante la fase de crecimiento primario las
oogonias se identificaron como nidos de células. Coward y Bromage (1998)
sugieren que los grupos de oogonias siempre están presentes para el
reclutamiento, lo cual es importante en especies con desoves múltiples. En el
estadio de oocitos perinúcleolares el desarrollo del oocito se hizo evidente por el
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
55
cambio en el número y forma de los nucléolos, Wallace y Selman (1981), Tyler y
Sumpter (1996), y Ochoa-Báez (1998).asocian el incremento de nucléolos a la
acumulación de sustancias como ARNs y proteínas
Wallace y Selman (1981), Billard, (1992), y Tyler y Sumpter (1996)
establecen que el papel de los alveolos corticales es el de evitar la
poliespermiación, liberando su contenido en el momento de la fertilización al darse
la reacción cortical. Motta et al. (2005) que caracterizaron los alvéolos corticales
en diferentes especies del género Trematomus y Cryodraco, encontrando
diferencias en su composición bioquímica entre especies. A pesar de estas
diferencias, mencionan que el desarrollo de estas inclusiones se observó en la
misma zona del oocito en que se ha descrito en otras especies de peces óseos,
próximas a la envoltura vitelina. Desde el punto de vista morfológico, la estructura
y la región del citoplasma donde se encuentran los alvéolos corticales de la
sardina monterrey, es equivalente a lo descrito por Ochoa-Báez (1998) para
Engraulis encrasicolus.
Para seguir el estadio de vitelogénesis, en este trabajo se hizo una división
de la vitelogénesis, en inicial y final, aunque generalmente diferentes autores la
dividen en tres etapas; mencionando que durante la vitelogénesis el crecimiento
del oocito representa entre el 11% y el 40% de la talla final en especies con
huevos pelágicos. (Coward y Bromage, 1998; Tyler y Sumpter, 1996).
La presencia de las células granulosas formando un epitelio columnar se
evidenció como un carácter distintivo de la especie y un indicador contundente de
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
56
la maduración vitelogénica en el ciclo diario. Alarcón et al. (1984), describen estas
células como un evento esporádico en la sardina española de Perú. En sardina del
Pacifico (S. sagax) esta característica fue descrita por Andrews (1931) y sugiere
una asociación con los eventos del desove, debido a que se observó la aparición
de las células granulosas antes del inicio de la proteólisis y migración nuclear.
Torres-Villegas (1986) confirma la misma condición de las células de la granulosa
y sugiere que se trata de un paso anterior a la hidratación.
En las descripciones morfológicas de clupeidos que se analizaron para este
trabajo no hay mención a la presencia de células columnares en la capa
granulosa. Por el momento S. sagax es la única especie con esta característica,
para lo cual no hay evidencias para explicar este hecho. Aparentemente en S.
sagax la presencia de células columnares en la capa granulosa puede ser un
indicador de la madurez final del oocito y el término de la vitelogénesis; y señal
definitiva de la actividad de la capa granulosa en la producción de estrógenos
coincidente con la producción de vitelogeninas por el hígado, definido en el estadio
de madurez del oocito, descrito por Matsuyama et al. (1990), asociado con la
secreción de esteroides estimulantes de la migración nuclear. Puesto que esto es
parte del proceso general de madurez del oocito, es posible asumir que sucede de
la misma manera en la sardina monterrey.
Es pertinente hacer más estudios del epitelio columnar de S. sagax; si se
confirma con la proteólisis y la hidratación del vitelo, puede asumirse que el
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
57
aumento de volumen en el folículo sea debido a la acumulación de líquidos
corporales (agua) al alcanzar la maduración del oocito.
La proteólisis, el núcleo migratorio y la hidratación en la parte final del
proceso de crecimiento del oocito sucedieron de una forma más discreta. La fusión
de las inclusiones lipídicas durante la proteólisis se vio acompañada por cambios
en la morfología de la vesícula germinal. La formación de la gota de aceite entre la
proteólisis de vitelo y el núcleo migratorio aparentemente se da por la separación
de una parte lipídica del vitelo concentrándose en la gota de aceite. El cambio en
la forma del núcleo y los nucléolos son indicios del proceso de hidratación, junto
con la desaparición de la membrana nuclear. Aun antes de concluir la fusión de las
inclusiones lipídicas se pudo observar en algunas hembras el proceso de
migración nuclear (Torres-Villegas, 1997).
Se observó que los valores más altos los obtuvieron los estadios de
madurez a lo largo de todo el ciclo a excepción de las 19 horas donde las
inclusiones lipídicas dominan, apareciendo los PO-0, indicando el inicio del
desove. A las 18 horas se dio un incremento considerable en la frecuencia de
aparición de atresia mayor, de 0% a las 17 horas hasta un 29.41%, Torres-Villegas
et al. (2007) mencionan que en S. sagax, la incidencia de oocitos aislados con
atresia, a lo largo de la temporada de puesta, se considera normal cuando se
presentan alrededor del 2%, aumento atribuido a los cambios hormonales que se
dan en la sardina para el desove.
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
58
Al iniciar la temporada de puesta, la frecuencia de desovantes es baja, y el
tiempo entre un desove y otro es máximo, y coincide con un número de hembras
maduras no desovantes alto. Cuando La temporada de puesta alcanza el máximo,
el tiempo entre los desoves se reduce; esta variación pone de manifiesto un
control muy preciso en la última parte de la vitelogénesis y las fases de hidratación
del oocito. Los cambios morfológicos en las fases preovulatorias presentadas en
los resultados, son una evidencia del control hormonal que rige estos procesos,
sobre todo su efecto en las células de la teca. Estos mecanismos de control
posiblemente se encuentran en fase con controles ambientales específicos
(Torres-Villegas, 1997).
El patrón de desarrollo, así como la frecuencia de puesta de 0.14 ± 0.007
obtenida para S. sagax es similar a la reportada en otras especies de teleósteos
marinos y para la misma especie en zonas diferentes (Tabla IX), como E. mordax,
E. encrasicolus, E. ringens, Sardina pilchardus pilchardus, Sardina pilchardus
sardina, Sardinops melanostictus y S. neopilchardus (Hunter y Macewicz, 1980;
Motos, 1996; Alheit et al. 1983; Ganias et al. 2003; Ward et al., 2001; Macewicz et
al., 1996; Claramunt y Herrera 1994). Esto es un indicador de que esta estrategia
reproductiva es ampliamente utilizada por peces que viven en ambientes con
características semejantes, en este caso adaptadas a las variaciones que se
presentan en el ambiente pelágico en áreas de gran productividad (Pitcher, 1995).
Los resultados en relación con la frecuencia de puesta, dan la evidencia
morfológica para establecer los criterios precisos para diferenciar los folículos
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
59
postovulatorios. Esto permitirá en lo futuro hacer estimaciones de la frecuencia de
puesta basadas en los criterios histológicos estrictos obtenidas de poblaciones del
medio natural, la asignación de la periodicidad de la puesta y la tasa de
producción de oocitos en S. sagax.
Es importante resaltar la necesidad de disponer de estudios de esta
naturaleza, en series de tiempo continuas por varios años, con el fin de poder
analizar las variaciones de la reproducción en plazos de tiempo prolongado y
continuo, y su relación con algunos factores ambientales, a fin de plantear
hipótesis en el futuro con posibilidad de conjuntarse en un modelo biológico
convincente que explique las variaciones en la abundancia de sardina (Torres-
Villegas et al., 1986; Torres-Villegas, 1997).
La terminología que se utilizó para describir el ciclo diario de puesta es
aceptada ampliamente, aunque aún no puede hablarse de un consenso. West
(1990); Tyler y Sumpter (1996) se esfuerzan por estandarizar la terminología
utilizada en diferentes estudios, e indican la importancia de lograr este consenso.
Llegar a una nomenclatura histológica normalizada ha sido problemático, lo que se
complica con la diversidad en la terminología y la insuficiencia de las
descripciones morfológicas. Desde hace 30 años atrás trabajos de Wallace y
Selman (1981) han dado la base morfológica y fisiológica para una nomenclatura,
lo cual se pierde al realizarse trabajos con diferentes especies. En parte por la
naturaleza de la especie en cuestión y por la dificultad para hacer observaciones
detalladas de los cambios morfológicos que caracterizan a la madurez.
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
60
Este problema es evidente cuando los estudios de la reproducción se
desarrollan orientados hacia temas de administración pesquera. El establecimiento
de estadios de madurez sexual en la mayoría de los casos se realiza sobre bases
generales; aunque una escala de esta naturaleza es poco útil aplicada de forma
directa a otras especies, puesto que son características específicas de S. sagax.
No obstante, los procesos que originan los estadios de desarrollo del oocito son
equivalentes. Con base en esta condición Ochoa-Báez (1998) describió el
desarrollo del oocito en E. encrasicolus, con énfasis en las características y
abundancia de las granulaciones en las células de la capa granulosa y la
fragmentación del vitelo durante la proteólisis. Esto significa que para construir una
escala morfológica del desarrollo del oocito deben hacerse estudios descriptivos
detallados del crecimiento y maduración del oocito por especie, solo para
establecer las características más evidentes en la especie en cuestión.
La única diferencia entre el folículo ovárico de las sardinas y anchovetas, es
la capa granulosa formada por células columnares, que solo aparece en las
sardinas. Estas características que se describieron de los distintos estadios
permiten identificar los folículos postovulatorios de otras especies de peces
(Hunter y Macewicz 1985).
En 2001 en una reunión celebrada en Noruega, se recomendó el uso de
indicadores o características morfológicas asociadas al desarrollo del oocito,
permitiendo así hacer comparaciones entre las escalas de madurez propuestas
para la sardina monterrey y las propuestas por diferentes autores para distintos
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
61
clupeidos (Kjesbu et a., 2003); Existe una amplia discusión sobre el uso del índice
gonadosomático (de Vlaming et al. 1982) para el seguimiento de la reproducción y
la puesta en peces. Particularmente en S. sagax, caracterizada por desoves
múltiples, el IGS debe ser considerado con cuidado, debido a cambios rápidos en
el peso de los ovarios horas antes e inmediatos a la ovulación. La utilidad del IGS
para el seguimiento de la reproducción es indiscutible por su aplicación accesible y
de resultados expeditos. La dinámica de puesta se refleja en las variaciones del
peso corporal y de las gónadas, lo cual requiere de observaciones de la estructura
histológica de los ovarios, a fin de dar una idea cercana del grado de avance en la
producción de oocitos.
Las variaciones del IGS con relación a los estadios ováricos han
demostrado que es posible distinguir de manera confiable, el grado de actividad
reproductiva, siempre y cuando se apliquen ciertos criterios. En la tabla VI se
distingue claramente como se separa el EO-3b que está próximo al desove de los
demás, mientras que las hembras inactivas o en atresia (EO-1, EO-2 y EO-5)
forman un solo grupo. Si bien se observó un traslapo de los estadios ováricos;
también se detectaron otros factores determinantes que se deben conocer
previamente. El primer factor importante se refiere al conocimiento de la
composición poblacional por tallas, con lo cual se conocerá cuales son las clases
de talla que están dominando en el grupo muestreado. El otro factor consiste en el
conocimiento previo de la temporada de reproducción de la especie, determinado
mediante el estudio histológico de la gónada. No es aceptable por otro método,
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
62
puesto que se necesita conocer con precisión la extensión de la estación
reproductiva. Es importante puesto que permitirá precisar si los resultados del
estudio estuvieron dentro de la temporada de puesta o fuera de ella. (Ochoa-Báez,
1998).
Si se dispone de la información antes señalada, es posible aplicar una
escala de maduración con los niveles del IGS para el seguimiento de la
reproducción por largas series de tiempo; sin la validación histológica cada vez
que se aplicara. En vista de lo anterior, se pudo concluir que los indicadores del
crecimiento gonádico por peso, son una buena alternativa para el seguimiento
estacional de la actividad gonádica de la sardina. Siempre y cuando, exista un
estudio previo que valide la composición y estructura de las gónadas en cada fase
del crecimiento del órgano (Ochoa-Báez, 1998). En la práctica el valor de IGS ≥ 5
es un indicador de madurez, validado con el estudio histológico detallado del
ovario, comprobando que el uso de indicadores de la reproducción a partir del
peso de las gónadas de S. sagax puede ser un método confiable si bien existe una
validación histológica en numerosas muestras en el tiempo y el espacio.
Hunter y Goldberg (1980) encontraron alta incidencia de atresia, en el
ovario de anchoveta en cautiverio, lo cual dificulta en gran medida hacer las
determinaciones. Además, no hay indicadores del efecto del cautiverio en la
velocidad de proceso de las fases pre y postovulatorias, lo cual complica la
extrapolación de los resultados a las condiciones silvestres. Para S. sagax el
porcentaje de atresia durante el pico reproductivo mostró variaciones con respecto
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
63
a los meses, enero presentó 5.88%, mientras que, en el punto máximo del pico
que corresponde a los meses de febrero-marzo el porcentaje aumentó al 23.89%;
a pesar de un mayor porcentaje de atresia en el pico reproductivo, se obtuvo una
mayor frecuencia de puesta, indicando que el proceso de atresia es una constante
sin relevancia para la producción diaria de oocitos durante el ciclo diario.
Con los criterios morfológicos desarrollados por Hunter y Goldberg (1980)
para estimar la frecuencia de desovantes, se establece que 56 horas después del
desove es difícil distinguir los folículos PO de la atresia tipo β sin vitelo, por tanto la
estimación de la frecuencia de puesta se hace con base en la frecuencia de los
folículos PO-1 o PO-2, correspondientes un máximo de 48 horas después de la
puesta, calculándose un promedio entre ambos (Hunter y Macewics, 1985; Torres-
Villegas, 1986; Motos, 1996).
Las hembras con oocitos hidratadas son más vulnerables a las capturas
debido a su distribución agregada y por lo tanto son vulnerables al sobre-
muestreo. Es por esto que solo se utilizan porcentajes de hembras hidratadas, los
PO-1 y PO-2. PO-3 no se utilizan debido a la posibilidad de confundirlos con
atresias foliculares. Se combinan los datos de PO-1 y PO-2 porque se reduce el
coeficiente de variación a casi un tercio y es importante ya que este valor se utiliza
en los cálculos de biomasa desovante (Alheit et al., 1984).
El ciclo diario de puesta tiene una dinámica difícilmente representada como
un ciclo cerrado, puesto que, como se ha mencionado antes, las etapas terminales
de reabsorción de los folículos postovulatorios quedan superpuestas con los
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
64
estadios de vitelogénesis avanzada. De acuerdo a los resultados de este estudio,
se confirmó la dinámica de la producción oocitaria por día, como un modelo con
forma helicoidal, en el cual la operación de esta hélice depende de la velocidad
con la que se completa la fase de crecimiento del oocito (Ochoa-Baez, 1998), cuyo
proceso está regulado por el sistema endócrino y por la disponibilidad de reservas
en el cuerpo de las hembras reproductoras (Van Der Kraak, et al., 1998). Cuando
la frecuencia de puesta se incrementa, disminuye el tiempo en que el 100 % de la
población desova. Lo cual es una consecuencia de que el crecimiento del oocito
se completa más rápidamente y entonces los estadios avanzados de reabsorción
de los folículos PO serán coincidentes con estadios más tempranos de los oocitos
del inmediato próximo desove. En esta situación la hélice se cierra sobre sí misma
(Ochoa-Baez, 1998).
La variación en la duración de la época de reproducción se debe al número
de veces que cada hembra en particular pasa por el ciclo diario de desove (Hunter
y Macewicz, 1980), así como de la velocidad con la que se lleva a cabo la
reorganización del ovario, generándose condiciones favorables de un desove
nuevo. Distintas especies muestran valores equivalentes, esto indica la posibilidad
de mínimas diferencias en la frecuencia de puesta, en tanto, la diferencia
probablemente se encuentra en el tiempo transcurrido de la temporada de desove,
es decir en el número de veces que cada hembra adulta desova en un año.
Cuando el periodo de reproducción se alarga, la población se mantiene con
producción desovante menor (con una frecuencia de puesta baja) hasta el
Ce Acatl Arce Peinado Discusión
65
momento en que se acelera el ciclo, y se alcanzan los valores máximos de
desovantes por noche, después se desacelerar la taza de producción al final de la
temporada, e incrementa la frecuencia de atresia (Torres-Villegas, 1997). La
cantidad de trabajos enfocados a describir el proceso de maduración del oocito es
bastante amplia, sin embargo, varios autores utilizan nomenclaturas que dificultan
la comparación del desarrollo del oocito entre especies, al asignar una numeración
o denominación que podría ser interpretada de diversas maneras, puesto que la
mayoría de las veces no se definen los criterios que fueron utilizados en la
descripción. El seguimiento del ciclo diario en el ovario de S. sagax, tiene
relevancia indiscutible por el estudio del proceso de producción de oocitos con
precisión, a nivel tisular y celular, como información científica indispensable para la
estimación de la frecuencia de puesta y la fecundidad, lo cual tiene gran valor para
la evaluación de biomasa, con miras al manejo sustentable del recurso en México.
Ce Acatl Arce Peinado Conclusiones
66
CONCLUSIONES
- Las modificaciones tisulares y celulares en el folículo ovárico y el oocito,
con la excepción de las células altas en S. sagax, son comparables con las
de otros clupeidos.
- Durante el ciclo de 24 horas en el máximo de reproducción, los oocitos en
madurez avanzada, tuvieron la mayor frecuencia individual y poblacional.
- La frecuencia de hembras desovantes de S. sagax en la temporada
reproductiva es comparable cuantitativamente a la registrada en otras
especies de clupeidos.
- Se corroboró que al principio de la temporada reproductiva la intensidad del
desove es mayor en el pico, comparada con el inicio y el fin de la misma.
- En el ciclo reproductivo diario de S. sagax se confirmó que la máxima
actividad de puesta sucede durante los meses de febrero y marzo.
- El proceso de atresia es una constante sin relevancia para la producción
diaria de oocitos durante el ciclo diario en el máximo de la temporada
reproductiva.
- El uso de indicadores de la reproducción a partir del peso de las gónadas
puede ser un método preciso, si es validado con el análisis histológico de
los ovarios y testículos.
Ce Acatl Arce Peinado Recomendaciones
67
RECOMENDACIONES
- Comparar los cambios tisulares y celulares de los folículos ováricos y
oocitos de S. sagax con otros peces teleósteos para buscar establecer una
nomenclatura general para estos cambios.
- Hacer una caracterización de la maduración gonádica de machos en un
ciclo de 24 horas, ya que no hay estudios de este tipo para los machos de
S. sagax.
- Analizar los cambios en los factores endógenos durante el ciclo d 24 horas
y su relación con los diferentes estadios ováricos.
- Es de gran importancia hacer un estudio en un ciclo de 24 horas completo
en la misma localidad, para tener una descripción veras del mismo ciclo.
Ce Acatl Arce Peinado Bibliografía
68
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