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7/24/2019 Venenos Serpientes ft.Rojas
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Rev Bio Top 3 5(1 : 5967 987
Neutralicin de l actividades txicas y enzimticas de cuatrovenenos de serpientes de Guatemala y Honduras por el antiveneno polvalente
produco en Costa Rica
Gusavo Rojas, Jos Maa Gue Jos A Ge Mabe Gme y us Cedsnstitto Clodomio Pido Fcutd de Micobioog Univesidd de Costa Rica San Jos osta Ri
( Recibido e 15 de bil de 1 986 )
Abstract: We stdied the blity of the polyvalent ativenom poduced in ost Rica to ntalize ethahemohgic edemafoming poteolytc hemolytic hyaluonidase nd bolytic acivites of the venomsof Bothrops asper and B nummife fom Honduas and of Agkistrodon bilneatus and Cotalus rissusdurssus fom Guatemla. Neutazig abilty of antivenom ws epessed as ED s (effective dose 50%)defined as the antienomenom tio t which the ctivity of the venom is educed 50% Antivenom ishighy effective in the ntalztion of etal hemohagc hemoytic hyonidse and senoytic
ctvties of B aspe B nummif nd d durissus venoms. In the se of B nummifer venom, neutalzation of fibinolytic effect was only pti whees this a ctvity was adequ ately neu tazed when st dyingthe venoms of B. asper and C d. duiss The venom of A bilineatus ws adequately neu aled by thentieno with the only eception of hemolytic effect that was educed ony partially Howeve, quantitate tems a elativey lage voume of antivenom was ued to neutlze soe effects induced byA bilneatus venom Regarding edemafoming activity antienom neutaized effciently the venoms of Basper nd A bilineatus, whees that of B nummife was neutalzed only patiy; on the othe handedem induc by the venom of d durissus ws not neutalzed at al! Immunochemical esults indicate cose immunologic eltionship between venoms of B asper B nummifer and d durissus colected n
Honduas nd Guateml with those of the e speces colected in ost Ri Intespeies compaisonhoweve showed varition between venoms obtned fom diffeent species. t is concuded tht wth the
f
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RO AS al. : Antveneno ostarcense venenos de sepentes de Gatemala y Honduas 6 1
Hemlisis indirecta: S e utz e mtodo empeado por Gen t . (1985) L doss hemol-
tca mnma se dei como a cantdad de ve-neno ue induce una hemiss del 7 E nos expermentos de neutralzacn s empeuna doss de reto de veneno correspondente ados doss hemoltcas mnimas
Haluroida : Se utz a tcnca de Xu t
(1982) modcada por Gen t 1985)empeando cdo hurnco (Sgma) como sus-trato. La doss aurondasa mnma se dencomo a cntdad de veneno ue hidrolza el7% del cdo ialurnco. En os expermentosde neutraacn se us una doss de reto deveneno correspondente a una doss haluronda-
sa mnma
Fbrinolss: L actvdad brnotca se es-tud utlzando una tcnca de placa modca-da en la cua trabaja con un coguo de ibra obtenido a partr de una mezca de pasmade cnco crneros empleando ctrato de sodoa 4% como antcoagunte El pasma ctratadoue dudo con un amortguador de Tris .5M suato de amono 7 M Coruro de so-do 9 M Coruro de magneso 69 mM pH75 Se transr 22 mI de a soucn de plasmadudo a placas de pstco ( 3 x 8 cm) de acasa Hyand posteriormente se adcon 3 mIde CaC 25 M mezcndose y dejndose apaca en reposo durnte una hora a 37 C con el d bt t t S b
1 mg/m Se len os orcos con 2 ul demuestra Luego de 24 horas de dsn en c
mara hmeda se av os gees con soucn sali-na y agua destlada y se es t con neo deamdn o coorante PonceauS. Adems seeectu nmunoeectrooress de os venenoscontra ntveneno povaente en gees de agaosa a % en amortguador de barbturatos pH82 (Ouchterony y Nlsson 19 78) Una vez
concluda a corda eectroortca se abr uncanal en el centro de gel lenndose con antvenen povaente y s dej dundr durante 24horas a temperatura ambente en una cmarahmeda Se av los gees con solucn yagua destada y ueron tedos con coortePonceauS.
RESULTADOS
En os cuadros 2 3, 4 5 y 6 as como enla gra 1 se resume os resutados relatvos alas actvdades txcas y enzmtcas de cada veneno as como a su neutralacn por el ntveneno E veneno de Agkitroon biintspresent una actvdad proteotca muy dbsobre a casena de mnera e en este caso nose estud la neutralzacn por e antveneno.Por otra parte este veneno resut ser atamen-te hemorrco edematzante y eta en tmnos cuanttatvos e veneno de A. biints escas dez veces ms hemorrgco y edematzante
ue e veneno de Bothro r (cuadro 2)Los cuadros muestran ue e antveneno ue
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62 RVST A D BOLOGA TROPCAL
CUADRO 1
Efct ta d s nns y su nutraiacin pr antnn piant
Veneno Dosis leal 50 %
g/an*
Neualizacn D50
( anveneno/mg veneno**
taus durissusdurissus Guaemala
Agkistrdn biinatusGuaemala
Bthrps asprHonduas
Bthrps nummifrHonduas
6 9 1 7
22 1075
64 3 3 3
28 769
* l veneno se inocul o la va inaeoneal y se obsev las muees duane 48 oas.* Razn aniveneno/veneno en la que se oege al 50%de la oblacin de aones inoculados
CUADRO 2
Efct hmgic d s nns y su nutraizacin
pr antinn piant
Veneno Doss emogica mnimag *
Neualzacin Dl anveneno/mg veneno * *
Crtaus durissusdurissus Guaemala
Agkistrdn binatus
GuaemalaBthrpsaspr
7.5 350
0.25 2650
6 5 7
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RO A et a Aveeo coscese veeos de sepees de Guem Hodus 63
Veeo
otaus duissusduissus Guem)
Agkistodon biineatusGuem)
Bothops aspeHodus)
Bothops nummifeHodus)
CADRO 3
Efecto hemoUtico indiecto de os venenos y suneutaiacin po e antiveneno poivaente
Doss hemoc mmg) *
> 000
73
34
70
* Cdd de veeo que duce 70% de hemss** Rz veeoveeo e que e efec hemoco es educdo e u 50%
euzc DE ) veeomg veeo) * *
- * * *
> 2000
5
20
*** Dd cvdd d e ese veeo o fue pose esud euzc po e veeo
CADRO 4
Efecto poteotico de os venenos sobe casena ysu neutaizacin po e antiveneno poivaente
e Doss poemm mg)*
Neuzc DE'o ) veeomg veeo)**
Cotaus duissusduissus Guem)
Agkistodo biineatusGuem)
3
> 25
0
-***
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Vnno
REVITA DE BIOOGIA TROPICAL
CUADRO 5
Acividad hiauonidasa de os venenos y suneuaiacn po e aniveneno poivaene
utlzn (DEDoss lurondsmnm (g* (l ntvnno/mg vnno**
oaus dussusduissus (Gutm
Agkisodon biineaus(Gutm
Bohops aspe(Hondurs
Bohops nummie(Hondurs
60 0
330 4
310 2
30 0
* Cntdd d vnno qu droz l 70% dl do urno
* * Rzn ntvnno/vnno n qu l tvdd luronds s rdud n un 50% .
CUADRO 6
Acividad binoica de os venenos y su
neuaizacin po e aniveneno pivaene
Vnno Doss frnoltmnm (g*
utrlzn (DE)(l ntvnno/mg vnno**
oaus duissusdussus (Gutml
Agkisodon biineaus(Guml
03
0
735
800
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ROJ AS et a. : Antineno costarcense y vennos de sepents de Guatemaa y Honduras 65
A
120
lO
100
90
- 80*
70