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El reactivo de Shiff
Fucsina bsica tratada con exceso de cido
sulfuroso lo que la decolora y en presenciade un aldehdo da color rojo violeta
Se forma cido 4, 4
AMINOSULFINICOTRIFENIL METANOSULFNICO
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Fucsina bsica
Formula: C20-H20-Cl-N3.color index 42510
Tambien llamada:1. violeta bsica.2. Magenta I.3. alfa4-(p-aminofenil)-alfa4(imi... clorhidrato.4. Fucsina diamante
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El cido leucosulfnico es inestable y pierde cido sulfuroso cuandose trata con aldehdo
produciendo un colorante quinoideo de color violeta-prpura.
cido 4, 4 AMINOSULFINICOTRIFENIL METANO SULFNICO
cido leucosulfnico
Metabisulfito de potasio
Fucsina bsica
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Identificacin de carbohidratos por accin del
CIDO PERYDICO
Se produce aldehidos en grupos
Glucosidos : hexosas neutras,
azcares
Galactsidos
Mansidos
Fucsidos
cido silico
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el acido perydico rompe los enlaces C - C
en diversas estructuras en las que estn presentes grupos
1:2-glicol (CHOH-CHOH)
convirtindolos en dialdehdos (CHO.CHO)
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acido perydico
que lo hace inmensamente superior a los reactivoscorrientemente utilizados para la oxidacin de los enlaces C-C,no oxida despus a los aldehdos resultantes,pudiendo estos, ser localizados mediante reactivo de Schiff
para dar un colorante sustituido de color rojo.
la reaccin del cido perydicocon el residuo deshidroglucosa de una molcula de polisacridoPuede observarse el colorante rojo formado por la unin de la
leucofucsina con el dialdehdo, un nuevo compuesto.
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Accin de la oxidacin por cidoperydico
R-CH CH-R R-CH HC-R+H2O
OH OH O O
aldehdo aldehdo
HIO4
glicol
1
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Bases qumicas de la reaccin P.A.S.
Reacciones que producen al menos un radical aldehdo
glicol frmula Producto de oxidacin
HIDROXIAMINO
primario
OH NH2
-CH- CH-
O O
-CH CH-
+ NH3HIO4
Accin de la oxidacin por cido perydico2
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Bases qumicas de la reaccin P.A.S.
Reacciones que producen al menos un radical aldehdo
glicol
frmula Producto de oxidacin
HIDROXIAMINO
secundario
O O
-CH CH-
-OH NH-R
-CH CH-
+ NH2RHIO4
3
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Bases qumicas de la reaccin P.A.S.
Reacciones que producen al menos un radical aldehdo
glicolfrmula
HIDROXICETONA
OH O
-CH - C
+H2OO O
-CH COH
Producto de oxidacinfrmula
HIO4
4
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Bases qumicas de la reaccin P.A.S.
Reacciones que producen al menos un radical aldehdo
glicol
frmula
HIDROXIALDEHIDO
- OH O O
- CH CH - CH CO2 + H2O
Producto de oxidacin
HIO4
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Frmula del reactivo de Shiff
Reactivo de Schiff
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Usar fucsina bsica pura ( fucsina diamante)
Color index
Metabisulfito de potasio o sodio
Agregar cido clorhdrico normal o 3 ml de HCl
(Estos forman cido sulfuroso)
Preferible guardar por 24 horas
agregar carbn activado, filtrar
Debe quedar transparente o de color oro plido
PREPARACIN DEL REACTIVO DE SHIFF
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Se puede usar a las 4-6 horas
Preferible guardar por 24 horas a T ambiente en
oscuridad Debe quedar transparente o de color oro plido
si da color rosa debe descartarse
para su uso debe estar a T ambiente
PREPARACIN DEL REACTIVO DE SHIFF
Dura no ms de de 1 mes
Se debe guardar en frasco oscuro y en refrigerador
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Se puede usar a las 4-6 horas
Preferible guardar por 24 horas a T ambiente en
oscuridad Debe quedar transparente o de color oro plido
si da color rosa debe descartarse
para su uso debe estar a T ambiente
PREPARACIN DEL REACTIVO DE SHIFF
Dura no ms de de 1 mes
Se debe guardar en frasco oscuro y en refrigerador
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Sustancias P.A.S. Positivas
Estmago: epitelio, glndulas fndicas, cardiales y
pilricas
tero : glndulas del cervix, vagina
Tiroides : coloide
Hipfisis anterior
Secreciones : prstata, vesculas seminales,
folculos ovricos, cuerpos amilceos del cervix,
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Sustancias P.A.S. positivas
Pigmentos : ceroide, lipofucsina de las suprarrenales
Membranas basales epiteliales y vasculares
Mucus : glndulas salivales, gl.traqueobronquiales,
cls caliciformes de intestino
Bordes ciliados de rin e intestino
Tejido conjuntivo: colgeno de esclertica,sustancia fundamental de cartlago
Lpidos : bastones de la retina
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La reaccin tiene una gran especificidad si:
La oxidacin es corta
Se realiza a temperatura adecuadaSe efecta lavado con agua sulfurosa
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H.EP.A.S
Cls. Caliciformes
estmago
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HIPOTLAMO
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ADENOCARCINOMA
Diagnstico diferencial :
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Qu es?
Ssutancias P.A.S positivas
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IDENTIFICACIN DE HONGOS
UTILIZANDO REACTIVO DE SHIFF
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@
IDENTIFICACIN DE HONGOS
Qu sustancia nos permite identificarlas?
http://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htm8/12/2019 3. Reactivo de Shiff 09
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@
IDENTIFICACIN DE HONGOS
RICOS EN POLISACRIDOS
http://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htmhttp://pathy.fujita-hu.ac.jp/~tsutsumi/photo/photo078-3.htm8/12/2019 3. Reactivo de Shiff 09
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P.A.S.
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MEMBRANA BASAL - CPSULA DE BOWMAN
GLICOPROTENAS
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Tejido muscular GLICGENO
Escasas fibras PASposivas
http://mail.google.com/mail/?view=att&realattid=f_erpd2vp1&disp=inline&attid=0.6&th=10d7ab6b51f2a5bdhttp://mail.google.com/mail/?view=att&realattid=f_erpd35iv&disp=inline&attid=0.7&th=10d7ab6b51f2a5bd8/12/2019 3. Reactivo de Shiff 09
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Clulas caliciformes
MUCOPOLISACRIDOS NEUTROS
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GLUCOGENOSIS TIPO IV
causada por la deficiencia de la enzima ramificante amiloa-1,4-1,6-glucotransferasa
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Fijadores recomendados
MUCOPLISACRIDOS Formol tamponado Solucin de Zenker
Solucin de Bouin
GLICGENO Carnoy
Lquido de Zenker Formol alcohlico cido
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Fijacin no recomendada
Glutaraldehido
Puede usarse si tratamos eltejido con hidroborato de sodio
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mtodo
1. Desparafinar hasta agua destilada
2. Oxidacin en cido perydico3. Reactivo de Shiff
4. Lavar en agua sulfurosa
5. Lavar en agua destilada
6. Tincin nuclear
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TCNICAS MIXTAS
PAS - ALCIAN BLUE
MUCOPLISACRIDOS NEUTROS
MUCOPOLISACRIDOS CIDOS
http://info.fujita-hu.ac.jp/~hirasawa/newgallery2/alc_008.jpghttp://info.fujita-hu.ac.jp/~hirasawa/newgallery2/alc_007.jpg8/12/2019 3. Reactivo de Shiff 09
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Identificacin de cido silico:
o Presentan enlace glicosdico
o Usar cido perydico diludo
oTiempo corto
o Slo identificamos residuos de cido silico.
Oxidacin selectiva
Se utiliza para diferenciar mucina de tumores colnicos
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Precauciones
Corrosivo
Txico
Trabajar con guantes
Frasco oscuro Refrigerar 2 a 8 C
Almacenamiento
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