7/28/2019 Biometria hematica serie blanca
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Extensión sanguínea
Una extensión o frotis sanguíneo consiste en recubrir parcialmente un porta con una
gota de sangre, de tal manera que las células de ésta se dispongan formando una sola
capa de ellas. Esto puede hacerse manual o automáticamente. Lo último se realiza
mediante un aparato (spinner) que centrifuga rápidamente el porta con la sangredepositada en su centro. Con este aparato se obtienen unos frotis que presentan una
distribución celular muy homogénea.
Frotis sanguíneo
Extensión en un porta objetos
Con los dedos índice y pulgar de una mano, sujetar un extremo del porta normal (porta
soporte), a nivel de sus bordes, y situarlo sobre una mesa. También puede apoyarse,simplemente, el porta soporte sobre el extremo del dedo corazón de la mano que lo
sujeta. De esta forma, el porta soporte forma un ángulo con la mesa.
Con un capilar cargado mediante capilaridad de sangre problema, depositar unapequeña gota de ésta (de unos 5 microlitros) en la cara superior de ese porta, a nomenos de 2 cm del extremo opuesto al que agarra la mano.
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Colocar un extremo del porta esmerilado (porta difusor o extensor) un poco pordelante de la gota de sangre y formando un ángulo de 45° con el porta soporte. Esconveniente utilizar siempre el mismo porta extensor, para adaptarlo a esta función.
Desplazar suavemente hacia atrás el porta extensor, hasta que alcance la gota de
sangre.
Dejar que la gota se extienda, por capilaridad, a lo largo del extremo del porta extensorque toca el porta soporte.
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Antes de que la sangre alcance los bordes de ese extremo, deslizar el porta extensorhacia delante, con un movimiento firme y uniforme, y a una velocidad media. Estedeslizamiento debe acabar, aproximadamente, a 1 cm del extremo final del portasoporte, con un movimiento de ascensión del porta extensor.
Secar rápidamente la extensión, agitándola al aire, para que sus células no sedistorsionen.
Tinción de Giemsa
1.-Se fija con metanol durante 3min
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2.-Cubrir el frotis con la solución de may greenwald Durante 2min este para
producir una fijación
3.- sin voltear (sin escurrir) agregar igual cantidad de agua destilada durante 30seg
4.-Voltear y lavar con agua destilada
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5.-Se prepara una solución tamposa a 8 gotas de colorante por 2 ml de buffer para
cada laminilla que se va a teñir se cubre la preparación y se deja 10min.
6.- voltear y lavar con agua destilada
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Se coloca una gota de aceite y se ve a 100x
Se toma un contador y se hace el conteo de 100 celulas
Tinción de Wrigth
1.- cubrir el frotis con el colorante de Wrigth durante 8min
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2.- sin voltear colocar una cantidad de buffer dejar de 6 a 10min (se formauna
superficie de brillo metalico)
3.-voltear y lavar con agua
Se coloca una gota de aceite y se mota en el microscopio y se observa 100x