UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGIAS
DECANATO
PROYECTO DE INVESTIGACION
TÍTULO: Evaluación de dos dosis de huevos de Sitotroga cerealella para la crianza de Chrysoperla externa en el laboratorio de biotecnología y control integrado de plagas – Lambayeque
AUTOR (es): Sarmiento Ruiz Thalia Estephany del Pilar
Cruzalegui Jaramillo Juvica
PATROCINADOR: Dra. Bióloga: Calderon Arias Carmen
APROBADO POR:
PRESIDENTE DE JURADO MIEMBRO SECRETARIO
MIEMBRO VOCAL JEFE CENTRO INVESTIGACIÓN
JEFE DEPARTAMENTO DECANO
Lambayeque 30 de julio del 2015
UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
DECANATO
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
I. GENERALIDADES 1. Título del Proyecto:
Evaluación de dos dosis de huevos de Sitotroga cerealella para la crianza de Chrysoperla externa en el laboratorio de biotecnología y control integrado de plagas – Lambayeque
2. Personal Investigador:2.1. Autor (s):
Sarmiento Ruiz Thalia Estephany del Pilar
Cruzalegui Jaramillo Juvica Sabina
2.2.Asesora:Dra. Carmen Calderón Arias
2.3 Colaboradores:Ingeniero Agrónomo Jaime Tirado Ruiz
Bachiller, Juan Prada Calderon
3. Carrera Profesional/Especialidad:Biología / Biología General
4. Tipo de Investigación:4.1. De acuerdo al fin que se persigue:
4.1.1. Básica
4.2. De acuerdo a la técnica de contrastación:4.2.1. Descriptiva
5. Régimen de Investigación:5.1. Orientada.
6. Localidad e Institución donde se desarrollará el proyecto.
Laboratorio de Biotecnología y control Integrado de Plagas en
Lambayeque, Perú.
7. Duración del Proyecto:3 meses (Mayo- Julio 2015)
8. Fechas probables de inicio y terminación:8.1. Inicio: 1 de mayo del 2015
8.2. Terminación: 16 de julio del 2015
9. Cronograma de trabajo:CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
ACTIVIDADES2015
MAYO JUNIO JULIOFASE DE PLANEAMIENTO• Revisión bibliográfica• Elaboración del proyecto• Presentación del proyecto• Aprobación del proyecto• Implementación del proyecto.
XXXX
FASE DE EJECUCIÓN• Recolección de muestras• Procesamiento de muestras• Registro de datos• Análisis estadístico de datos
X XXXX
FASE DE COMUNICACIÓN
Análisis e interpretación Elaboración del informe Presentación del informe
X XX
10. Recursos disponibles:10.1. Personal
Se contará con el apoyo del personal profesional y técnico
del Laboratorio de Biotecnología y control Integrado de
Plagas -Lambayeque
Personal docente y administrativo de la Facultad de Ciencias
Biológicas de la UNPRG - Lambayeque.
10.2. Equipos e Instrumentos. Balanza Analítica
Cámara Digital
10.3. Material y Reactivos:
10.3.1. Materiales Tapers de plástico
Libreta
Cartulinas
Baldes de plásticos de 1 galon de capacidad
Mallade platicos,tipo tul.
Pegamento para tubos(PBC)
Papel Kraft
Ligas
Tijera de plástico
Algodón embebido en agua
Bandeja de plástico
Cartulina
Taper de plástico.
Tela holgazana
10.3.2. Material Biológico
Larva de chrysoperla externa
Larva de Sitotroga cerealella
10.4. Local El presente proyecto se ejecutara en el Laboratorio de
Biotecnología y control Integrado de Plagas –
Lambayeque,Perú
11.Presupuesto:
BIENES COSTO UNITARIO
CANTIDAD TOTAL
2.3.15.12 MATERIAL DE ESCRITORIOPapel bond A4 (millar) S/. 12.00 1 S/. 12.00Lapiceros S/. 1.00 10 S/. 10.00Plumones S/. 2.50 10 S/. 25.00Folders S/. 8.00 2 S/. 16.00Cinta masking tape S/. 1.50 1 S/. 1.50Engranpador S/. 10.00 1 S/. 10.00Borrador S/.1.50 2 S/.3.00
2.3.18.21 MATERIAL, INSUMOS E INSTRUMENTOS
Balanza analítica S/. 85.00 1 S/.85.00Camara S/. 500.00 2 S/.5006.00Tapers de plásticos S/. 5.00 8 S/. 40.00Baldes de plastico S/.7.00 10 S/. 70.00Algodón S/. 6.00 1 S/. 6.00Malla o tul S/.5.50xm 4 S/. 22.00Detergente (kg) S/. 5.00 1 S/. 5.00Jabon liquido S/. 10.00 1 S/. 10.00Lejia (L) S/. 6.00 1 S/. 6.00Toallas S/. 3.00 2 S/. 6.00Papel secante (rollo) S/. 10.00 1 S/. 10.00
2.6.32.11 MATERIAL PARA PROCESAMIENTO DE DATO
USB (8gb) S/. 30.00 1 S/. 30.00Impresora Canon S/: 390.OO 1 S/: 390.OOFrigobar S/. 299.00 1 S/. 299.00
SERVICIOS
2.3.21.21 PASAJES Y SUBVENCIONES S/. 100.00 1 S/.100.00TOTAL S/.890.00
12.12. Financiación.12.1. Con recursos universitarios:
El Laboratorio de Biotecnología y control Integrado de Plagas -
Lambayeque, nos brindara el laboratorio de crianza y la ayuda del
personal profesional y técnico.
12.2. Autofinanciación:.El trabajo en parte será autofinanciado por los responsables esta
investigación
II. PLAN DE INVESTIGACIÓN 1. Realidad Problemática}
Chrysoperla es uno de los géneros que tiene mayor importancia dentro
de la familia Chrysopidae), por considerarse a sus especies como
insectos benéficos en el control biológico1.
Las Chrysoperlas denominada vulgarmente como crisopa, es un insecto
de la familia Chrysopidae y está integrada por especies comúnmente
llamadas “alas de encaje”, “moscas de ojos dorados” o simplemente
“leones de áfidos”; y son los más importantes predatores del Orden
Neuroptera. . El género Chrysoperla incluye unas 40 especies y es, sin
duda, el de mayor interés económico, habiéndose utilizado su cultivo en
masa en multitud de programas de control biológico2.
Su distribución geográfica es prácticamente cosmopolita. Se encuentra
en muchas partes de Europa y Asia. Actualmente se consideran los
agentes biológicos decisivos para el control de plagas insectiles,
habiéndose difundido su utilización en cultivos comerciales,
invernaderos o jardines.3
La fauna Peruana de esta familia está conformada por varias especies
en diversos grupos taxonómicos y muchos de los cuales no se
encuentran en otras partes del mundo4.
Chrysoperla externa es una especie peruana, la cual destaca por su
presencia predatora, amplia distribución , presencia de adultos a través
de todo el año, fácil crianza en cautiverio, potencial para adaptarse a
varios ambientes de cultivo y su resistencia a numerosos pesticidas5
Son los controladores biológicos promisorios en el Manejo Integrado de
Plagas (MIP) en cultivos de interés económico como maíz, papa,
algodón, palma aceitera y frutales (cítricos, olivo, manzano, etc), en los
cuales ya se han realizado ensayos exitosos.El manejo de estos
controladores biológicos está orientado a acciones de conservación e
incremento de las especies nativas en existencia y el establecimiento de
programas de liberación inundativa e inoculativas de especies criadas en
insectarios6.
El establecimiento de un módulo de crianza de las especies en mención
con dosis distintas de Sitrotoga cerealella, teniendo como base la
información sobre aspectos básicos de los ciclos biológicos y
comportamientos, facilitará al usuario las disponibilidad de predatores
para su uso de campo o para contribuir de este modo a potencializar su
producción en gran escala.
1.1. Identificación del problema:Evaluación de dos dosis de huevos de Sitotroga cerealella
1.2. Delimitación del problema: Crianza masiva de chrysoperla externa en el laboratorio de biotecnología y control integrado de plagas en Lambayeque
2. Problema:¿Cuál sería el efecto en la producción de adultos, tras la crianza de
Chrysoperla externa con dos dosis distinta de Sitrotroga cerialella?
3. Justificación e importancia
La investigación en nutrición de insectos se ha desarrollado rápidamente
en las tres últimas décadas debido a la importancia que se ha adquirido
la multiplicación de insectos para facilitar las investigaciones en los
campos de la Fisiología, Ecología y Genética; así como en
programas de control biológico e integrado7.
Las Chrysopas verdes son de fácil cría bajo condiciones de laboratorio
y el mayor problema que se tiene cuando se realizan estas crías en gran
escala es el canibalismo y la provisión de un adecuado suplemento de
presas8.
El éxito de este tipo de programa- depende en gran parte de la
adquisición de los insectos presa, los cuales deben proporcionar los
requerimientos nutricionales adecuados, ser de fácil manipuleo y
tener un costo de cría bajo. Lo anteriormente expuesto ha conducido a
modificar o sustituir el alimento natural ya sea parcialmente por
dietas artificiales9.
Actualmente en nuestra Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo
en conjunto con el Laboratorio de Biotecnología y control
integrado de plagas de Lambayeque-Perú, se está criando
artificialmente con la dieta común( a base de levadura de
cerveza y polen)y, esta especie, para la producción y la venta,
útil como controlador biológico; por ende los resultados obtenidos
servirán para determinar una dieta artificial comoda y efectiva sobre la
biología del adulto de la especie (C. externa).
4. Marco Teórico3.1. AntecedentesLa familia Chrysopidae es una de las más extensas del orden
Neuroptera con unas 1.200 especies reconocidas actualmente,
agrupadas en 92 géneros y tres subfamilias: Apochrysinae,
Chrysopinae y Nothochrysinae. De las cuales 40 están presentes en la
península Ibérica10
Chrysopidae es una de las familias de entomófagos más importantes
del orden Neuroptera, debido a que 15 géneros presentan especies
con potencial como agentes de control biológico11.
Las larvas de todas las especies y los adultos de algunos géneros son
depredadores y se alimentan de una amplia variedad de insectos
fitófagos tales como áfidos, cóccidos, mosquitas blancas y otros
insectos de cuerpo blando que se localizan en el follaje. Por esta razón,
algunas especies se reproducen actualmente de manera masiva y se
utilizan exitosamente para el control biológico de plagas agrícolas12.Las especies de la familia Chrysopidae son insectos de tamaño
mediano (6.5-35 mm de longitud de las alas), de color verde a café
claro, ojos verdes o dorados y con una longitud de antenas variable
(0.5-2 veces la longitud del ala anterior)13.
En su ciclo biológico, el periodo de preoviposición abarca entre 3 y 13
días. Los huevos de color verde claro, elípticos y alargados, son
depositados sobre el extremo superior de un filamento hialino o
pedúnculo que trata de impedir el canibalismo y la acción de
depredadores y parasitoides. En función de las especies los huevos
son depositados aisladamente o en grupos, en el envés de las hojas
generalmente. Muchas especies seleccionan para la oviposición áreas
próximas a colonias de las presas ya que de esta forma la hembra
dispone de la melaza como fuente de alimento, y además, se facilita
que las larvas recién emergidas encuentren rápidamente a sus presas.
Las hembras pueden depositar una media de 25 huevos al día. La
coloración del huevo cambia a pardo claro a medida que el embrión se
desarrolla, siendo de color pardo oscuro cuando se encuentra próximo
a la eclosión. A lo largo de aproximadamente 10 días las larvas pasan
por tres estadios larvarios antes de la pupación. La larva se caracteriza
por una alta capacidad de búsqueda, intensa actividad, movimientos
rápidos y por ser muy agresivas. Al emerger inicia inmediatamente la
búsqueda de presas, pudiendo desplazarse hasta 25 metros en busca
de alimento. Cuando la larva de tercer estadio está completamente
desarrollada suspende la alimentación e inicia el tejido de un cocón o
capullo protector en un lugar protegido. El cocón tiene forma esférica y
es de color blanco con apariencia algodonosa.En su interior, la larva se
dispone en forma de “C”, a esta fase del desarrollo se la conoce como
prepupa. El adulto al igual que la prepupa tienen capacidad de
hibernación. La longevidad de los adultos es de 2,5 a 9 meses
dependiendo de si existe o no diapausa. El tiempo de desarrollo de
huevo a adulto varía en función de factores como la temperatura,
humedad relativa, fotoperiodo y dieta de la larva En el caso de
Chrysoperla carnea es de unos 22 días a 27oC y una humedad relativa
entre 50 % y 80 %14.
Tras basarse en su ciclo de vida y morfología de la especie; en
California se realizaron las primeras crías de Chrysopa en volúmenes
comerciales para la liberación masiva en diferentes cultivos
comerciales. Finney, fue el pionero en la producción masiva de
Chrysopa, quien utilizó como alimento natural huevos de S.
cerealella (Oliver) y pequeñas larvas de Phthorimea operculella
(Zeller)15.
Tradicionalmente la base alimenticia de las larvas han sido huevos de
alguna especie que se pueda criar fácilmente, razón por la cual se han
utilizado las posturas de Sitotroga cerealella o de Gno-rimoschema
operculella en los procesos de cría masiva de las Chrysopas16.
Describieron (Hagen y Tassan) un método para alimentar larvas de C.
carnea a base de levadura hidrolizable cubierta con parafina en forma
de pequeñas gotitas, pero el método resultó ser muy tedioso; sin
embargo lograron establecer la importancia que juegan los simbiontes
en la nutrición de las Chrysopas, además en sus investigaciones
lograron establecer los efectos causados en el desarrollo del ciclo de
vida de C. carnea cuando las dietas artificiales tenían deficiencias de
vitaminas, sales y aminoácidos.Consideraron que el encapsulamiento
de la dieta larval podía reducir los costos de las crías masivas17.
Por otro lado se evaluó el desarrolló de una dieta semi-sólida para
larvas de Chrysoperla carnea, dieta artificial constituida por lecitina de
soya y aceite, colina, inositol y ácido ascórbico en agua; se demostró
que la falta de lecitina de soya enzimática hidrolizada y la caseína
reducían la emergencia de los adultos. Con esta dieta el desarrollo
larval tardó en promedio 17 a 20 días y la obtención de adultos fue del
56 al 6 5 %, como alimento para larvas de C. carnea18.
Varias dietas artificiales han sido ensayadas y evaluadas con el objeto
de reducir los costos del alimento y facilitar el manejo de las unidades
de cria, pero hasta el momento el uso de huevos de S. ce-realella no
ha podido ser reemplazado en forma absoluta ya que con las dietas
artificiales, el tiempo de desarrollo (en días) de la larva y la pupa, es
superior a la dieta natural consumiendo por lo tanto mayor cantidad
de alimento y el porcentaje de adultos obtenido, la cantidad de huevos
por hembra en un determinado tiempo (28 días) y la fecundidad de las
posturas es inferior19.
Se han desarrollado dietas artificiales para adultos de Chrysoperla
carnea constituidas por proteína enzimática hidrolizada de levadura de
cerveza, logrando obtener 786 huevos por hembra durante 21 días, en
comparación con 391 huevos por hembra cuando se les suministró solo
polen y miel natural20.
Tres investigadores evaluaron adultos de C. carnea alimentándolos con
levadura; mencionan que entre las dietas más importantes para la
producción de huevos de C. carnea se encontraron aquellas
compuestas con sucrosa y levadura. Se determinó que la sucrosa más
levadura logró un incremento del 38 % de huevos por día por hembra
en comparación al alimento natural21.
Se ha evaluado a los adultos de Chrysoperla externa con dietas
artificiales, levadura de cerveza, proteínas hidrolizada y levadura ,as
polen, a dicionandole a todos estos componentes agua destiladas y
miel de abeja, obteniéndose una mayor capacidad de oviposción y más
alta fertilidad con dieta a base de levadura22.
3.2. Bases teóricas- Dieta Se conocen dietas especializadas con las cuales se han logrado
buenas condiciones para sostener las poblacciones de adultos y lograr
rangos óptimos de oviposición y fecundidad. Dentro de esas
formulaciones el Food WheastR es la que mejores resultados ha
arrojado y que mayor utilización tiene entre las entidades que
realizan cría masiva de estos benéficos. El 58% - 60% de las
proteínas en el producto Wheast provienen de dos fuentes, un 40%
de la forma inactiva de la levadura seca Saccharoyces fragalis y el
18% - 20% restante de la albúmina de la leche, producida por el
sustrato de levaduras del suero de queso casero.Se está utilizando
en forma rutinaria y exitosa en la cría masiva de Chrysopa23 .
- Factores Ecológicos Incidentes
Clima: Es la variable más importante en los procesos de adaptación
de una especie. La influencia desbalanceadora del clima induce
procesos fisiológicos como en el caso de la escasa oviposición ob-
servada en las primeras crías de C. carnea, donde la desadaptabilidad
al fotoperíodo largo provocó la infertilidad, factor que fué corregido
manteniendo luz artificial en las noches. Así mismo las Chrysopas
poseen las características de tener una diapausa facultativa de tal
forma que altas o bajas temperaturas aceleran estos procesos
fisiológicos. Por ejemplo: altas temperaturas 3 3o -3 5 ° se reflejan en
infertilidad, debido a una hipe-ractividad de las Chrysopas que se
traduce en cópula constante, haciendo que con el movimiento no se
produzca la fertilización deseada. Con temperaturas de 28° - 29°C se
ha corregido esta anormalidad. Las altas humedades relativas 80 -
90% a nivel de laboratorio provocan desarrollo de hongos en las dietas
y ablandamiento de los pedicelos de los huevos lo que dificulta la
recolección. Humedades de 50 - 70% son óptimas para trabajo de
laboratorio.
Macroclima se refiere,el verano reduce notoriamente las poblaciones
de Chrysopidos y el invierno reduce notoriamente las poblaciones de
las presas. Lo cual hace que las fluctuaciones sean de alta
variabilidad24.
5. Hipótesis, variables y obejtivos4.1. Hipótesis
4.1.1. Formulación de la hipótesisLa Crianza de Chrysoperla externa con dos dosis distinta de
Sitrotroga cerearella, ayudaría a maximizar la producción de
insectos benéficos bajo condiciones de laboratorio.
4.2. Variables4.2.1. Operacionalizacion de variables
OBJETIVOSESPECIFICOS
VARIABLES DEFINICIONOPERACIONAL
DIMENSIONES INDICADORES UNIDADES
Crianza de Chrysoperla externa en el laboratorio
DEPENDIENTEEl número de individuos y porcentaje de huevos ovipositados.
Numero
proporcional de
natalidad en
población o tiempo
determinado
medido en relación
con el total de una
población,
mediante el índice
Determinación
de un numero
de población
Producción
Efecto de dieta
donde se observara la mayor cantidad de
Numero de
individuos
Viabilidad de
los huevos
Cuantitativa
o
procentaje
Dos dosis
distinta de
Sitrotroga
cerearella,.
de natalida, que
inidca el número de
nacidos
registrados.
huevos ovipositados, como efecto de una de las dietas artidiciales
Capacidad de
oviposición
INDEPENDIENTEEvaluacion con
dos dosis
diferentes de
Sitrotroga
ceriarella
Es la capacidad
que tienen unos
individuos para
alimentarse de
aquel sustrato que
le proporcione
suministros
completos para su
desarrollo,
ovoposición.
Influencia
sobre la
capacidad de
ovopisicion de
Chryysoperla
externa.
Nacidos:
.
5. Objetivos 5.1. Objetivo General:
Establecer una máxima producción de C. externa cuya metodología
esté al alcance del productor y que se dé una respuesta positiva en la
producción del predador .
5.1. Objetivos Específicos- Recoger datos biológicos del insecto a nivel de laboratorio
- Desarrollar las condiciones físicas adecuadas para el
establecimiento de la cria a nivel artesanal.
- Comercializar los insectos benéficos producidos en el laboratorio
como Chrysoperla externa.
5. DISEÑO METODOLOGICO: 5.1. Tipo de Estudio y Diseño de contrastación de hipótesis
Diseño de Investigacion Aplicativa
Especie, Chrysoperla externa
5.2. Población, Muestra y Muestreo
La población objetiva de la presente estudio, está constituida por
Chrysoperla externa.
La muestra de estudio estará delimitada por las siguientes coordenadas:
5.3 Métodos, Materiales e instrumentos de recolección de datos,
El método ha utilizarse desde el momento en que se hara el recogido de
la información, así como cuando se trabajará con la Población y con la
determinación de la Muestra, de igual manera para la Elaboración de los
Resultados y Discusión, para la tabulación y elaboración de cuadros
estadísticos de los datos recogidos será determinada por el METODO ESTADISTICO.Para el presente proyecto, la GUIA DE OBSERVACION será utilizada
como instrumento de recolección de datos.
La técnica que utilizaremos será la OBSERVACION.
Para el presente proyecto, la GUIA DE OBSERVACION será utilizada
como instrumento de recolección de datos.
La técnica que utilizaremos será la OBSERVACION, el cual es un
proceso cuya función inmediata nos ayudara a recoger información
sobre el objeto en consideración, está recogida de información implicara
una actividad de codificación para ser transmitida.
5.4. Plan de procesamiento y Análisis de datos. -Excel
- Cuadros estadísticos
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