José Emilio Rebollo FeriaCáceres, 6 de septiembre, 2012
Presentación del Proyecto
Proyecto Estratégico PCJ1007
∗ PCJ1007: Biocontrol de bacterias en procesos de fermentación láctea: protección de la actividad de cultivos iniciadores y reducción de interferencias microbianas
∗ Financiación: FEDER y Junta de Extremadura
∗ Entidades participantes: INTAEX + UEx + 5 Empresas.
∗ Duración: 5/10/2011 - 5/10/2015
∗ Cuantía: 445.043 €
∗ Coordinador: José Emilio Rebollo Feria
∗ Número de investigadores participantes: 16
∗ 2 SUBPROYECTOS
� INVESTIGACIÓN APLICADA• Título: Selección, mejora y análisis de cepas virales aptas como sistemas
de biocontrol contra bacterias que interfieren la producción de quesos. • Investigador principal: José Emilio Rebollo Feria
�DESARROLLO TECNOLÓGICO• Título: Biocontrol de Escherichia coli en quesos de leche cruda y en
ubres de rumiantes mediante el uso de bacteriófagos.• Investigador principal: Rafael Tabla Sevillano
∗ 1 PLAN DE TRANSFERENCIA
• Responsable: Isidro Roa Ojalvo
GRUPOS DE LA UEx
∗ Área de Genética(Subproyecto de Investigación Aplicada):
∗José Emilio Rebollo Feria (TU)
∗Felipe Molina Rodríguez (CD)
∗Elena López Acedo (TA)
∗Encarnación Ferrera Guillén (AL)
∗ Área de Microbiología(Subproyecto de Desarrollo Tecnológico):
∗Manuel Ramírez Fernández (CU)
∗Isabel Oliveros Jiménez (TU)
∗Luis Miguel Hernández Martín (TU)
GRUPOS JUNTA DE EXTREMADURA
∗ Grupo de Lácteos del INTAEX(Subproyecto de Desarrollo Tecnológico):
∗Rafael Tabla Sevillano
∗Isidro Roa Ojalvo
∗José González Crespo
∗Antonia Gómez
∗Nuria Balas
∗ Fincas “La Orden” y “Valdesequera”∗Óscar Aceituno Romo
∗Fermín López Gallego
EMPRESAS
∗ Hermanos Pajuelo, SAT∗ Quesos del Casar, SL∗ Quesería Almonte, SL∗ Tentuqueso, SL∗ Lactocyex, SL
∗ Consejo Regulador DOP “Torta del Casar”∗ Consejo Regulador DOP “Queso de Ibores”
EQUIPO GENÉTICA UEx
� ELENA LÓPEZ
� FELIPE MOLINA
� JOSÉ EMILIO REBOLLO
Área de Genética de la UEx: Encarnación Ferrera
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Caracterizar genéticamente cepas alterantes (especialmente E. coli), previamente aisladas en las empresas colaboradoras.
∗ Electroforesis en campo pulsante
∗ PCR multiplex para bacterias coliformes
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Uso de fagos de laboratorio frente a las cepas aisladas. Obtención de mutantes virales.
∗ Perfil de sensibilidad a fagos de las bacterias alterantes aisladas de quesería y ganadería
∗ Aislamiento de mutantes claros y virulentos a partir de especiesvirales atemperadas
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Aislar, en los materiales de producción, cepas virales activas contra las bacterias alterantes.
∗ Aplicación de métodos de inducción lisogénica para posibles profagos
∗ Detección de fagos a partir de leche, suero y queso
∗ Enriquecimiento cíclico en fagos
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Caracterización de los virus aislados y mejora de su capacidad antibacteriana.
∗ Espectro de los virus en la lisis de bacterias autóctonas y de laboratorio
∗ Desarrollo de métodos moleculares de detección
∗ Análisis por microscopía electrónica de los virus aislados
∗ Derivados claros a partir de fagos atemperados
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Aplicación de procesos de inactivación viral, para reducir la presencia de fagos en el queso.
∗ Efectos de la alta presión hidrostática sobre el titulo de virus bacterianos en diversas etapas de la fabricación de queso (compartido con INTAEX)
∗ Otros tratamientos
INVESTIGACIÓN APLICADA: OBJETIVOS
∗ Diseño de cócteles virales como sistemas de biocontrol.
∗ Eventuales combinaciones de fagos naturales y artificiales en procesos de lisis bacteriana
∗ Espectros de lisis
EQUIPO LÁCTEOS
∗ ISIDRO ROA
∗ NURIA BALAS
∗ RAFAEL TABLA
∗ TONI GÓMEZ
∗ JOSÉ GONZÁLEZ
Área de Productos Lácteos
FINCA VALDESEQUERA
� FERMÍN LÓPEZ
� ÓSCAR ACEITUNO
TECNOLOGÍAS ESPECIALES APLICABLES AL PROYECTO
∗ Aplicación de HHP a diferentes productos o microorganismos.∗ Rango de presión 0-900 Mpa.∗ Tratamiento combinado de presión-temperatura∗ Análisis microbiológicos pre y post-tratamientos
∗ Estudios in vivo con ganado∗ Rebaño destinado a investigación (controlado)∗ Instalaciones
∗ Sistema de ordeño monitorizado∗ Separación de grupos
∗ RELACIONES CON EMPRESAS REGIONALES
∗ RELACIONES CON PORTUGAL∗ RITECA II
∗ CATAA – Associação Centro de Apoio Tecnológico Agro-Alimentar
∗ Universidade de Évora (Dto. Zootecnia)
UTILIDADES Y CONTACTOS
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
∗ 1. Aislamiento de cepas de E. coli a partir de queserías y ganadería.∗ Determinación de niveles de mesófilos totales,
enterobacterias, coliformes y E. coli.
∗ Evolución microbiana a lo largo de la maduración
∗ Aislamiento de coliformes
∗ Identificación
∗ Potencialidad de la terapia fágica en el control de E coli (y otros coliformes)
∗ Leche (laboratorio): ∗ cabra y oveja
∗ pH neutro y ácido
∗ Queso (planta piloto):∗ Torta
∗ Ibores
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
∗ Reducción de la hinchazón temprana en quesos de leche cruda (industria).
∗ Eliminación de bacteriófagos en quesos mediante el uso de altas presiones hidrostáticas.
DESARROLLO TECNOLÓGICO: OBJETIVOS
∗ Reducción de la contaminación superficial de las ubres de rumiantes por E coli (y otros coliformes) mediante terapia fágica.
∗ Reducción de la contaminación inicial de la leche durante la fase de ordeño.
∗ Determinación de la potencialidad de la terápia fágica de ubres en la reducción de la incidencia de mamitis en rumiantes.
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