FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA YCIENCIAS DEL MAR
FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO
CÓDIGO
MATERIA Microbiología FMAR03749
NOMBRE David Quiñonez
PARALELO 1
TEMA DE LA PRÁCTICA
Identificación Bioquímica de las Pseudomonas
OBJETIVOS GENERALES:- Establecer la metodología en la identificación de enterobacterias por medio de pruebas bioquímicas
estandarizadas y miniaturizadas.
INTRODUCCIÓN:API® 20 NE
Permite la identificación de bacilos gram negativos no pertenecientes al grupo de las enterobacterias como
por ejemplo Pseudomonas, Acinetobacter, Flavobacterium, Moraxella, Vibrio, Aeromonas, entre otros. Es
una galería conformada por 20 microtubos. (Biomerieux, 2014)
Consiste en:
Sistema de elección para bacterias responsables de infecciones oportunistas adquiridas en el hospital en
constante aumento (dado que estas bacterias están haciéndose cada vez más resistentes a los antibióticos,
es esencial una identificación precisa). (BioMérieux, 2010)
La combinación de pruebas bioquímicas estándar y pruebas de asimilación, totalmente adaptadas al
metabolismo no fermentativo de estas bacterias hace a estos tests, las pruebas de referencia para este tipo
de bacteria. (Biomerieux, 2014)
Fiabilidad garantizada por un inóculo estandarizado con una concentración bacteriana baja (0.5 MF),
evitando fallos de identificación por la presencia de cultivos mixtos y subcultivos. (BioMérieux, 2010)
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Fig1.-Prueba API 20 NE
Pueba Reacción / Enzimas Negativo Positivo
ONPG beta-galactosidasa sin color amarillo
ADH arginina deshidrolasa amarillo rojo o naranja
LDC lisina descarboxilasa amarillo rojo o naranja
ODC ornitina descarboxilasa amarillo rojo o naranja
CIT utilización del citrato verde azul oscuro o turquesa
H2S producción de H2Ssin precipitado
negro precipitado negro
URE ureasa amarillo rojo o naranja
TDA triptófano desaminasa amarillo marrón-rojo
IND producción de indol amarillo color rosa o anillo rosa-rojo
VP producción de acetoína (Voges-Proskauer) sin color rosa-rojo
GEL gelatinasa sin difusión difusión de pigmento
GLU fermentación/oxidación de glucosa azul o verde amarillo
MAN fermentación/oxidación de manitol azul o verde amarillo
INO fermentación/oxidación de inositol azul o verde amarillo
SOR fermentación/oxidación de sorbitol azul o verde amarillo
RHA fermentación/oxidación de ramnosa azul o verde amarillo
SAC fermentación/oxidación de sacarosa azul o verde amarillo
MEL fermentación/oxidación de melobiosa azul o verde amarillo
AMY fermentación/oxidación de amigdalina azul o verde amarillo
ARA fermentación/oxidación de arabinosa azul o verde amarillo
OX citocromo oxidasa
Tabla1.- Batería de pruebas API: Pruebas incluidas y tablas de lectura con coloraciones positivas y negativas
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EQUIPOS Y MATERIALES:
-Solución salina-Micropipeta-Agar con Pseudomona -Micropipeta-Api 20 NE -Tubo de ensayo Tubo de ensayo
PROCEDIMIENTO:
-Para la preparación del inoculo añadimos de 2 a 3ml de solución salina a la ampollo de Api, también se podría utilizar NaCl-Recogemos colonias de la placa y lo colocamos hasta crear una turbidez equivalente a 0.5 de Mc Farland-Una vez ya obtenida la suspensión con ayuda de una micropipeta añadimos 100L de la suspensión salina al Api en los diferentes medios, esta inoculación debe realizarse despacio procurando que la suspensión se deslice por las paredes de los medios evitando que queden burbujas.-Cerramos la caja de incubación, esto debe estar en un aproximado de 29 ° C durante 24 horas
RESULTADOS: (Puede incluir información, características)
Solo dio positivo para el ADH
Observaciones:-Mantener todo esterilizado al realizar la práctica.-Al momento de ver los resultados observar las coloraciones del API 20 NE y de la tabla que viene consigo.
Conclusión:-EL medio ADH se tornó de un color rojo por lo fue ahí que crecieron las pseudomonas aeruginosas.-Según la tabla1. la enzima que reacciona es la arginina deshidrolasa.
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BibliografíaBioMérieux. (2010). http://www.ucv.ve. Obtenido de http://www.ucv.ve:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_SistemasAPI.pdf
Biomerieux. (2014). http://www.biomerieux.com.ar. Obtenido de http://www.biomerieux.com.ar: http://www.biomerieux.com.ar/servlet/srt/bio/argentina/dynPage?open=ARG_CLN_PRD&doc=ARG_CLN_PRD_G_PRD_CLN_29&pubparams.sform=4&lang=es_ar
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