““Los mejores hombres Los mejores hombres son productoson producto
de sus propios de sus propios errores”errores”
Laboratorio # 3Laboratorio # 3
BacterioloBacteriologíagía
Objetivos del laboratorio
Entender la clasificación de las bacterias de Entender la clasificación de las bacterias de acuerdo a sus característicasacuerdo a sus características
Describir las estructuras y morfología de las Describir las estructuras y morfología de las bacteriasbacterias
Prácticar técnicas de cultivos de bacteriasPrácticar técnicas de cultivos de bacterias
LA CLA CÉÉLULALULA
Unidad básica de los organismos
Unicelular
Características de los seres vivos:
•Movimiento
•Respiración
•Metabolismo
•Reproducción
•Responden a estímulos Pluricelular
LA CLA CÉÉLULALULA Dos tipos de células: Eucariótica Procariótica
CCÉÉLULA EUCARILULA EUCARIÓÓTICATICA
Eu = verdadero Karios = núcleo
Organelos definidos
Grande y
compleja
CCÉÉLULA PROCARILULA PROCARIÓÓTICATICA Pro = Antes
Karios = núcleo Pequeña y simple
Reinos Categoría
taxonómica formada por fila o divisiones relacionados
Considerada la categoría más alta hasta finales del s. XX
ClasificaciónClasificación
Se reconocen cinco reinos en la actualidad Prokaryotae: organismos unicelulares, bacterias
y algas llamadas cianobacterias. Célula procariótica
Protista: organismos que solo tienen una célula eucariótica
Fungi: (hongos) descomponedores, parásitos (patógenos)
Plantae: organismos que usan clorofila para captar la energía lumínica y convertirla en alimento (fotosíntesis). Son autótrofos
Animalia: organismos heterótrofos
ClasificaciónClasificación
Nivel taxonómico más altoDominiDominioo
Dominio ArchaeaDominio ArchaeaArqueas:
•Halogeometricum borinquensis
•Haloterrigena thermotolerans
Dominio BacteriaDominio Bacteria
•Células procariotas (estructura simple)
•Carecen de núcleo u organelos
limitados por una membrana
•Tienen importancia positiva y negativa
CianobacteriasCianobacterias•Eran conocidas como algas azul-verdosas
•Organismos fijadores de nitrógeno
•Abundantes en charcas y lagos
Dominio EukaryaDominio Eukarya
•Se encuentran los diferentes reinos
•Organismos con núcleo verdadero
BacteriasBacterias
BacteriasBacterias•Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674)•Células microscópicas que se miden en micras (u)•Mayoría presentan pared celular compuesta de peptidoglucano (polimero de proteínas y carbohidratos)•Reproducción por fisión binaria (asexual)•Material genético encontrado en plásmidos•Algunas poseen cápsula•Pueden formar colonias
BacteriasBacterias•Crecimiento de las colonias
•Su morfología y tamaño se utilizan para identificar las especies de bacterias
Formas comunes
Márgenes comunes
Características de la superficie
Tinción BacterianaTinción Bacteriana•Utilización de tintes para identificar bacterias
•Tinción Gram•Células responden al tinte de acuerdo a la complejidad y composición de su pared celular (pared delgada o gruesa)•Bacterias Gram +•Gram –•Gram variable (menos común)
Tinción GramTinción GramBacteria Gram + Bacteria Gram -
Pared celular simple Pared celular compleja
Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina
No capa externa de lipopolisacáridos
Capa externa de lipopolisacáridos
Retienen cristal violeta/iodo-color azul/violeta
Retienen safranina-color rojo/rosado
Parte experimentalParte experimental
Técnicas de asepsia Técnicas de asepsia Contaminación de cultivos Trabajamos con posibles patógenos Limpiar mesas con Lysol Lavarse las manos Utilizar zafacón Utilizar guantes Utilizar bata
Ejercicio # 1: Ejercicio # 1: Preparación de laminilla Preparación de laminilla Preparar laminilla con muestra de sarro
Procedimiento: Gota de agua en laminilla Raspar sarro con palillo Pasar palillo en gota de agua Secar la laminilla utilizando lámpara de alcohol Derramar cristal violeta a la laminilla (2-3 gotas) Lavar exceso de tinte Secar con papel especial Observar preparación a través del microscopio Dibujar lo observado.
Ejercicio # 2: Ejercicio # 2: Observación de Observación de
laminillaslaminillas Observar laminillas Bacterias - tinción gram Bacilos Cocos Otras morfologías
Dibujar lo observado
Ejercicio # 3: Ejercicio # 3: MorfologMorfología ía bacterianabacteriana
Observar bajo estereoscopio las placas Petri para identificar la morfología de las colonias
Ejercicio # 4:Ejercicio # 4: Exposición de platosExposición de platos Tomar muestra de aire, agua, suelo, entre otros, utilizando la técnica a explicarse en el laboratorio
Colocarla en las placas Petri conteniendo un medio de cultivo (TSA) utilizando las técnicas asépticas correspondientes
Cerrar con parafina y rotular las placas: nombre, sección, clave, instructor.
Incubar a 25°C por 48 hrs Anotar y dibujar los resultados
Tomar en consideración a las bacterias, no a los hongos
Ejercicio # 5:Ejercicio # 5: Control de Control de crecimiento Bacterianocrecimiento Bacteriano
Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o antisépticos para determinar su eficacia inhibiendo el crecimiento de bacterias Inocular de forma estriada la muestra de bacterias en el
medio de cultivo Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes
sustancias químicas, sobre el agar y un disco con agua (control)
Rotular las placas Incubar a 37°C, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los
resultados (medir la zona de inhibición-cm)
Informe Escrito (40 Informe Escrito (40 pts)pts)
Será solo del ejercicio de control de crecimiento bacteriano Página presentación Introducción (incluir objetivos) Materiales y métodos Análisis de resultados (incluir gráficas, dibujos y/o
tablas) Conclusión Bibliografía (mínimo cinco)