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Mdulo 1: Morfofisiologa funcional Laboratorio de Fisiologa n1 SEMINARIO: Principios de organizacin y mtodos de estudio. De las clulas a los sistemas corporales.
TEST ELISAEnsayo por Inmunoabsorcin ligado a enzimas
Integrantes:
Gonzalo Ulloa Pamela Ureta Gabriela Zegarra
Ensayo por Inmunoabsorcin ligado a enzimas
Infeccin o enfermedad autoinmune
Fundamento Fisiolgico Anticuerpo y Sistema inmune humoral Sintetizados por linfocitos B Identificacin y neutralizacin de elementos extraos Regin hiper-variable y diversidad Reaccin de complementariedad Eptope (Ag) Partopo (Ac) Mltiples enlaces no covalentes
http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Anticuerpo.svg
Especificidad, rapidez, espontaneidad y reversibilidad
Ensayo por Inmunoabsorcin ligado a enzimasSustrato Enzima
Basado en: Interaccin Antgeno-Anticuerpo Elevada especificidad de los Anticuerpos La alta actividad de algunas enzimasTEST -
Conjugado especfico
Anticuerpo
Antgeno TEST +
The Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA); http://en.impactmalaria.com/iml/cx/en/layout.jsp?cnt=8E0526D1-4C12-4811-9A20-9859143FCECA
http://www.ferato.com/wiki/index.php/Test_de_Elisa
Antgeno/Anticuerpo marcados con una enzima Conjugado con actividad inmunolgica y enzimtica Actividad enzimtica sobre el substrato = cambio de color Espectrofotmetro colormetro
Clasificacin y Modalidades
HomogneosFase lquida
HeterogneosSoporte slido Inmovilizacin del inmunorreactante
Test ELISA - HETEROGNEOS
Deteccin de Antgenos
Deteccin de Anticuerpos
ELISAs sndwich
ELISAs indirectos
Anticuerpos marcados
ELISAs Sndwich1. Fijacin al soporte insoluble de anticuerpos especficosAdicin de la muestra Adicin de anticuerpos especficos conjugados con una enzima Adicin del sustrato Lectura visual o colorimtrica
2. 3.
4. 5.
http://www.cybertesis.edu.pe/sisbib/2004/rosas_dt/html/sdx/rosas_dt.html
ELISAs Indirecto1. Fijacin al soporte insoluble de antgenos especficosAdicin de la muestra Adicin de anti-anticuerpos conjugados con una enzima
2. 3.
4.5.
Adicin del sustratoLectura visual o colorimtrica
http://www.veterinaria.org/revistas/vetenfinf/vet_enf_inf_tripod/vetenfinftrip odcomar/5ELISA.htm
Deteccin de infecciones o enfermedades autoinmune
Limitaciones
Falso +Presencia de anticuerpos
Falso Baja produccin de anticuerpos Paciente enfermo
Paciente sano
Mdulo 1: Morfofisiologa funcional Laboratorio de Fisiologa n1 SEMINARIO: Principios de organizacin y mtodos de estudio. De las clulas a los sistemas corporales.
Ensayo por Inmunoabsorcin ligado a enzimasBibliografa: Soluciones ELISA, Protocolo y Tcnica;Javier Albadalejo, Cultek. http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/Soluciones-ELISAprotocolos.pdf Inmunologa e Inmunoqumica, Fundamentos; Ricardo Anbal Margani, 5ta edicin. Captulo 38 ELISA, pginas 798-820.
TEST ELISA