A) INTRODUCCIÓN A INNAVES S AA) INTRODUCCIÓN A INNAVES S.A.
B) PROYECTO LEVADURAS AUTÓCTONAS
C) NUEVAS PROPUESTAS AL SECTOR:
ENZIMAS INMOVILIZADAS
PRODUCCIÓN DE VINOS CON AROMAS PRODUCCIÓN DE VINOS CON AROMAS CARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE ELCARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE EL
PRODUCCIÓN DE VINOS CON AROMAS PRODUCCIÓN DE VINOS CON AROMAS CARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE ELCARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE ELCARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE EL CARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE EL
USO DE LEVADURAS AUTÓCTONAS GALLEGAS. USO DE LEVADURAS AUTÓCTONAS GALLEGAS. USO DE ENZIMAS INMOVILIZADAS. USO DE ENZIMAS INMOVILIZADAS.
CARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE EL CARACTERÍSTICOS DIFERENCIALES MEDIANTE EL USO DE LEVADURAS AUTÓCTONAS GALLEGAS. USO DE LEVADURAS AUTÓCTONAS GALLEGAS.
USO DE ENZIMAS INMOVILIZADAS. USO DE ENZIMAS INMOVILIZADAS.
I JORNADAS TÉCNICAS WINEtechI JORNADAS TÉCNICAS WINEtechJO S C C S tecJO S C C S tecVilagarcía de ArousaVilagarcía de Arousa
Abril 2010Abril 2010
Dr. Francisco Gómez GiráldezDr. Francisco Gómez GiráldezINNAVES S. A. INNAVES S. A. P I A Granxa c/ paralela 3 p 142 PORRIÑOP I A Granxa c/ paralela 3 p 142 PORRIÑOP. I. A Granxa, c/ paralela 3, p. 142, PORRIÑOP. I. A Granxa, c/ paralela 3, p. 142, PORRIÑOTlf. 986211669Tlf. 986211669www.innaves.comwww.innaves.com
BREVE INTRODUCCIÓN INNAVES S. A.BREVE INTRODUCCIÓN INNAVES S. A.
• Empresa constituída en 1989
• Dos departamentos:
1) Ingeniería ( i i d d li t ió )1) Ingeniería (maquinaria de procesos de alimentación):- Autoclaves de pasteurización- Biorreactores
2) BiotecnologíaInstalaciones:- Sala de fermentación- Sala de centrifugado- Atomización- Planta de proceso- Laboratorio
INNAVES S. A.INNAVES S. A.
Sala de centrifugación
Sala de fermentación
Atomización
Planta de proceso
INNAVES S. A.INNAVES S. A.
Laboratorio
INNAVES S. A.INNAVES S. A.
Productos biotecnológicos:- BacteriocinasBacteriocinas- Bacterias lácticas y microorganismos de interés alimentario- Lowpept®
INNAVES S. A.INNAVES S. A.
HPLC-masas, IFI Yogures y leches antihipertensivas
INNAVES S. A.INNAVES S. A.
Productos en desarrollo:
- Sistema de detección rápida de patógenos alimentarios yambientales mediante anticuerpos inmovilizados sobrenanopartículas metálicas (Salmonella spp Listeria sp E coli ynanopartículas metálicas (Salmonella spp., Listeria sp., E. coli yLegionella sp.)- Sistema de deslactosado de la leche mediante la enzima beta-galactosidasa inmovilizada sobre partículas inertesgalactosidasa inmovilizada sobre partículas inertes
S
P
B) PROYECTO LEVADURAS AUTÓCTONAS)
Mejora en la producción de levaduras a escala de laboratoriode laboratorio
Curva crecimiento IN274
1,00E+08
1,00E+09
1,00E+05
1,00E+06
1,00E+07
Ufc
/mL YPD
Medio cultivoInnaves
1,00E+040 10 20 30 40 50
Tpo (H)
Curva crecimiento ALB6Curva crecimiento ALB6
1,00E+08
1,00E+09
1,00E+05
1,00E+06
1,00E+07
Ufc
/mL YPD
Medio cultivoInnaves
1,00E+040 10 20 30 40 50
Tpo (H)
Producción de levaduras escala semi-industrial
Curva crecimiento IN 274 escala industrial
1,00E+08
1,00E+09
L
1,00E+05
1,00E+06
1,00E+07
Ufc
/mL
,0 5 10 15 20
Tpo (h)
Curva crecimiento ALB6 escala industrial
1,00E+08
1,00E+09
L
1,00E+05
1,00E+06
1,00E+07
0 5 10 15 20 25
Ufc
/mL
0 5 10 15 20 25
Tpo (h)
Conservación de las levaduras en refrigeración
Conservación IN274
1 00E+08
1,00E+09
1,00E+10
c/m
L
1,00E+06
1,00E+07
1,00E+08
0 5 10 15 20 25 30 35
Ufc
Conservación Alb 6
0 5 10 15 20 25 30 35
Tpo (dias)
1,00E+09
1,00E+10
mL
1 00E+06
1,00E+07
1,00E+08
Ufc/
m
1,00E+060 5 10 15 20 25 30 35
Tpo (dias)
Identificación genética de las levaduras ginoculadas
Mediante análisis de perfiles de restricción de ADN mitocondrial
Querol. et al. Appl.Environ. Microbiol.1992c, 59: 2948-2953
Seguimiento de la evolución de las fermentacionesfermentaciones
Parámetros controlados durante la fermentación: densidad, turbidez, temperatura, pH consumo de azúcares reductores producción de etanol producción de glicerolpH, consumo de azúcares reductores, producción de etanol, producción de glicerol..
1) Descenso de la densidadAlbariño
1100
Treixadura
1100
1020
1040
1060
1080
Dens
idad
LX-espLX-ALB6LX-IN274LX-QA23
1020
1040
1060
1080
1100
Den
sida
de
TRX-ALB6TRX-IN274TRX-QA23TRX-esp
980
1000
0 2 4 6 8 10 12 14 16
Tempo (días)
980
1000
0 2 4 6 8 10 12 14
Tempo (días)
2) Consumo azúcares reductores
CATA 2008CATA 2008
Ñ TREIXADURA
CATA 2008CATA 2008
ALBARIÑO
5 0
6,0Intensidad de color
Reflejo verdoso
fó é
GLOBAL
TREIXADURA
5
6Intensidad de color
Reflejo verdoso
Reflejo amarilloPercepción esférica
GLOBAL
1 0
2,0
3,0
4,0
5,0 Reflejo amarillo
Limpidez
Intensidad AromáticaAlcohol
Estructura
Percepción esférica
1
2
3
4
Reflejo amarillo
Limpidez
Intensidad AromáticaAlcohol
Estructura
Percepción esférica
0,0
1,0 Intensidad Aromática
FinuraArmonía
Alcohol
0
1 Intensidad Aromática
FinuraArmonía
Alcohol
Limpieza (franqueza)
Fragancia
PersistenciaD l
Ácido
Amargo
Suavidad/delicadeza Limpieza (franqueza)
Fragancia
PersistenciaD lce
Ácido
Amargo
Suavidad/delicadeza
Dulce
TEST ALB-6 IN 274 IN 277
Dulce
TEST ALB-6 IN 274 IN 277
CATA 2009CATA 2009
TREIXADURA INNAVES 09
5,0
6,0
7,0Intensidad
Finura
Limpieza (franqueza)Percepción esférica
Calidad Global
1,0
2,0
3,0
4,0Limpieza (franqueza)
FraganciaEstructura
Percepción esférica
0,0
1,0
PersistenciaAlcohol
Dulce
ÁcidoSuavidad/delicadeza
Armonía
Amargo
TX-Esp TX-Alb6 TX-IN274 TX-QA23
C) NUEVAS PROPUESTAS AL SECTOR:
ENZIMAS INMOBILIZADAS
LAS ENZIMAS COMO CATALIZADORES BIOLOGICOS LAS ENZIMAS COMO CATALIZADORES BIOLOGICOS (ESTRÉS REGULACIÓN)(ESTRÉS REGULACIÓN)(ESTRÉS, REGULACIÓN)(ESTRÉS, REGULACIÓN)
Catalizadores solublesCatalizadores inestables (maquinaria genética)( g )Inhibición por substratos y productosSubstratos naturales…Condiciones fisiológicasCondiciones fisiológicasReacciones en cadena (inactivación de oxidasas por H2O2)Procesos de equilibrio (sentido de interés biológico)
LAS ENZIMAS COMO CATALIZADORES LAS ENZIMAS COMO CATALIZADORES QUIMICOS INDUSTRIALESQUIMICOS INDUSTRIALESQUIMICOS INDUSTRIALESQUIMICOS INDUSTRIALES
ALIMENTACION DE SUSTRATO ESTABLE CONDICIONES EXPERIMENTALES DEFINIDAS REGULACIÓN POR TIEMPO DE RESIDENCIAREGULACIÓN POR TIEMPO DE RESIDENCIA
S
Catalizadores heterogéneosCatalizadores heterogéneosCatalizadores muy establesCatalizadores muy establesNo inhibiciónNo inhibiciónSubstratos naturales y sintéticosSubstratos naturales y sintéticosTodo tipo de condiciones experimentalesTodo tipo de condiciones experimentalesp pp pDesplazamientos de equilibrio (sentido de Desplazamientos de equilibrio (sentido de
interés industrial)interés industrial)P
ALGUNOS HITOS DE LA BIOCATÁLISIS APLICADAALGUNOS HITOS DE LA BIOCATÁLISIS APLICADA
Fermentaciones Tradicionales (yogurs, queso, vino….)
Producción de acrilamida (nitrilhidratasa) Resolución de mezclas racémicas (lipasas, acilasas)Almidón …. Fructosa (amilasa, glucoamilasa)Hidrólisis de lactosa a galactosa y glucosa (beta gal)
Procesos Procesos EnzimáticosEnzimáticos
Hidrólisis de lactosa a galactosa y glucosa (beta-gal)Sensores de glucosa (glucosa oxidasa)Detergentes (proteasas, lipasas)g (p , p )
PP Tratamiento aguas residuales (lodos activos)Procesos Procesos CélulasCélulas
Tratamiento aguas residuales (lodos activos)Fermentaciones industriales: Producción de Penicilina
(bacterias)
QUÍMICA DE ALIMENTOSQUÍMICA DE ALIMENTOS
Síntesis de Alimentos FuncionalesSíntesis de Alimentos Funcionales
1. Síntesis de aglicoflavonas
β GLUCOSIDASAS
MEJORA DE LECHE DE SOJA MEJORA DEL VINO: AUMENTO DE
β-GLUCOSIDASAS
MEJORA DE LECHE DE SOJA
Otieno D.O et al. J. Appl. Microb. 2007, 103: 10-917 Todaro A. et al. Food Chemistry 2008, 107: 1570-1575
MEJORA DEL VINO: AUMENTO DE TRANS-RESVERATROL
pp ,
2. Síntesis de esteres de ácidos grasos poliinsaturados
oda o e a ood C e s y 008, 0 5 0 5 5
Pawongrat R. et al. Food Chemistry 2007, 104: 251-258
ÉSTERES GLICÉRICOS Omega 3 y Omega 6
ENZIMAS EN QUIMICA DE ALIMENTOS
Uso de Beta-glucosidasas para liberar aromas en vino
Mono‐ and disaccharide sugar moieties that have been identified as flavour precursors in grapes p g p
INMOVILIZACION DE ENZIMASINMOVILIZACION DE ENZIMAS
Enzima solubleEnzima soluble Enzima inmovilizadaEnzima inmovilizada
S + EEE SReRe--uso ó uso continuouso ó uso continuoMejor control de la reacciónMejor control de la reacciónProceso mas sencillo y mas limpioProceso mas sencillo y mas limpioEnzimaEnzima--electrodoelectrodo
ESTRATEGIA GENERAL DE ESTABILIZACION DE ESTRATEGIA GENERAL DE ESTABILIZACION DE ENZIMAS POR INMOVILIZACION COVALENTEENZIMAS POR INMOVILIZACION COVALENTEENZIMAS POR INMOVILIZACION COVALENTE ENZIMAS POR INMOVILIZACION COVALENTE
MULTIPUNTUALMULTIPUNTUAL
Muchos residuos de la enzimaMuchos residuos de la enzimaMuchos residuos de la enzimaMuchos residuos de la enzimaBrazos espaciadores muy cortosBrazos espaciadores muy cortosSoporte rígidoSoporte rígido
Posiciones relativas invariables durante cualquier cambio conformacional Posiciones relativas invariables durante cualquier cambio conformacional inducido por cualquier agente distorsionarteinducido por cualquier agente distorsionarte
ESTABILIZACION 3DESTABILIZACION 3D
COMO CONSEGUIR ESTE TIPO DE INMOVILIZACIONES??COMO CONSEGUIR ESTE TIPO DE INMOVILIZACIONES??
RIGIDIFICACION DE DIFERENTES REGIONESRIGIDIFICACION DE DIFERENTES REGIONES
Proximidad al centro activoRegiones mas ricas en Lys
Bucle inestableBucle inestable
DESARROLLOS PREVISTOS CON ESTA DESARROLLOS PREVISTOS CON ESTA TECNOLOGÍA PARA EL SECTOR ENOLÓGICOTECNOLOGÍA PARA EL SECTOR ENOLÓGICOTECNOLOGÍA PARA EL SECTOR ENOLÓGICOTECNOLOGÍA PARA EL SECTOR ENOLÓGICO
1) Desarrollo de aromas: desglicosilación de t áti (b t l id )terpenos aromático (beta-glucosidasa)
2) Reducción de las aminas biógenas (monoamino-oxidasa)TRANSVASE oxidasa)
3) Reducción de la urea (ureasa)
TRANSVASE
CIRCUITO CERRADO
Gracias por su atenciónGracias por su atención
INNAVES S AINNAVES S. A.P. I. A Granxa, c/ paralela 3, p. 142PorriñoTlf. 986211669